猪品种间ESR基因PCR-RFLP的初步研究 被引量：26

1

作者 李凤娥 熊远著 +2 位作者 邓昌彦 郑嵘 屈彦纯 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期37-39,共3页

利用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测了不同猪品种的ESR基因PvuⅡ RFLP。结果表明 :品种间基因频率差异极显著 (P <0 .0 1 )。并试分析了PvuⅡ

关键词 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 雌激素受体(ESR)基因 产仔数 猪

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pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用 被引量：5

2

作者 李凤娥 向国艳 +4 位作者 孔繁利 郝峰 杨紫嫣 郑岩 方芳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期612-616,I0004,共6页

目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮... 目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞。转染后36h,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率;台盼蓝染色法检测细胞存活率,以此获得优化的转染条件。同时将pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5分别以上述条件转染,并获取相应优化的转染条件。结果:在质粒质量固定的条件下,随着脂质体质量的增加,其转染效率和细胞存活率升高;但是当质粒∶脂质体>1∶4时,转染效率和细胞存活率下降。在质粒和脂质体比例固定而质量增加时,其转染效率和细胞存活率下降;当质粒∶脂质体>3.2μg∶12.8μL时,转染效率降低。应用脂质体介导的方法转染pEGFP-N1和转染pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5时,在质粒与脂质体的配比为1∶4(3.2μg∶12.8μL)时,转染效率达最高。结论:在应用脂质体介导的目的基因转染时,pEGFP-N1优化的转染条件具有较为广泛的适用性,可用作后续目的基因高效转染优化条件。 展开更多

关键词 脂质体 PEGFP-N1 转染 甲状腺滤泡上皮细胞

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猪ESR mRNA在不同组织表达的定量研究 被引量：4

3

作者 李凤娥 熊远著 +3 位作者 雷明刚 邓昌彦 郑嵘 蒋思文 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期492-494,共3页

以看家基因GAPDH为内标 ,采用半定量RT PCR法检查了ESRmRNA在卵巢等 12种组织中表达情况。结果表明ESR基因有 2种表达产物 ,其中在肠、卵巢、脾、心、肺、肝等组织的表达产物为一种形式 ,而子宫、肌肉等组织为另一种形式 ,在肾中 2种形... 以看家基因GAPDH为内标 ,采用半定量RT PCR法检查了ESRmRNA在卵巢等 12种组织中表达情况。结果表明ESR基因有 2种表达产物 ,其中在肠、卵巢、脾、心、肺、肝等组织的表达产物为一种形式 ,而子宫、肌肉等组织为另一种形式 ,在肾中 2种形式的表达产物共存。通过计算机凝胶成像分析系统 ,对胶进行扫描 ,显示出在 12种组织中 ,ESRmRNA表达量在肺中最高 ,其次是卵巢、肠、心、子宫、脾、肝、肌肉等。在输卵管、肾、脂肪和乳腺组织中 ,ESRmRNA表达量很少。 展开更多

关键词 猪 ESR基因 半定量RT-PCR 表达

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重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位 被引量：3

4

作者 李凤娥 郝峰 +4 位作者 藏雨轩 马睿泽 孔繁利 刘磊 李艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期273-277,428,共5页

目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得a... 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。 展开更多

关键词 AQUAPORIN-4 转染 FRT细胞 载体

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ESR基因型与青年母猪外周血液激素浓度的关系 被引量：2

5

作者 李凤娥 熊远著 +3 位作者 雷明刚 邓昌彦 郑嵘 蒋思文 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期643-645,共3页

采用放免法测定了不同ESR基因型青年母猪 (各 3头 )外周血液激素浓度的变化。结果表明 :4种激素浓度随着生理状况不同出现明显波动 ;3种ESR基因型雌二醇变化曲线一致 ,在发情同一时期 ,雌二醇浓度差异不显著 ;AA型和AB型孕酮变化曲线一... 采用放免法测定了不同ESR基因型青年母猪 (各 3头 )外周血液激素浓度的变化。结果表明 :4种激素浓度随着生理状况不同出现明显波动 ;3种ESR基因型雌二醇变化曲线一致 ,在发情同一时期 ,雌二醇浓度差异不显著 ;AA型和AB型孕酮变化曲线一致 ,在发情后第 7天 ,AA和AB基因型远高于BB型 (P <0 .0 5 ) ;在发情初期BB基因型FSH浓度显著比AA型高 (P =0 .0 5 ) ,但是在发情后第 14天AA型与AB基因型FSH浓度比BB型高 (P =0 .0 7)。没有检测到 3种基因型青年母猪LH浓度存在显著差异。 展开更多

关键词 猪 ESR基因型 雌二醇 孕酮 促卵泡素 促黄体素

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卵泡刺激素基因研究概况 被引量：22

6

作者 李凤娥 熊远著 《国外畜牧学（猪与禽）》 2001年第1期35-37,共3页

通过候选基因法 ,证明了卵泡刺激素基因与动物产仔性能显著相关 ,其显著效应受到国内外普遍关注。本文从FSH基因的分子结构、生理功能和生物合成、基因定位及其在遗传图谱的位置、突变与生殖的关系四个方面作一综述 。

关键词 卵泡刺激素基因 FSH 基因定位

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绵羊FecB基因分离克隆的研究进展 被引量：5

7

作者 李凤娥 熊远著 《国外畜牧科技》 2001年第6期42-44,共3页

Fec B基因是一个影响绵羊排卵率的基因。本文就该基因的提出、基因型判定、生理效应以及分离克隆等方面作一综述。

关键词 绵羊 FECB基因 分离克隆 排卵率

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猪繁殖力主基因和QTL的研究进展 被引量：2

8

作者 李凤娥 熊远著 邓昌彦 《国外畜牧学（猪与禽）》 2003年第4期31-35,共5页

关键词 猪 繁殖力 主效基因 QTL 功能候选基因法 基因组扫描法

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《猪生产学实验》线上线下混合式课程建设与实践 被引量：2

9

作者 李凤娥 蒋思文 +2 位作者 左波 任竹青 柴进 《养殖与饲料》 2022年第12期1-4,共4页

[目的]研究华中农业大学《猪生产学实验》线上线下混合式课程改革方案建设及实践情况。[方法]通过整合线上线下资源进行《猪生产学实验》混合式课程改革与实践,通过问卷调查研究课程建设与实践情况。[结果]制定了《猪生产学实验》线上... [目的]研究华中农业大学《猪生产学实验》线上线下混合式课程改革方案建设及实践情况。[方法]通过整合线上线下资源进行《猪生产学实验》混合式课程改革与实践,通过问卷调查研究课程建设与实践情况。[结果]制定了《猪生产学实验》线上线下混合式课程改革的方案,完成了3年的改革实践。通过调查发现,81%学生认为混合式教学模式有助于掌握知识点以及提高自主学习能力。[结论]可以在动物科学专业进行《猪生产学实验》线上线下混合式课程教学。 展开更多

关键词 猪生产学实验 虚拟仿真实验 线上线下混合式教学 动物科学

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猪繁殖性状的遗传改良 被引量：1

10

作者 李凤娥 熊远著 邓昌彦 《国外畜牧学（猪与禽）》 2003年第5期35-37,共3页

关键词 猪 繁殖性状 遗传改良 杂种优势 窝仔数 选择试验 标记辅助选择 单基因鉴别

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宰前休息方式对猪福利、血液成分及肉质的影响 被引量：25

11

作者 柴进 彭健 +5 位作者 熊琪 张昌新 缪文 李凤娥 郑嵘 蒋思文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1645-1650,共6页

选取体质量约为100 kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪60头,随机分为3组:不休息组,休息3 h组,休息3 h+玩具组,公母各半。根据评分标准分别记录休息过程中猪的精神状况。放血时收集血样,用于分析血浆中皮质醇、促肾上腺皮质激素(... 选取体质量约为100 kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪60头,随机分为3组:不休息组,休息3 h组,休息3 h+玩具组,公母各半。根据评分标准分别记录休息过程中猪的精神状况。放血时收集血样,用于分析血浆中皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度,乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性,乳酸、血糖浓度;添加EDTA-K2抗凝剂的血样用于血细胞分析。同时在放血时,测定血温。屠宰后,测定背最长肌24 h滴水损失;背最长肌(LM)、半膜肌(SM)45 min以及24 h的pH、色值、导电率。结果表明:①休息3 h+玩具组在3个时间段的精神评分要极显著高于休息3 h组,随着时间的延长猪都表现出趋于平静的趋势;②休息3 h+玩具组和休息组3 h组在皮质醇、促肾上腺皮质激素要显著低于不休组(P<0.05),相反乳酸脱氢酶、肌酸激酶要显著高于不休息组(P<0.05),而休息3h+玩具组与休息3 h组差别不显著(P<0.05);③3个休息处理组在肉质指标上没有出现显著差别(P<0.05);④休息3 h+玩具组、休息3 h组在红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)均要显著低于不休息组(P<0.05);休息3h+玩具组在白细胞数(WBC)上显著高于不休组(P<0.05);休息3 h组的淋巴细胞绝对值(W-SCC)显著高于不休息组(P<0.05);而休息3 h+玩具组与休息3 h组在所有的免疫指标上都没有显著差异(P>0.05)。根据上述的结果显示,宰前一定要让猪有一个休息的过程,这种措施能有效缓解猪的应激,并能恢复其免疫能力;在休息的过程中,添加部分福利玩具,至少对猪的精神状态有明显的好处。 展开更多

关键词 商品猪 休息方式 猪福利 血液指标 肉质

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宰杀方式对猪血液成分以及肉质的影响 被引量：8

12

作者 柴进 彭健 +5 位作者 熊琪 张昌新 缪文 李凤娥 郑嵘 蒋思文 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期583-586,共4页

选择体重约为100kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪16头，按照年龄、体重相近，公母各半原则分为2组，试验1组采取直接刺杀心脏放血致死。试验2组采取电麻（75V、1．5A、3～4s）击晕后，割破颈部血管放血致死。屠宰后测定血液... 选择体重约为100kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪16头，按照年龄、体重相近，公母各半原则分为2组，试验1组采取直接刺杀心脏放血致死。试验2组采取电麻（75V、1．5A、3～4s）击晕后，割破颈部血管放血致死。屠宰后测定血液生化指标、相关肉质指标以及免疫指标。结果表明：屠宰方式对肉质与免疫能力的影响较小，但反映应激程度的激素指标（皮质醇、促肾上腺皮质激素）差异显著，在屠宰过程中，经历电麻击晕方式的猪比直接刺杀心脏放血屠宰的猪应激程度要小得多，从动物福利角度考虑，电麻击晕优于直接刺杀心脏放血。因此，在这2种屠宰方式选择上，应该优先考虑电麻击晕这一屠宰方式。 展开更多

关键词 宰杀方式 生化指标 免疫指标 肉质

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猪4、8和13染色体上肉质性状的QTL定位 被引量：8

13

作者 张敬虎 熊远著 +6 位作者 左波 雷明刚 蒋思文 李凤娥 郑嵘 李家连 钱辉跃 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1009-1014,共6页

214头猪(180头F2个体)组成的资源家系中,在猪的第4、8和13染色体上共选取23个微卫星标记,对11种肉质性状做了QTL定位,这些肉质性状包括:背最长肌肌内脂肪率(IMF)、背最长肌含水量(WM)、背最长肌系水力(WHC)、背最长肌失水率(DLR)、背最... 214头猪(180头F2个体)组成的资源家系中,在猪的第4、8和13染色体上共选取23个微卫星标记,对11种肉质性状做了QTL定位,这些肉质性状包括:背最长肌肌内脂肪率(IMF)、背最长肌含水量(WM)、背最长肌系水力(WHC)、背最长肌失水率(DLR)、背最长肌pH(pH1)、股二头肌pH(pH2)、头半棘肌pH(pH3)、背最长肌肉色值(MCV1)、股二头肌色值(MCV2)、背最长肌大理石纹评分(MMS1)和股二头肌大理石纹评分(MMS2)。结果表明:检测到2个染色体极显著水平的QTL(P≤0.01),它们是定位在SSC13上55 cM处的IMF QTL,和定位在SSC4上10 cM处的WM QTL;4个染色体显著水平的QTL(P≤0.05),它们是2个MCV2 QTL(SSC8上110 cM处和SSC13上70 cM处)、1个MMS1 QTL(SSC8上185 cM处)和1个MMS2 QTL(SSC8上185 cM处)。上述QTL解释的表型变异从0.16%(SSC8上MCV2 QTL)到17.84%(SSC8上MMS2 QTL)。 展开更多

关键词 猪 数量性状位点(QTL) 肉质性状

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基于PERT的虚拟企业风险评价模型 被引量：9

14

作者 黄敏 李凤娥 王兴伟 《东北大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期860-863,共4页

提出了一种虚拟企业风险评价的有效方法.针对虚拟企业以项目为组织模式及信息具有不确定性的特点,为考虑项目时间因素对整体风险的影响,基于计划评审法建立了虚拟企业风险评价模型.在已知风险水平与各工序作业时间的对应关系、每个工序... 提出了一种虚拟企业风险评价的有效方法.针对虚拟企业以项目为组织模式及信息具有不确定性的特点,为考虑项目时间因素对整体风险的影响,基于计划评审法建立了虚拟企业风险评价模型.在已知风险水平与各工序作业时间的对应关系、每个工序的模糊风险水平以及风险水平与项目完工时间的对应关系的基础上,通过项目不同风险水平的完工概率描述企业的整体风险状况,实例研究表明该方法为虚拟企业风险评价提供了一种有效的管理工具. 展开更多

关键词 虚拟企业 风险评价 风险管理 计划评审法 模糊风险水平

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我眼中的熊远著老师

15

作者 李凤娥 《养殖与饲料》 2020年第12期28-28,共1页

1993年我入学华中农业大学畜牧兽医学系,就听说大名鼎鼎的熊远著教授的事迹,知道他是全国人大代表,甚是仰慕。1996年底我考研究生时,在学长简运华的极力推荐下,报考熊远著老师的研究生并顺利录取。1997年初,在熊老师团队进行本科毕业实... 1993年我入学华中农业大学畜牧兽医学系,就听说大名鼎鼎的熊远著教授的事迹,知道他是全国人大代表,甚是仰慕。1996年底我考研究生时,在学长简运华的极力推荐下,报考熊远著老师的研究生并顺利录取。1997年初,在熊老师团队进行本科毕业实习,导师是蒋思文老师。2002年博士毕业留熊老师团队进行科研教学工作至今。2017年1月30日熊老师仙逝,在他身边学习工作了整整20年。2020年是熊老师诞辰90周年,谨以此文缅怀敬爱的熊老师。 展开更多

关键词 研究生 科研教学 博士毕业 熊远著 华中农业大学 老师 畜牧兽医学 团队

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猪HK2基因第17外显子多态与胴体和肉质性状的相关性研究 被引量：3

16

作者 王军 邓昌彦 +4 位作者 熊远著 左波 李凤娥 雷明刚 郑嵘 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1295-1299,共5页

采用PCR-RFLP技术,分析了HK2基因第17外显子中MspⅠ的酶切突变多态位点(A171G)在6个群体186头猪中的多态性分布及其与胴体性状和肉质性状间的相关性。研究结果表明:3个纯种猪群和3个杂交猪群中A和B等位基因频率分布情况较一致,均为B等... 采用PCR-RFLP技术,分析了HK2基因第17外显子中MspⅠ的酶切突变多态位点(A171G)在6个群体186头猪中的多态性分布及其与胴体性状和肉质性状间的相关性。研究结果表明:3个纯种猪群和3个杂交猪群中A和B等位基因频率分布情况较一致,均为B等位基因占绝对优势;在6个群体中,没有发现AA基因型个体,AB与BB基因型效应与胴体长、肋骨数和眼肌面积的相关性极显著(P<0.01),与肩部背膘厚、胸腰椎间背膘厚、三点平均背膘厚、眼肌高度、眼肌宽度、肥肉率、瘦肉率和肌内脂肪等性状的相关显著(P<0.05)。该位点是否可用作改良猪胴体、肉质性状的标记位点并在标记辅助选择中加以应用还有待进一步的研究。 展开更多

关键词 猪 己糖激酶 PCR—RFLP 胴体性状 肉质性状 关联分析

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笔花豆炭疽病菌生物学特性和流行条件研究 被引量：27

17

作者 冯淑芬 李凤娥 +1 位作者 何朝族 林坚毅 《热带作物学报》 CSCD 1994年第1期87-95,共9页

研究表明，笔花豆炭疽病主要由胶孢炭疽菌引起。病菌生长发育最适温度为２８℃，最佳湿度为１００％，最适ｐＨ值为６－７，连续光照对病菌生长有抑制作用，黑暗有助菌丝生长和孢子形成，分生孢子在葡萄糖液中生长和发芽最好。该病害主... 研究表明，笔花豆炭疽病主要由胶孢炭疽菌引起。病菌生长发育最适温度为２８℃，最佳湿度为１００％，最适ｐＨ值为６－７，连续光照对病菌生长有抑制作用，黑暗有助菌丝生长和孢子形成，分生孢子在葡萄糖液中生长和发芽最好。该病害主要在多雨地区发生流行，主要感病品种为库克笔花豆和格拉姆笔花豆。 展开更多

关键词 笔花豆 生物学特性 流行条件 炭疽病菌

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枸橼酸莫沙必利治疗帕金森综合征患者消化道功能紊乱的疗效 被引量：3

18

作者 刘洋 刘志 +1 位作者 李凤娥 孔繁利 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期125-129,共5页

目的:探讨枸橼酸莫沙必利对帕金森综合征患者下消化道功能紊乱的治疗作用,阐明其作用机制。方法:选择伴有消化道功能紊乱的帕金森综合征患者29例,其中男性19例,女性10例,平均年龄68.7岁,每日给予枸橼酸莫沙必利15mg,分3次口服,连续3个... 目的:探讨枸橼酸莫沙必利对帕金森综合征患者下消化道功能紊乱的治疗作用,阐明其作用机制。方法:选择伴有消化道功能紊乱的帕金森综合征患者29例,其中男性19例,女性10例,平均年龄68.7岁,每日给予枸橼酸莫沙必利15mg,分3次口服,连续3个月。测定患者结肠通过时间(CTT),行结直肠造影测定患者不同阶段直肠内压力和容量。结果:经枸橼酸莫沙必利治疗后,所有患者排便困难均好转。与治疗前比较,枸橼酸莫沙必利治疗后患者平均CTT缩短(P<0.05),尤其是左半部CTT缩短明显(P<0.01);与治疗前比较,枸橼酸莫沙必利治疗后,在直肠充盈的过程中,初发便意明显降低(P<0.05)。结论:枸橼酸莫沙必利作为一种新型5-HT4受体兴奋剂及5-HT3受体拮抗剂,对帕金森综合征患者具有促进结直肠蠕动及通便的作用。 展开更多

关键词 枸橼酸莫沙必利 帕金森综合征 下消化道功能紊乱

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猪CDIPT基因对肉质和胴体性状的影响 被引量：1

19

作者 符亚原 熊远著 +4 位作者 潘刚 程蕾 李凤娥 左波 雷明刚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期787-791,共5页

本研究对大白猪、长白猪和梅山猪CDIPT基因5′端G/A突变进行了多态性研究。采用PCR-TaqI-RFLP方法在3个不同猪种和"大白×梅山"F2代资源家系中进行遗传分析。结果表明,等位基因A和B在4个群体中表现平衡。对228头"大... 本研究对大白猪、长白猪和梅山猪CDIPT基因5′端G/A突变进行了多态性研究。采用PCR-TaqI-RFLP方法在3个不同猪种和"大白×梅山"F2代资源家系中进行遗传分析。结果表明,等位基因A和B在4个群体中表现平衡。对228头"大白×梅山"F2代资源家系进行了CDIPT基因多态性与肉质和胴体性状的关联分析,结果表明该位点AA基因型个体在股二头肌色值、股二头肌大理石纹评分和肌内水分含量性状上表现为显著差异(P<0.05);BB基因型在肩部背膘厚、眼肌厚度和内脂比率性状上表现为显著差异(P<0.05)。 展开更多

关键词 CDIPT基因 猪 肉质性状 胴体性状

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猪NR4A1基因的克隆、序列分析及表达模式研究 被引量：1

20

作者 刘林清 李凤娥 +1 位作者 熊远著 邓昌彦 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2016年第1期14-18,共5页

【目的】克隆猪核受体4A1(Nuclear receptor subfamily 4,group A,member 1,NR4A1)DNA序列全长,并对CDS序列及其表达模式进行分析。【方法】以未成年长大母猪的卵巢为材料,采用电子克隆技术,对猪NR4A1DNA序列进行分离和测序,并对猪NR4A... 【目的】克隆猪核受体4A1(Nuclear receptor subfamily 4,group A,member 1,NR4A1)DNA序列全长,并对CDS序列及其表达模式进行分析。【方法】以未成年长大母猪的卵巢为材料,采用电子克隆技术,对猪NR4A1DNA序列进行分离和测序,并对猪NR4A1基因序列进行生物信息学分析;利用性腺激素(人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin,HCG)和孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotropin,PMSG))处理卵巢颗粒细胞,采用RT-PCR方法分析猪NR4A1基因的表达模式。【结果】获得猪NR4A1基因4 870bp的DNA序列,其中CDS全长序列为1 734bp,共编码572个氨基酸;猪NR4A1基因编码的氨基酸序列与人的对应氨基酸序列的相似性最高(97%),其次为小鼠(94%);Expasy软件预测结果表明,NR4A1蛋白的氨基酸序列非常保守,其中包含2个锌指特征(NR C4-type),一个是激素受体超家族,另一个是Zf-C4超家族;猪卵巢颗粒细胞在性腺激素处理后,可诱导猪NR4A1基因在卵泡发育和排卵时期瞬时表达。【结论】猪NR4A1基因的CDS区在物种间保守性较强,推测猪NR4A1基因调节卵泡的发育和排卵过程。 展开更多

关键词 猪 NR4A1 序列分析 表达模式

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