表皮生长因子受体在肺部疾病中的作用研究进展 被引量：1

1

作者 王雨晴 肖英琪 +1 位作者 罗晶 李伯安 《生理科学进展》 北大核心 2025年第1期46-53,共8页

表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种受体酪氨酸激酶,属于表皮生长因子受体家族成员之一。EGFR广泛分布于人体的各种组织和器官中,包括皮肤、肺、肝、肾等,它通过激活JAK/STAT、MAPK/ERK以及PI3K/AKT等关键... 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种受体酪氨酸激酶,属于表皮生长因子受体家族成员之一。EGFR广泛分布于人体的各种组织和器官中,包括皮肤、肺、肝、肾等,它通过激活JAK/STAT、MAPK/ERK以及PI3K/AKT等关键信号通路调控细胞内环境稳态。此外,EGFR可以被生长因子、G蛋白偶联受体等发出的信号激活,参与体内免疫和炎症反应等过程,进而调控多种疾病的病理进程。近年来研究表明EGFR与肺癌、慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘以及肺炎等大部分肺部疾病相关,因此,本文就EGFR在肺部疾病中的作用研究进展做一综述。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 肺部疾病 受体酪氨酸激酶 反式激活

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严重急性呼吸综合征患者肺组织包被抗原的特异性研究 被引量：4

2

作者 李伯安 郑宇 +6 位作者 陈昊 何卫平 赵军 舒翠莉 李靖 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期599-601,共3页

目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。 方法 :匀浆SARS患者尸检肺组织、非 SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA) ,同时检测SARS... 目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)肺组织包被抗原在不同个体以及猪、羊、大鼠中的种属特异性。 方法 :匀浆SARS患者尸检肺组织、非 SARS患者肺组织以及猪、羊、大鼠肺组织后分别包被 ,利用酶联免疫吸附试验 (EL ISA) ,同时检测SARS患者及正常献血员血清中的 Ig G。 结果 :SARS患者及正常献血员血清用 SARS尸检患者与非 SARS患者肺组织包被抗原检测 ,两种组织包被抗原检测的阳性率间无统计学差异 ;而用非 SARS患者肺组织包被抗原检测的阳性率和用羊、猪、大鼠肺组织包被抗原检测的阳性率均具有统计学差异。 结论 :SARS患者肺组织及非 SARS患者肺组织中存在相同的抗原 ;其他动物中可能也存在该抗原 。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 肺组织包被抗原 抗原特异性 酶联免疫吸附试验 非典型肺炎 诊断

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HBeAg与CD81分子结合的研究 被引量：4

3

作者 李伯安 刘岩 +4 位作者 李靖 舒翠莉 何卫平 侯俊 程云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期686-688,共3页

目的 :研究HBeAg与CD81分子在细胞内、外的相互作用。方法 :应用RT PCR技术 ,从HepG2细胞中扩增CD81全基因 ,并构建重组真核表达载体。将其与pGBKT7 eAg共转染营养缺陷型酵母细胞 ,观察生长情况。应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉... 目的 :研究HBeAg与CD81分子在细胞内、外的相互作用。方法 :应用RT PCR技术 ,从HepG2细胞中扩增CD81全基因 ,并构建重组真核表达载体。将其与pGBKT7 eAg共转染营养缺陷型酵母细胞 ,观察生长情况。应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉淀试验 ,进一步验证CD81分子与HBeAg的结合。结果 :经EcoRI和BamHI酶切和DNA序列测定鉴定表明 ,构建的CD81基因的重组表达载体正确。共转染后的酵母细胞在营养缺陷的培养基中生长良好。体外免疫共沉淀试验证实 ,CD81与HBeAg出现沉淀带。结论 :HBeAg与CD81分子在细胞内、外均可结合 。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒E抗原 CD81 酵母细胞 免疫共沉淀

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民事诉讼当事人真实义务法律化研究 被引量：7

4

作者 李伯安 《暨南学报（哲学社会科学版）》 CSSCI 北大核心 2011年第4期42-47,共6页

民事诉讼法是否应当嵌入当事人真实义务制度,在理论上并没有达成共识,反对者的理由表现在三个方面:一是与辩论原则相抵触;二是不具有可行性;三是降低了诉讼效率。反对者的理由均不存在,与辩论原则的抵触可以通过修正辩论原则而消除,在... 民事诉讼法是否应当嵌入当事人真实义务制度,在理论上并没有达成共识,反对者的理由表现在三个方面:一是与辩论原则相抵触;二是不具有可行性;三是降低了诉讼效率。反对者的理由均不存在,与辩论原则的抵触可以通过修正辩论原则而消除,在诉讼中确立真实义务不仅具有可行性,而且可以提高诉讼效率。法律化后的真实义务必须实定化。为了保障真实义务实定化,必须对违反真实义务的行为进行相应的法律制裁,明确费用制裁的启动与限度,并将其扩及诉讼代理人。 展开更多

关键词 真实义务 诉讼促进义务 虚言罚

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证明妨碍制裁的正当性与制度建构 被引量：3

5

作者 李伯安 《华南师范大学学报（社会科学版）》 CSSCI 北大核心 2011年第1期137-140,160,共4页

证明妨碍是民事诉讼中违背诚实信用原则的行为。为防止其害,许多国家对其加以规范,在民事诉讼法中规定证明妨碍制度。我国民事诉讼法有关证明妨碍制度的规定甚为粗浅,无法满足现实需要。诉讼之实质公正要求、证明妨碍当事人的证据保全... 证明妨碍是民事诉讼中违背诚实信用原则的行为。为防止其害,许多国家对其加以规范,在民事诉讼法中规定证明妨碍制度。我国民事诉讼法有关证明妨碍制度的规定甚为粗浅,无法满足现实需要。诉讼之实质公正要求、证明妨碍当事人的证据保全义务、维护诉讼程序的应然需要是证明妨碍制度之正当性基础,完善我国证明妨碍制度则应在确立证明妨碍制度的目标体系和确立证据提出义务的基础上,按照公正原则分层设立制裁措施,并设立妨碍人亡救济措施。 展开更多

关键词 证明妨碍 证明困难 制裁 救济

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不明原因呼吸道感染疫情病原学分析 被引量：27

6

作者 徐军 郭静霞 +9 位作者 李浩 刘爱霞 马洪滨 杨丽华 崔恩博 陈素明 赵鹏 赵敏 李伯安 毛远丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期252-255,共4页

目的对某部营区内的群发上呼吸道感染进行病因学研究,以明确诊断,控制并预防疫情扩散。方法采集32例住院患者的血清和咽拭子标本,其中4例有急性期及恢复期双份血清。血清标本采用欧蒙间接免疫荧光法(IFA)和ELISA法进行20种呼吸道相关病... 目的对某部营区内的群发上呼吸道感染进行病因学研究,以明确诊断,控制并预防疫情扩散。方法采集32例住院患者的血清和咽拭子标本,其中4例有急性期及恢复期双份血清。血清标本采用欧蒙间接免疫荧光法(IFA)和ELISA法进行20种呼吸道相关病原IgM抗体筛查,双份血清进行滴度比较;咽拭子标本进行病毒分离培养和细菌培养。依据血清学结果对咽拭子进行相关病原DNA的提取、扩增及测序分析。结果血清ELISA检测结果显示32例患者中腺病毒IgM阳性12例,肺炎衣原体IgM阳性15例。IFA检测结果显示肺炎衣原体IgM阳性17例,肺炎支原体、流感A病毒、副流感病毒IgM阳性各1例。4例双份血清中肺炎衣原体和腺病毒IgM各有2例滴度呈4倍变化。细菌培养及病毒分离培养均阴性。1例高热患者咽拭子标本3对腺病毒相关引物PCR呈阳性,测序显示为腺病毒11型。采用大环内酯类抗生素进行治疗,大部分病例有效。结论结合临床特征及病原学分析结果,判断此次疫情的原因主要为腺病毒及肺炎衣原体的合并或交替感染。 展开更多

关键词 腺病毒科 呼吸道感染 疾病暴发流行 衣原体 肺炎

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HBsAg和抗HBs双阳性患者S基因新增N-糖基化突变的意义 被引量：12

7

作者 卢姗姗 李晓东 +6 位作者 罗声栋 乔艳 许智慧 刘妍 李伯安 徐东平 李进 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期351-357,共7页

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)HBsAg+抗HBs双阳性患者S基因主要亲水区(MHR)新增N-糖基化突变的特点,探讨HBsAg+抗HBs双阳性的发生机制和临床意义。方法对284例HBsAg+抗HBs双阳性和314例HBsAg单阳性的慢性HBV感染者S基因进行测序分析。对1... 目的分析乙型肝炎病毒(HBV)HBsAg+抗HBs双阳性患者S基因主要亲水区(MHR)新增N-糖基化突变的特点,探讨HBsAg+抗HBs双阳性的发生机制和临床意义。方法对284例HBsAg+抗HBs双阳性和314例HBsAg单阳性的慢性HBV感染者S基因进行测序分析。对1例携有MHR区双N-糖基化新型突变株的慢性乙肝患者样本进行随访收集和研究。构建双N-糖基化突变和对照前S/S基因重组质粒,转染HepG2细胞,分析突变对病毒复制力和抗原性的影响。结果 HBsAg+抗HBs双阳性患者MHR区新增N-糖基化突变的检出率为11.3%(32/284),显著高于HBsAg单阳性患者的2.9%(9/314)(P<0.01)。HBsAg+抗HBs双阳性组中,72例肝细胞癌(HCC)在N-糖基化突变阳性和阴性患者中所占比例分别为46.9%(15/32)和22.6%(57/252)(P<0.01)。从1例患者中检出的新型株突变形式为s116-118TST→NST+s131-133TSM→NST,并联合sP120缺失+G145D突变,在3份随访样本中该突变株分别占98.0%、2.0%和2.5%,第2份样本中检出s130-132GTS→NSS单N-糖基化突变株,占17.6%,但无s P120缺失+G145D联合突变。与野生株相比,新型突变株复制力提高31%,但HBsAg定量降低99%。免疫荧光结果显示,双N-糖基化定点回复突变株可部分恢复HBsAg检出水平,提示除双N-糖基化突变外,sP120缺失+G145D联合突变对HBsAg抗原性减弱也有明显影响。结论 HBV S基因MHR区新增N-糖基化突变与HBsAg+抗HBs双阳性相关,两者同时出现可能是HCC发生的高风险因素;S基因MHR区新增双N-糖基化+sP120缺失+sG145D联合突变共同影响HBsAg的抗原性。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 S基因 突变 N-糖基化 抗原性

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严重急性呼吸综合征患者血清中存在抗肺组织抗体 被引量：8

8

作者 郑宇 李伯安 +7 位作者 何卫平 陈昊 赵军 李靖 貌盼勇 毛远丽 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期595-598,共4页

目的 :建立特异性的检测严重急性呼吸综合征 (SARS)相关抗体的血清学方法。 方法 :制备 SARS患者肺组织包被抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 SARS患者血清中特异性抗体。 结果 :SARS患者血清中存在 SARS相关的抗人肺组织抗体 ... 目的 :建立特异性的检测严重急性呼吸综合征 (SARS)相关抗体的血清学方法。 方法 :制备 SARS患者肺组织包被抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (EL ISA)检测 SARS患者血清中特异性抗体。 结果 :SARS患者血清中存在 SARS相关的抗人肺组织抗体 ,其阳性率达 92 .86 %(2 6 / 2 8) ,正常献血员为 11.4 3%(12 / 10 5 ) ,统计学分析表明 ,SARS相关抗体的检出率在患者和献血员之间存在明显差异。 结论 :SARS患者血清中存在抗肺组织抗体 ,该抗体的存在提示机体免疫反应可能参与了疾病病理损伤过程 ;检测该抗体可能有助于 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 非典型肺炎 抗肺组织抗体 酶联免疫吸附试验 检测 血清学方法

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HCV高变区1串联模拟表位基因免疫研究 被引量：8

9

作者 赵军 李靖 +6 位作者 陈昊 舒翠莉 高蓉 李伯安 何卫平 迟淑萍 程云 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第24期2254-2257,共4页

目的　研究丙型肝炎病毒 (HCV)高变区 1(HVR1)串联模拟表位基因免疫在BALB c小鼠体内引起抗体产生的特点。方法　针对中国人群HCVHVR1位中 6个较保守的AA位点设计并合成多肽表位 ,从中筛选活性最好的肽 1、5、6、7构建含 4条多肽编码基... 目的　研究丙型肝炎病毒 (HCV)高变区 1(HVR1)串联模拟表位基因免疫在BALB c小鼠体内引起抗体产生的特点。方法　针对中国人群HCVHVR1位中 6个较保守的AA位点设计并合成多肽表位 ,从中筛选活性最好的肽 1、5、6、7构建含 4条多肽编码基因的表达载体。将HCVHVR1串联模拟表位表达载体对小鼠股四头肌直接免疫 ,采用ELISA法检测小鼠血清内抗体的产生 ,并将免疫血清与一系列基于本室对HVR1氨基酸序列的分析结果合成的多肽进行反应 ,分析免疫血清对这些多肽的交叉反应性。结果　免疫血清同编码的各合成肽都有较好的反应性 ,其中对肽 1反应最好。免疫血清同合成的 4条HVR1全序列多肽及其他非编码HVR1多肽有较好的反应性。结论　基因免疫能够在小鼠体内引起表位特异性抗体的产生。此串联表位设计引起的体液免疫反应对HCVHVR1合成肽有较好的交叉免疫反应。 展开更多

关键词 丙型肝炎病毒高变区1 模拟表位 基因免疫 交叉反应

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严重急性呼吸综合征相关抗体与激素应用的相关性及其临床意义 被引量：4

10

作者 何卫平 郑宇 +5 位作者 赵军 陈昊 李伯安 李靖 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期605-607,共3页

目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)患者体内 SARS相关抗体出现时间、抗体滴度与激素应用的相互关系及其可能的临床意义。 方法 :采集 2 2例 SARS患者 (临床诊断 )不同发病期及 3例 SARS密切接触者血清 ,采用酶联免疫吸附试验(EL ISA... 目的 :探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)患者体内 SARS相关抗体出现时间、抗体滴度与激素应用的相互关系及其可能的临床意义。 方法 :采集 2 2例 SARS患者 (临床诊断 )不同发病期及 3例 SARS密切接触者血清 ,采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测其中的 SARS相关抗体 ,并对使用激素治疗的 17例 SARS患者进行追踪检测。 结果 :多数 SARS患者在发病后1～ 3d肺部未出现炎性病变征象前即可检测到 SARS相关抗体 ;3例密切接触者 SARS相关抗体也为阳性。 17例患者使用激素后 SARS相关抗体滴度均有所下降 ,其中 11例患者激素减至小剂量或停用后 ,有 10例患者 SARS相关抗体滴度较前上升 ,1例继续下降。 结论 :SARS相关抗体滴度与激素应用具有相关性 ,该抗体与 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 相关抗体 激素 应用 相互关系 临床意义 传染性非典型肺炎 诊断 ELISA

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肠道病毒71型血清学检测方法的建立及应用 被引量：8

11

作者 马洪滨 侯俊 +7 位作者 李鲁平 杨静 郭静霞 刘爱霞 徐军 聂为民 李伯安 毛远丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期239-240,共2页

目的在原核表达系统中对肠道病毒71型(EV71)基因进行克隆、表达、纯化,建立血清IgM抗体的检测方法,用于EV71感染的早期诊断。方法检索EV71 VP1基因序列,设计合成引物,并在引物两端插入酶切位点,采用RT-PCR分离EV71 VP1全基因序列。PCR... 目的在原核表达系统中对肠道病毒71型(EV71)基因进行克隆、表达、纯化,建立血清IgM抗体的检测方法,用于EV71感染的早期诊断。方法检索EV71 VP1基因序列,设计合成引物,并在引物两端插入酶切位点,采用RT-PCR分离EV71 VP1全基因序列。PCR产物回收、纯化,插入T载体进行序列同源性测定。再插入表达质粒载体pRSET,构建pRSET-EV71重组质粒。利用纯化后的表达产物,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测EV71IgM抗体。共收集31例临床诊断为手足口病患儿及36例健康儿童的血清标本进行检测。结果PCR产物片段大小约890bp,与预期VP1全基因序列长度一致,并且克隆入T载体后序列测定与GenBank公布序列的同源性达100%;重组蛋白大小约为890bp,与预期蛋白片段一致。ELISA检测结果显示,在手足口病患儿中IgM抗体阳性7例,健康儿童中则未发现阳性,差异有统计学意义。结论成功建立了针对EV71IgM抗体的检测方法。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 基因 VP1 酶联免疫吸附测定

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严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究 被引量：3

12

作者 赵军 陈昊 +5 位作者 郑宇 李伯安 何卫平 李靖 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期602-604,共3页

目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS相关抗体的抗原特异性。 方法 :采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测血清中 Ig G抗体 ,并采用抗原抗体的预孵育 ,吸附血清中抗原特异性抗体 ,检测其抗原特异性。 结果 :SARS患者血清与... 目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS相关抗体的抗原特异性。 方法 :采用酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测血清中 Ig G抗体 ,并采用抗原抗体的预孵育 ,吸附血清中抗原特异性抗体 ,检测其抗原特异性。 结果 :SARS患者血清与 SARS患者肺组织以及非 SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非 SARS患者肺组织孵育后 ,其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收 ,吸收率为 10 0 %。 结论 :本组 SARS患者血清中存在抗肺组织抗体 ,其对 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 血清 SARS相关抗体 抗原特异性 ELISA 非典型肺炎

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SARS患者血清中SARS相关冠状病毒抗体产生规律的初步分析 被引量：3

13

作者 李靖 陈昊 +7 位作者 李伯安 柯屾 赵军 郑宇 何卫平 舒翠莉 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期713-715,共3页

目的 :了解严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS病毒特异性 Ig M、Ig G抗体产生的规律。方法 :随机选取32例 SARS患者 5 5份血清标本 ,应用 EL ISA分别检测抗 SARS病毒 Ig M、Ig G抗体。结果 :Ig M抗体阳性率为 5 6 .4 % ,平均出... 目的 :了解严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中 SARS病毒特异性 Ig M、Ig G抗体产生的规律。方法 :随机选取32例 SARS患者 5 5份血清标本 ,应用 EL ISA分别检测抗 SARS病毒 Ig M、Ig G抗体。结果 :Ig M抗体阳性率为 5 6 .4 % ,平均出现时间为 (5 .88± 2 .6 2 ) d,其中 2例患者在发病后第 2天即出现阳性 ,平均消失时间为 (14 .2 5± 2 .97) d;Ig G抗体阳性率为4 1.9% ,平均出现时间为 (11.4 0± 4 .2 0 ) d,其中 2例患者在发病后第 3天即为阳性 ;Ig M和 Ig G抗体的总体阳性漏检率为6 .2 5 %。结论 :SARS患者于发病后 3～ 7d血清中出现特异的 Ig M抗体 ,可用于实验室诊断 ;同时进行 Ig M和 Ig G抗体的检测可用于发病 8～ 14 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒抗体 产生规律 IGM IGG

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流感疫情的快速实验室诊断与分析 被引量：4

14

作者 王晗 徐军 +5 位作者 马洪滨 李波 崔恩博 姜天俊 李伯安 毛远丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期246-248,共3页

目的通过实验室病原学检查,结合流行病学史及临床症状,初步确定某部集体发热疫情的致病病原体。方法采集患者的血液、结膜分泌物及鼻、咽拭子等标本,分别通过间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录巢氏聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的通过实验室病原学检查,结合流行病学史及临床症状,初步确定某部集体发热疫情的致病病原体。方法采集患者的血液、结膜分泌物及鼻、咽拭子等标本,分别通过间接免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反转录巢氏聚合酶链反应(RT-PCR)实验、病毒分离培养和细菌培养等实验室诊断方法,筛查致病病原体。结果所有鼻、咽拭子、结膜分泌物及血细菌培养未见致病菌生长。3例最后退热患者咽拭子的病毒分离培养结果为阴性。20种呼吸道病原体免疫荧光IgM抗体筛查结果显示,流感A型阳性率为68.4%(39/57),其余病原体抗体阳性率的升高无统计学意义。ELISA流感病毒总IgM抗体阳性率70.2%(40/57)、流感病毒A型IgM抗体阳性率64.9%(37/57)、B型为35.1%(20/57)。所有鼻、咽拭子及结膜分泌物RT-PCR扩增结果未见特异扩增带。结论初步诊断此次群体发热由流感病毒感染引起。该疫情的实验室快速诊断为今后疫情的早期诊治及医院实验室开展传染病防治工作积累了经验。 展开更多

关键词 酶联免疫吸附测定 流感 人 逆转录聚合酶链反应

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HCV HVR1相关基因诱导小鼠免疫反应的比较 被引量：3

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作者 迟淑萍 舒翠莉 +3 位作者 戚扬 赵军 李伯安 程云 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1202-1204,共3页

目的对小鼠进行两种基因免疫方法的比较:分别以真核质粒pcDN3.1(+)为载体和以伤寒减毒活菌苗为载体,携带丙肝病毒高变区1(HVR1)相关模拟表位的DNA序列,诱导细胞免疫应答,以寻找较好的疫苗免疫途径。方法根据HCV HVR1模拟表位的肽序列合... 目的对小鼠进行两种基因免疫方法的比较:分别以真核质粒pcDN3.1(+)为载体和以伤寒减毒活菌苗为载体,携带丙肝病毒高变区1(HVR1)相关模拟表位的DNA序列,诱导细胞免疫应答,以寻找较好的疫苗免疫途径。方法根据HCV HVR1模拟表位的肽序列合成DNA序列,并将其连接到pcDN3.1(+)(pcDN3.1-SP)真核质粒上,然后用重组质粒转化伤寒减毒活菌苗Ty21a(Ty21a-SP)。Ty21a-SP和pcDN3.1-SP分别经口服和肌注免疫小鼠后,杀鼠、分离脾细胞,脾细胞经混合肽刺激后,用流式细胞仪检测CD8+IFN-γ+细胞;用非放射性MTS法检测细胞增殖反应;以非放射性LDH法检测CTL反应。结果对小鼠用pcDN3.1-SP和Ty21a-SP免疫后,取脾淋巴细胞经混合肽刺激后,明显增殖,CD8+IFNγ-+淋巴细胞比例增高,并诱导较强的CTL反应,但pcDN3.1-SP免疫后的上述反应较Ty21a-SP免疫弱。结论使用伤寒减毒活菌苗作为载体进行基因免疫有利于产生细胞免疫反应。 展开更多

关键词 模拟表位 伤寒疫苗 细胞免疫反应 基因免疫

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某部急性上呼吸道感染暴发疫情的病原学检测 被引量：3

16

作者 刘爱霞 郭桐生 +7 位作者 徐军 郭静霞 马洪滨 赵敏 阎亮 郝健 李伯安 毛远丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期249-251,共3页

目的通过实验室病原学筛查,结合流行病学史及临床表现,初步筛查某部急性上呼吸道感染暴发疫情的致病病原体。方法采集51例患者血液和咽拭子标本,分别采用免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、病毒分离及微生物学细... 目的通过实验室病原学筛查,结合流行病学史及临床表现,初步筛查某部急性上呼吸道感染暴发疫情的致病病原体。方法采集51例患者血液和咽拭子标本,分别采用免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、病毒分离及微生物学细菌培养等实验室诊断方法筛查、确定致病病原体,并对15例恢复期患者(发病后15～28d)血清进行IgG滴度检测,比较急性期与恢复期抗体滴度的变化。结果所有咽拭子的细菌培养及7例咽拭子的病毒分离试验结果均为阴性。对24例患者血清进行的免疫荧光法呼吸道常见20种病原体IgM抗体筛查结果显示:流感A型阳性率为20.8%(5/24),流感B型阳性率为12.5%(3/24),肺炎衣原体阳性率为20.8%(5/24),肺炎支原体阳性率为50.0%(12/24),其余病原体检测均为阴性。ELISA检测IgM抗体结果显示:总流感病毒IgM抗体阳性2例(3.92%),肺炎衣原体抗体阳性7例(13.7%),肺炎支原体抗体阳性20例(39.2%),呼吸道合胞病毒抗体阳性2例(3.92%),EB病毒抗体阳性1例(1.96%)。免疫荧光法肺炎支原体IgG抗体滴度检测结果显示1∶100稀释后阳性反应37例(72.5%),其中的31例(60.8%)在1∶1000稀释后仍呈阳性反应,对照组仅2例(6.45%)IgG抗体1∶100时呈阳性,在1∶1000稀释后均为阴性。PCR实验未见特异扩增反应。恢复期与急性期血清抗体效价检测发现15例中有7例肺炎支原体抗体效价有4倍以上变化。结论初步推断此次某部群体急性上呼吸道感染事件系肺炎支原体感染引起;该疫情的实验室快速诊断为今后疫情的早期诊断提供了思路。 展开更多

关键词 呼吸道感染 疾病暴发流行 支原体 肺炎

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SARS相关抗肺自身抗体产生机制的初步研究 被引量：2

17

作者 陈昊 李伯安 +5 位作者 赵军 何卫平 郑宇 李靖 高蓉 程云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期823-824,共2页

目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中抗 SARS病毒抗体与肺组织的反应性。 方法 :采用酶联免疫吸附法检测 SARS患者恢复期血清中抗 SARS病毒抗体 ,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法 ,吸附抗 SARS病毒抗体中同肺组织反应的 S... 目的 :检测严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中抗 SARS病毒抗体与肺组织的反应性。 方法 :采用酶联免疫吸附法检测 SARS患者恢复期血清中抗 SARS病毒抗体 ,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法 ,吸附抗 SARS病毒抗体中同肺组织反应的 SARS相关抗体。结果 :与肺组织共同孵育后 ,抗 SARS病毒抗体被部分中和 ,中和率为 13.6 %～ 32 .2 %。结论 :部分抗 SARS病毒抗体可以与肺组织反应 ,SARS病毒抗原同肺组织抗原有部分同源性。机体对 SARS病毒抗原和肺组织的交叉免疫性可能是 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 自身抗体 肺组织反应性 酶联免疫吸附法

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人IL-10基因的克隆表达及表达产物活性的初步鉴定 被引量：3

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作者 孙杰 李伯安 +4 位作者 戚扬 周继文 朱雷 迟淑萍 程云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期220-222,共3页

目的:构建含人IL-10全基因序列的原核表达载体,并进行表达及产物活性的鉴定。方法:利用RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2的总RNA中扩增IL-10的全长编码序列。编码序列经测序验证后,将其克隆入表达载体PET-28 a(+),构建IL-10基因的重组原... 目的:构建含人IL-10全基因序列的原核表达载体,并进行表达及产物活性的鉴定。方法:利用RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2的总RNA中扩增IL-10的全长编码序列。编码序列经测序验证后,将其克隆入表达载体PET-28 a(+),构建IL-10基因的重组原核表达载体。在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白,表达产物采用Western blot和ELISA进行鉴定。结果:表达产物主要位于包涵体内。经Western blot分析和ELISA检测显示,表达产物的相对分子质量(Mr)同预期的结果相符,有结合抗体活性。结论:成功地扩增人IL-10全基因序列,并构建了含该基因序列的原核表达载体,在大肠杆菌中高效表达的表达产物具有抗原活性,为下一步制备抗IL-10的单克隆抗体(mAb)提供了必要的前提。 展开更多

关键词 IL-10 克隆 原核表达

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中国大陆庚型肝炎病毒结构区与非结构区部分cDNA基因的序列分析 被引量：2

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作者 程云 郭仁锋 +7 位作者 李伯安 罗清华 曹阳 张建宗 貌盼勇 马洪滨 李静 薛净 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期257-259,共3页

作者在建立检测庚型肝炎病毒酶免疫和ＰＣＲ技术的基础上，将抗－ＨＧＶ阳性病人血清经逆转录─巢式ＰＣＲ分离部分ＨＧＶｃＤＮＡ片段，用与ＨＧＶ基因互补的特异寡酸引物进行双脱氧核苷酸链末端终止法──ＰＣＲ直接测序。结果表明，... 作者在建立检测庚型肝炎病毒酶免疫和ＰＣＲ技术的基础上，将抗－ＨＧＶ阳性病人血清经逆转录─巢式ＰＣＲ分离部分ＨＧＶｃＤＮＡ片段，用与ＨＧＶ基因互补的特异寡酸引物进行双脱氧核苷酸链末端终止法──ＰＣＲ直接测序。结果表明，中国大陆ＨＧＶ－３０２Ⅰ株部分ｃＤＮＡ序列与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的ＨＧＶ美国株ｃＤ－ＮＡ序列有极高的同源性。５’端非编码区、前１区、包膜Ｅ１区、ＮＳ３区和ＮＳ５区与美国株ｃＤＮＡ序列有高达９０％以上的同源性，编码相应氨基酸的同源性达９６％。表明ＨＧＶ感染虽呈全球分布，但在进化上属遗传高度保守。 展开更多

关键词 庚型肝炎病毒 病毒 结构 CDNA 序列分析

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Ⅱ型猪链球菌快速鉴定的分子生物学方法 被引量：2

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作者 郭桐生 鲍春梅 +5 位作者 崔恩博 李永利 曲芬 聂为民 李伯安 毛远丽 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期244-245,共2页

目的鉴定疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染的病原。方法将采集的疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染者血液标本注入血培养瓶培养,阳性报警后,转种血平板,5%CO2孵箱培养。同时涂片行革兰染色,API20 strep生化鉴定。16S RNA通用引物PCR扩增,产物经克隆、... 目的鉴定疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染的病原。方法将采集的疑似Ⅱ型猪链球菌血液感染者血液标本注入血培养瓶培养,阳性报警后,转种血平板,5%CO2孵箱培养。同时涂片行革兰染色,API20 strep生化鉴定。16S RNA通用引物PCR扩增,产物经克隆、测序后行Blast比对。针对Ⅱ型猪链球菌型抗原(CPS)、溶菌酶释放蛋白(MRP)和细胞外蛋白因子(EF)设计引物,PCR扩增鉴定。结果镜下细菌为革兰阳性球菌,呈短链状或成对排列。API20 strep鉴定编码为4640453:Ⅱ型猪链球菌(ID值92.3%),16S RNA测序结果为猪链球菌,同源性99%以上,3个特异基因均在相应位置出现条带。结论以Ⅱ型猪链球菌三个特异基因为靶基因的PCR方法能够准确快速地鉴定Ⅱ型猪链球菌。 展开更多

关键词 链球菌 猪 分子生物学 抗原 细菌

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