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新型环氧化物水解酶AuEH1的表达及酶学性质
1
作者
李兴倩
胡蝶
+3 位作者
黄博梅
李雪婷
康雁君
邬敏辰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期1157-1162,共6页
采用RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001总RNA中扩增了一种新型环氧化物水解酶AuEH1的编码基因Aueh1。将该基因与表达质粒pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),获基因工程菌E.coli/Aueh1,IPTG诱导表...
采用RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001总RNA中扩增了一种新型环氧化物水解酶AuEH1的编码基因Aueh1。将该基因与表达质粒pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),获基因工程菌E.coli/Aueh1,IPTG诱导表达重组AuEH1(reAuEH1)。菌体经超声波破碎,收集上清作为reAuEH1酶液。分析结果表明,reAuEH1活性为8.12 U/mL;其最适温度为40℃,在40℃及以下稳定;最适pH为6.5,在pH 5~9范围内稳定;所测金属离子(除Ag^+和Cu^(2+)外)及EDTA对reAuEH1活性影响不大。在40 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 6.5)、20 mmol/L外消旋环氧苯乙烷((R,S)-SO)和0.8 U/mL reAuEH1体系(终体积6 mL)中,35℃反应50 min,所获手性产物(S)-SO的摩尔产率为30.8%、对映体过量(e.e.)值>99%。
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关键词
宇佐美曲霉
环氧化物水解酶
表达
酶学性质
对映选择性
(S)-环氧苯乙烷
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职称材料
题名
新型环氧化物水解酶AuEH1的表达及酶学性质
1
作者
李兴倩
胡蝶
黄博梅
李雪婷
康雁君
邬敏辰
机构
江南大学药学院
江南大学生物工程学院
江南大学无锡医学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第11期1157-1162,共6页
基金
国家自然科学基金项目(21676117)
文摘
采用RT-PCR技术从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001总RNA中扩增了一种新型环氧化物水解酶AuEH1的编码基因Aueh1。将该基因与表达质粒pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),获基因工程菌E.coli/Aueh1,IPTG诱导表达重组AuEH1(reAuEH1)。菌体经超声波破碎,收集上清作为reAuEH1酶液。分析结果表明,reAuEH1活性为8.12 U/mL;其最适温度为40℃,在40℃及以下稳定;最适pH为6.5,在pH 5~9范围内稳定;所测金属离子(除Ag^+和Cu^(2+)外)及EDTA对reAuEH1活性影响不大。在40 mmol/L磷酸钾缓冲液(pH 6.5)、20 mmol/L外消旋环氧苯乙烷((R,S)-SO)和0.8 U/mL reAuEH1体系(终体积6 mL)中,35℃反应50 min,所获手性产物(S)-SO的摩尔产率为30.8%、对映体过量(e.e.)值>99%。
关键词
宇佐美曲霉
环氧化物水解酶
表达
酶学性质
对映选择性
(S)-环氧苯乙烷
Keywords
Aspergillus usamii
epoxide hydrolase
expression
enzymatic properties
enantioselectivity
(S)-styrene oxide
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
新型环氧化物水解酶AuEH1的表达及酶学性质
李兴倩
胡蝶
黄博梅
李雪婷
康雁君
邬敏辰
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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