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miR-544a对非小细胞肺癌细胞系Wnt信号通路抑制因子GSK3β表达的调控作用 被引量:4
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作者 李化会 莫晓媚 孙桂荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期761-764,共4页
目的探讨微小RNA-544a(miR-544a)对肺癌干细胞的自我更新能力影响及其可能的机制。方法通过生物信息学预测miR-544a的靶向基因,用荧光素酶报告系统及western blot验证其靶向关系;构建稳定表达miR-544a的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和9... 目的探讨微小RNA-544a(miR-544a)对肺癌干细胞的自我更新能力影响及其可能的机制。方法通过生物信息学预测miR-544a的靶向基因,用荧光素酶报告系统及western blot验证其靶向关系;构建稳定表达miR-544a的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D,并用荧光定量PCR验证;用肿瘤球悬浮培养实验检测miR-544a在形成肿瘤球中的作用。结果生物信息学预测发现,miR-544a可以靶向调节Wnt信号通路的抑制子GSK3β,并通过荧光素酶报告系统得到了验证(F=201.37,P<0.01);western blot结果显示,miR-544a可以下调GSK3β的表达,而β-catenin、CD133蛋白表达水平明显上调(F分别为7.73,3.37,9.43,P均<0.01);荧光定量PCR结果显示,95C、95D细胞在转染miR-544a后,miR-544a表达水平增高,分别为20.51±0.97、15.16±1.38(F=418.05,P<0.01)。肿瘤球悬浮培养实验发现,稳定表达miR-544a的细胞能够反复形成具有肿瘤干细胞特性的肿瘤球。结论 miR-544a可以通过直接下调GSK3β的表达来激活Wnt信号通路,以维持肺癌干细胞自我更新能力。 展开更多
关键词 miR-544a 非小细胞肺癌 肿瘤干细胞 GSK3Β WNT信号通路
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转染miR-544a对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响 被引量:2
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作者 李化会 莫晓媚 孙桂荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期852-855,共4页
目的探讨miR-544a对肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用miRNA芯片对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D进行miRNA谱系分析,并用荧光定量PCR验证其miR-544a表达水平;用Targetscan软件预测miR-544a的靶基因;Transwell实... 目的探讨miR-544a对肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响及其分子机制。方法用miRNA芯片对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D进行miRNA谱系分析,并用荧光定量PCR验证其miR-544a表达水平;用Targetscan软件预测miR-544a的靶基因;Transwell实验观察细胞的侵袭转移能力的变化;western blot验证其表达。结果 miRNA芯片及荧光定量PCR结果显示,与95C细胞(1.00±0.00)比较,miR-544a在95D细胞中表达上调(2.95±0.26,t=12.94,P<0.05);Transwell实验结果显示,95C转染miR-544a mimic后增加(32.00±1.00,q=18.67,P<0.01),95D转染miR-544a inhibitor后,侵袭和转移能力降低(11.00±1.00,q=13.67,P<0.01);Targetscan软件预测E-钙粘连素(CDH1)可能为miR-544a的靶基因;western blot显示,95C转染miR-544a mimic后,CDH1表达下调,vimentin表达上调(0.202±0.017,0.574±0.009,q分别为63.86,9.45,P均<0.01);而95D转染miR-544a inhibitor后,CDH1表达上调,而vimentin表达下调(0.769±0.014,0.320±0.020,q分别为18.67,5.99,P均<0.01)。结论 miR-544a可能通过下调CDH1和上调vimentin的表达来促进肺癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 微小RNA-544a 非小细胞肺癌 E-钙粘连素 波形蛋白 侵袭
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应用SELDI-TOF-MS技术建立SLE患者血清蛋白质指纹图谱筛选模型 被引量:1
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作者 宋卫青 李化会 +2 位作者 陈华波 原江水 殷晓婕 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第33期60-62,共3页
目的筛选系统性红斑狼疮(SLE)血清蛋白质指纹图谱模型,并探讨其意义。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SEIDI-TOF-MS)技术获得SLE、类风湿关节炎患者(RA组)、健康人群(对照组)血清中的蛋白质谱,用计算机软件比较分析,建立SLE血... 目的筛选系统性红斑狼疮(SLE)血清蛋白质指纹图谱模型,并探讨其意义。方法用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SEIDI-TOF-MS)技术获得SLE、类风湿关节炎患者(RA组)、健康人群(对照组)血清中的蛋白质谱,用计算机软件比较分析,建立SLE血清蛋白质指纹图谱筛选模型,并验证该模型诊断SLE的灵敏度和特异性。结果SLE组与非SLE组共有11种蛋白质表达有显著性差异;以其中4个蛋白质生物标志物(5 739 Da、10 832 Da、4 650 Da、15 797 Da)组建的筛选模型,经双盲法验证其灵敏度为84.4%,特异性为90.3%。结论应用SEIDI-TOF-MS技术建立的血清蛋白质指纹图谱模型在SLE的早期诊断中具有一定价值。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术 类风湿关节炎
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内毒素诱导肝细胞凋亡及肝细胞生长因子的抑制作用观察
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作者 宋卫青 吕维红 +3 位作者 陈华波 张大志 李化会 吴健民 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第18期16-17,共2页
目的观察内毒素(LPS)诱导肝细胞凋亡的作用及肝细胞生长因子(HGF)对LPS的拮抗作用。方法HepG2细胞传代培养24 h,分三组。对照组加原培养液,LPS组加含LPS(20μg/ml)的培养液,干预组加含LPS(20μg/ml)、HGF(40 U/L)的培养液.继续培养16 h... 目的观察内毒素(LPS)诱导肝细胞凋亡的作用及肝细胞生长因子(HGF)对LPS的拮抗作用。方法HepG2细胞传代培养24 h,分三组。对照组加原培养液,LPS组加含LPS(20μg/ml)的培养液,干预组加含LPS(20μg/ml)、HGF(40 U/L)的培养液.继续培养16 h。Tunel标记法检测细胞凋亡。结果LPS组细胞凋亡率为98.65%±0.64%.干预组为35.97%±0.45%,两组相比,P<0.01。结论LPS可诱导肝细胞凋亡,HGF可抑制LPS所诱导的肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 内毒素 肝细胞生长因子 细胞凋亡 肝细胞
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