动物病毒疫苗研制及其产品的电镜检测 被引量：2

1

作者 李六金 李秦 +3 位作者 姜焕宏 李成 王新建 李宏 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期215-218,共4页

应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞 ,并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化... 应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞 ,并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化、培育及筛选的目的毒。结果发现了部分培养细胞有支原体污染 ,有的还有细菌污染 ;同时在某些培养的原毒、基础种毒、生产种毒及其产品中也发现了一些病毒的污染和联苗中互相感染现象。如此证明了电镜技术能够及时发现问题 ,及时解决问题 ,使之科研少走弯路 。 展开更多

关键词 电镜技术 生物样品 细胞培养物 污染物 电子显微镜 疫苗研制 动物病毒 电镜检测

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规模化制备驴抗犬细小病毒免疫球蛋白(CPV-Ig)最佳《免疫程序》的试验报告 被引量：2

2

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《中国动物检疫》 CAS 2003年第5期26-28,共3页

关键词 犬 细小病毒 免疫球蛋白 CPV-Ig 《免疫程序》 试验 制备技术

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猫泛白细胞减少症弱毒冻干疫苗研制与探索最佳冻干曲线的研究 被引量：2

3

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 陈慧茹 李成 押宗保 李文义 《中国动物检疫》 CAS 2002年第7期23-25,共3页

生物制品进行冷冻干燥过程中 ,或多或少会损失一定的效价 ,可直接影响产品效力和免疫原性。本文为研制出高效价和保持期长的猪泛白细脆减少症弱毒冻干疫苗 ,为降低效价损失 ,选择出最佳冷冻干燥曲线 ,使冻干后的产品效价损失减少到最低... 生物制品进行冷冻干燥过程中 ,或多或少会损失一定的效价 ,可直接影响产品效力和免疫原性。本文为研制出高效价和保持期长的猪泛白细脆减少症弱毒冻干疫苗 ,为降低效价损失 ,选择出最佳冷冻干燥曲线 ,使冻干后的产品效价损失减少到最低水平。试验结果选用全程为17h的冻干曲线是科学的。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症 冻干疫苗 冻干曲线 细胞培养 病毒增殖 弱毒疫苗 成品检测

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抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白(Ig)的精制试验与检测结果 被引量：13

4

作者 李六金 贾满民 +1 位作者 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2002年第1期12-15,共4页

随着国民经济的发展 ,我国养犬业也得到了大力发展 ,但犬细小病毒性肠炎 (血痢 )是犬群中最常见的传染病之一 ,其发病率和死亡率高达 5 0 %～ 10 0 % ,严重影响军犬、警犬、珍稀犬、名贵犬及家犬和肉犬的生命安全。目前仅采用疫苗预防该... 随着国民经济的发展 ,我国养犬业也得到了大力发展 ,但犬细小病毒性肠炎 (血痢 )是犬群中最常见的传染病之一 ,其发病率和死亡率高达 5 0 %～ 10 0 % ,严重影响军犬、警犬、珍稀犬、名贵犬及家犬和肉犬的生命安全。目前仅采用疫苗预防该病 ,但因诸多原因 ,免疫接种失败时有发生 ,病犬仍然受到生命安全威胁。选用陕西关中富有的特产大型毛驴作为免疫动物 ,研制用于预防和治疗犬细小病毒性肠炎的有效药物 抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白 (Ig)生物制剂获得成功。按照农业部有关规定和要求 ,经在全国 31个省、市、区试用后 ,治疗病犬 10万余只 ,应急预防 5万余只 ,治愈率高达 92 %。 展开更多

关键词 犬 细小病毒性肠炎 抗细小病毒性肠炎免疫球蛋白 CPV-XN1株抗原 检测技术

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免疫金电镜技术检测犬细小病毒免疫球蛋白 被引量：5

5

作者 李六金 姜焕宏 +2 位作者 李成 李秦 赵世君 《中国动物检疫》 CAS 2000年第8期27-28,共2页

本文应用免疫金电镜技术检测犬细小病毒免疫球蛋白（Ｉｇ）。检测结果证明驴抗犬细小病毒所产生的Ｉｇ对犬细小病毒具有较强的特异性反应。因此认为，第四军医大学动物保健品研制中心所制备的免疫球蛋白对犬细小病毒性肠炎和心肌炎具有... 本文应用免疫金电镜技术检测犬细小病毒免疫球蛋白（Ｉｇ）。检测结果证明驴抗犬细小病毒所产生的Ｉｇ对犬细小病毒具有较强的特异性反应。因此认为，第四军医大学动物保健品研制中心所制备的免疫球蛋白对犬细小病毒性肠炎和心肌炎具有良好的治疗和预防作用。 展开更多

关键词 免疫金电镜技术 免疫球蛋白 犬细小病毒

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抗犬细小病毒免疫球蛋白临床应用研究 被引量：5

6

作者 李六金 屈红丽 +4 位作者 姜焕宏 李成 吴钟灵 陈惠茹 李宏 《中国兽药杂志》 2003年第3期46-47,32,共3页

　用犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白注射液对382例临床诊断为犬细小病毒性肠炎病犬进行了治疗,结果治愈344只,治愈率为90.05%;早期治疗效果更好,小于3个月的幼犬治愈率为93.88%。对临床病例进行分析,进一步证明该产品对犬细小病毒病的治疗... 　用犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白注射液对382例临床诊断为犬细小病毒性肠炎病犬进行了治疗,结果治愈344只,治愈率为90.05%;早期治疗效果更好,小于3个月的幼犬治愈率为93.88%。对临床病例进行分析,进一步证明该产品对犬细小病毒病的治疗是有效的。 展开更多

关键词 犬细小病毒 免疫球蛋白 临床应用 治疗

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应用电镜技术和血凝试验检测犬细小病毒和犬腺病毒 被引量：4

7

作者 李六金 押宗保 +6 位作者 李成 姜焕宏 陈慧茹 刘建荣 马伟辉 王新建 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第7期33-35,共3页

电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污... 电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污染情况,这对于动物病毒疫苗种毒质量的检测是十分重要的。 展开更多

关键词 电镜技术 血凝试验 检测 犬细小病毒 犬腺病毒

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猕猴腹泻症“轮状病毒病”油剂灭活疫苗研制与免疫效果观察报告 被引量：1

8

作者 李六金 贾满民 +4 位作者 陈慧茹 押宗保 李成 赵永康 李宝山 《中国动物检疫》 CAS 2002年第9期23-25,共3页

供第四军医大学科研、教学、医疗用的实验用猕猴群中 ,分别有3只猕猴患腹泻 (带有红、白粪便 ) ,经治疗和抢救无效死亡。剖检发现肠粘膜呈浆液性脱落 ,肠壁散在性出血点。电镜负染与真染切片观察确诊为典型轮状病毒粒子时 ,拟作为制苗抗... 供第四军医大学科研、教学、医疗用的实验用猕猴群中 ,分别有3只猕猴患腹泻 (带有红、白粪便 ) ,经治疗和抢救无效死亡。剖检发现肠粘膜呈浆液性脱落 ,肠壁散在性出血点。电镜负染与真染切片观察确诊为典型轮状病毒粒子时 ,拟作为制苗抗原 ,试制猕猴“轮状病毒病”油佐剂灭活疫苗 。 展开更多

关键词 猕猴 腹泻症 “轮状病毒病” 油剂灭活疫 研制 免疫效果

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电镜技术检验犬四联弱毒苗种子毒及成品的外源病毒 被引量：1

9

作者 李六金 李秦 +6 位作者 张海 张志培 李学忠 胡淑贤 李成 姜焕宏 赵世君 《中国动物检疫》 CAS 2001年第2期24-26,共3页

我们用电子显微镜（电镜）技术，检验犬四联弱毒疫苗种子毒及其成品疫苗中的外源毒。经对每批种子毒细胞培养物及间隔一定批次成品疫苗抽样检查，其中在一批种子毒细胞培养物中发现了呼肠病毒污染，得到及时有效的处理。同时证明应用电... 我们用电子显微镜（电镜）技术，检验犬四联弱毒疫苗种子毒及其成品疫苗中的外源毒。经对每批种子毒细胞培养物及间隔一定批次成品疫苗抽样检查，其中在一批种子毒细胞培养物中发现了呼肠病毒污染，得到及时有效的处理。同时证明应用电镜技术检验外源病毒确是一种快速而有效的方法。 展开更多

关键词 病毒形态学 外源病毒 犬四联弱毒活疫苗 种子毒 电子显微镜技术 检验方法

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驴抗犬细小病毒IgG的研制 被引量：1

10

作者 李六金 姜焕宏 +4 位作者 押宗保 李成 吴钟灵 陈惠茹 李宏 《中国动物检疫》 CAS 2002年第8期23-24,共2页

用关中驴制备抗犬细小病毒 (CPV)免疫球蛋白 ,预防和治疗犬CPV感染。制备CPV抗原复合物 ,通过免疫驴 ,用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体 (IgG) ,经过物理化学检定、血清学、免疫金电镜技术、动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG ,... 用关中驴制备抗犬细小病毒 (CPV)免疫球蛋白 ,预防和治疗犬CPV感染。制备CPV抗原复合物 ,通过免疫驴 ,用纯化方法从驴血清中提取特异性抗体 (IgG) ,经过物理化学检定、血清学、免疫金电镜技术、动物效力实验。免疫驴均可产生特异IgG ,免疫金电镜可观察到抗原抗体免疫复合物 ;血凝抑制试验 (HI)≥1∶512(IgG浓缩浓度为60mg/mL) ;可保护犬免受CPV攻击 ;室温保存半年 ,4℃两年效价不变。已成功地应用CPV免疫驴制备出高效价特异性抗CPV -IgG。 展开更多

关键词 动物血凝效价 驴 犬细小病毒 IGG

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四种动物传代细胞染色体遗传变异率分析 被引量：1

11

作者 李六金 李秦 +5 位作者 施新猷 张海 赵世君 师长宏 金昌德 胡春雷 《动物医学进展》 CSCD 2000年第2期63-65,共3页

本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二... 本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二倍体细胞系 ,染色体众数为 30 ;Vero是超二倍体细胞系 ,染色体众数为 73～ 75 ;MDCK属于亚四倍体细胞系 ,染色体众数为 12 5～135。BHK2 1为亚二倍体或亚四倍体细胞系 ,亚二倍体众数为 42 ,亚四倍体细胞众数为 72～ 74。四种细胞系的染色体畸变率为 0 %～6 %,均较低。结论是四种传代细胞遗传学特性相对稳定 ,各代次之间无本质差异 。 展开更多

关键词 传代细胞 染色体 变异率 疫苗 核型分析

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应用电镜技术快速检测传代细胞中的污染因子——传代细胞污染细菌的快速检测 被引量：1

12

作者 李六金 姜焕宏 +4 位作者 李成 吴钟灵 胡淑贤 张海 刘建荣 《中国兽药杂志》 2001年第3期10-12,共3页

应用电镜技术检测传代细胞中的细菌污染 ,即快速又准确。根据细菌的形态及其鞭毛、噬菌体等指标的其中一项均可以判定细菌的污染 。

关键词 细菌污染 传代细胞 电镜技术 快速检测

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应用电镜技术快速检测培养细胞中的支原体污染 被引量：1

13

作者 李六金 姜焕宏 +3 位作者 李成 刘建荣 马伟辉 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第6期31-33,共3页

应用电镜技术可快速准确地检测培养细胞中的支原体污染。通过高速离心浓缩样品,负染色后电镜观察,可在30min内做出判定,方法快速、简便、准确。

关键词 电镜技术 快速检测 培养细胞 支原体污染

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抗猫泛白细胞减少症免疫球蛋白的制备工艺研究及质量监控 被引量：1

14

作者 李六金 贾满民 +4 位作者 李成 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《动物科学与动物医学》 2002年第6期29-31,共3页

猫泛白细胞减少症病毒 (Feline pauleukopinia virus,FPV)同义名为猫细小病毒 ,猫传染性肠炎病毒 ,猫瘟病毒 [1 ]。以下简称“猫瘟病毒”。该病是猫的一种急性 /致死性白细胞减少。我国许多省市区均有发生本病流行的的报道。 1985年南... 猫泛白细胞减少症病毒 (Feline pauleukopinia virus,FPV)同义名为猫细小病毒 ,猫传染性肠炎病毒 ,猫瘟病毒 [1 ]。以下简称“猫瘟病毒”。该病是猫的一种急性 /致死性白细胞减少。我国许多省市区均有发生本病流行的的报道。 1985年南京农业大学兽医系从病体内分离病毒成功 [3]。在自然条件下 ,猫瘟病毒除感染猫外 ,还侵害虎、豹、狮、熊猫、鼬等动物 ,发病和死亡率较高 [1、6 ]。在疫苗接种方面 ,对本病能产生一定效果 ,但由于诸多原因 ,该病发生和流行仍呈上升势头 ,迄今国内外尚未见到较理想的有效治疗药物。有鉴于此 ,我们因地制宜 ,选用陕西关中富有的特产大型毛驴作为免疫动物 [5] ,研制出用于预防和治疗猫瘟病毒性肠炎的有效药物—抗猫瘟免疫球蛋白 (Ig G)生物制剂 ,经过五年反复试验 。 展开更多

关键词 抗猫泛白细胞 减少症 免疫球蛋白 制备工艺 质量监控 家畜免疫 猫细小病毒弱株 免疫关中毛驴 分离血浆提纯

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关中驴抗猪瘟病毒IgG制备工艺及质量监控研究

15

作者 李六金 朱德生 +4 位作者 贾满民 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期100-102,114,共4页

本实验用配有佐剂的猪瘟病毒抗原,按特定基础免疫与强化免疫程序接种关中毛驴,用两次盐析法沉淀提取抗猪瘟病毒IgG,其中对提纯制备工艺所涉及的pH值、温度、硫酸铵浓度等工艺进行探索比较,继之对单位体积内的蛋白浓度、酶标抗体效价和... 本实验用配有佐剂的猪瘟病毒抗原,按特定基础免疫与强化免疫程序接种关中毛驴,用两次盐析法沉淀提取抗猪瘟病毒IgG,其中对提纯制备工艺所涉及的pH值、温度、硫酸铵浓度等工艺进行探索比较,继之对单位体积内的蛋白浓度、酶标抗体效价和稀释度进行了标化,同时对质量监控进行了平行性分析。本实验以陕西关中毛驴作为免疫反应供浆动物;研制用于预防和治疗猪瘟的抗病毒免疫球蛋白(IgG)生物制剂获得理想结果。经6省、市、区试用后,深受用户和兽医防疫部门的一致好评和欢迎。 展开更多

关键词 制备工艺 猪瘟 抗猪瘟病毒免疫球蛋白 关中驴 质量监控

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关中驴对6株动物病毒抗原的免疫应答试验

16

作者 李六金 朱德生 +4 位作者 贾满民 陈慧茹 吴耀南 赵永康 押宗保 《动物医学进展》 CSCD 2003年第3期104-108,共5页

以关中驴为试验动物 ,用猪瘟病毒(HCV )、犬细小病毒 (CPV )、兔瘟病毒(RHDV)、鸡新城疫病毒 (NDV)、伪狂犬病毒(PRV)等病毒进行免疫 ,检测所产生的抗体效价 ,并与猪、鸡、兔、犬、及猫等动物进行比较。试验结果表明 ,关中驴与对照动物... 以关中驴为试验动物 ,用猪瘟病毒(HCV )、犬细小病毒 (CPV )、兔瘟病毒(RHDV)、鸡新城疫病毒 (NDV)、伪狂犬病毒(PRV)等病毒进行免疫 ,检测所产生的抗体效价 ,并与猪、鸡、兔、犬、及猫等动物进行比较。试验结果表明 ,关中驴与对照动物产生的抗体效价一致 。 展开更多

关键词 关中驴 动物 病毒抗原 免疫应答 试验

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应用电镜技术对犬腺病毒及其免疫球蛋白的检测

17

作者 李六金 姜焕宏 +1 位作者 李成 李秦 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第3期4-7,共4页

应用电镜技术及免疫金电镜技术检测犬腺病毒及驴抗犬腺病毒免疫球蛋白 ( Ig)。实验结果证明了由驴所产生的 Ig对犬腺病毒具有较强的特异性反应 ,对犬肝炎。

关键词 电镜技术 免疫球蛋白 犬 腺病毒

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应用电镜技术对狂犬病毒ERA株污染鼠痘病毒的检出

18

作者 李六金 姜焕宏 +5 位作者 李成 吴钟灵 胡淑贤 师长宏 张海 刘建荣 《中国兽药杂志》 2001年第5期11-13,共3页

狂犬病毒 ERA株在 BHK2 1细胞上增殖并用电镜技术跟踪观察。结果发现除了有少量的目的毒外 ,还混有大量的痘病毒 ,经鼠痘酶标抗体检测试剂盒检测为鼠痘病毒。该病毒很可能是来自做复壮狂犬病毒 ERA株毒力试验的小白鼠。

关键词 鼠痘病毒 狂犬病毒 传代细胞 电镜技术 ERA

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不同免疫佐剂影响关中驴对犬细小病毒抗原免疫应答的比较

19

作者 李六金 朱德生 +2 位作者 贾满民 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2003年第2期50-52,共3页

为研制高效价、保质期长的驴抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白生物制剂 ,本试验用病毒中和检测方法对三种不同类型佐剂进行筛选。结果表明 ,双相油乳剂配制的抗原免疫驴体所产生的血清抗体滴度最高 ,持续时间长 。

关键词 犬细小病毒抗原 佐剂 驴 质量检测

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GMP车间净化系统的设计与检测

20

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 候瑞昌 李秦 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2002年第8期11-13,共3页

本中心对按国家标准改进建成的小动物生物制品GMP净化车间(立体三层全净化)各部分的风速和洁净度(微生物数和尘埃粒子数)进行了检测,其结果均达标,可正式交付使用。

关键词 GMP 车间净化系统 设计 动物 生物制品 立体三层净化系统

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