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高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用
被引量:
1
1
作者
张文
刘照贞
+1 位作者
李俊硕
商营利
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期72-79,共8页
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用。为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行...
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用。为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行了原核表达,获得了可溶性重组蛋白。将纯化后的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清,并进一步以辛酸-硫酸铵沉淀法提纯IgG。ELISA检测显示所制备抗体效价可达到1∶10^7,表明抗体具有较高效价。应用该抗体对人工感染PCV2b的PK-15细胞、小鼠组织进行了免疫印迹、间接免疫荧光和免疫组织化学检测,结果表明该抗体在多种检测方法中均能与目的抗原发生特异性结合。该研究制备的高效价抗体为PCV2b的临床检测及科学研究提供了候选工具。
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关键词
猪圆环病毒Ⅱ型
衣壳蛋白
原核表达
多克隆抗体
病毒检测
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职称材料
题名
高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用
被引量:
1
1
作者
张文
刘照贞
李俊硕
商营利
机构
山东农业大学动物科技学院山东省动物生物工程与疫病防治重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第7期72-79,共8页
基金
山东省重点研发计划项目(2019GNC106097)
山东省“双一流”学科建设经费资助。
文摘
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)衣壳蛋白(Capsid protein,Cap)是病毒主要的抗原蛋白,在病毒感染和宿主免疫应答中起重要作用。为了制备抗PCV2b Cap蛋白的高效价多克隆抗体,利用大肠杆菌表达系统对不含核定位信号肽的PCV2b Cap进行了原核表达,获得了可溶性重组蛋白。将纯化后的重组蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清,并进一步以辛酸-硫酸铵沉淀法提纯IgG。ELISA检测显示所制备抗体效价可达到1∶10^7,表明抗体具有较高效价。应用该抗体对人工感染PCV2b的PK-15细胞、小鼠组织进行了免疫印迹、间接免疫荧光和免疫组织化学检测,结果表明该抗体在多种检测方法中均能与目的抗原发生特异性结合。该研究制备的高效价抗体为PCV2b的临床检测及科学研究提供了候选工具。
关键词
猪圆环病毒Ⅱ型
衣壳蛋白
原核表达
多克隆抗体
病毒检测
Keywords
porcine circovirus type 2
capsid protein
prokaryotic expression
polyclonal antibody
virus detection
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效价猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白多克隆抗体的制备及应用
张文
刘照贞
李俊硕
商营利
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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