[目的]探究梅花鹿富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白3(cysteine and glycine-rich protein 3,CSRP3)基因的生物学作用及其在不同肌肉组织中的表达情况。[方法]以梅花鹿背最长肌为试验材料,克隆获得CSRP3基因,测序后进行相似性比对,构建系统进化...[目的]探究梅花鹿富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白3(cysteine and glycine-rich protein 3,CSRP3)基因的生物学作用及其在不同肌肉组织中的表达情况。[方法]以梅花鹿背最长肌为试验材料,克隆获得CSRP3基因,测序后进行相似性比对,构建系统进化树,并对CSRP3蛋白进行生物信息学分析。运用实时荧光定量PCR技术来研究梅花鹿背最长肌、臀大肌、股四头肌、肋间肌中CSRP3基因的表达差异。[结果]成功克隆出梅花鹿CSRP3基因,其编码区片段大小为585 bp,共编码194个氨基酸。BLAST比对结果显示,梅花鹿CSRP3基因与马鹿的相似性最高,为99.83%,与白尾鹿、牛、羊的相似性均超过95%,说明梅花鹿CSRP3基因在进化中具有高度保守性;根据梅花鹿CSRP3基因构建系统进化树,结果表明,梅花鹿与马鹿的亲缘关系最近,与虎和虎鲸的亲缘关系最远。CSRP3基因编码蛋白分子式为C_(903)H_(1403)N_(263)O_(275)S_(19),相对分子质量为20 952.81,理论等电点(pI)为8.89,脂肪系数为43.81,其二级结构以不规则卷曲为主;亚细胞定位于细胞核内。实时荧光定量PCR结果表明,CSRP3基因在梅花鹿不同部位肌肉组织中均有表达,在梅花鹿肋间肌中的表达量最高,与背最长肌、臀大肌、股四头肌存在显著性差异(P<0.05),而背最长肌、臀大肌和股四头肌之间CSRP3基因表达量差异并不显著(P>0.05)。[结论]本研究成功克隆了梅花鹿CSRP3基因,其编码蛋白位于细胞核内;CSRP3基因在梅花鹿不同肌肉组织中存在差异表达。本研究结果为CSRP3基因在梅花鹿肉品质方面的调控机制研究提供了数据基础。展开更多
文摘[目的]探究梅花鹿富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白3(cysteine and glycine-rich protein 3,CSRP3)基因的生物学作用及其在不同肌肉组织中的表达情况。[方法]以梅花鹿背最长肌为试验材料,克隆获得CSRP3基因,测序后进行相似性比对,构建系统进化树,并对CSRP3蛋白进行生物信息学分析。运用实时荧光定量PCR技术来研究梅花鹿背最长肌、臀大肌、股四头肌、肋间肌中CSRP3基因的表达差异。[结果]成功克隆出梅花鹿CSRP3基因,其编码区片段大小为585 bp,共编码194个氨基酸。BLAST比对结果显示,梅花鹿CSRP3基因与马鹿的相似性最高,为99.83%,与白尾鹿、牛、羊的相似性均超过95%,说明梅花鹿CSRP3基因在进化中具有高度保守性;根据梅花鹿CSRP3基因构建系统进化树,结果表明,梅花鹿与马鹿的亲缘关系最近,与虎和虎鲸的亲缘关系最远。CSRP3基因编码蛋白分子式为C_(903)H_(1403)N_(263)O_(275)S_(19),相对分子质量为20 952.81,理论等电点(pI)为8.89,脂肪系数为43.81,其二级结构以不规则卷曲为主;亚细胞定位于细胞核内。实时荧光定量PCR结果表明,CSRP3基因在梅花鹿不同部位肌肉组织中均有表达,在梅花鹿肋间肌中的表达量最高,与背最长肌、臀大肌、股四头肌存在显著性差异(P<0.05),而背最长肌、臀大肌和股四头肌之间CSRP3基因表达量差异并不显著(P>0.05)。[结论]本研究成功克隆了梅花鹿CSRP3基因,其编码蛋白位于细胞核内;CSRP3基因在梅花鹿不同肌肉组织中存在差异表达。本研究结果为CSRP3基因在梅花鹿肉品质方面的调控机制研究提供了数据基础。