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环氧乙烷低温灭菌的防护 被引量:2
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作者 朱茂荣 《护士进修杂志》 北大核心 2005年第11期1054-1054,共1页
关键词 环氧乙烷 灭菌 防护
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奥沙利铂诱导的结肠癌细胞衰老模型的特性 被引量:1
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作者 潘鹭翔 贺维 +3 位作者 程柏杨 朱茂荣 顾锦涛 张毅 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第12期1523-1530,共8页
目的探讨奥沙利铂(OXA)诱导的结肠癌细胞衰老模型的表型及其特性。方法结肠癌细胞HCT-116及HT-29通过不同剂量的奥沙利铂处理(OXA 0,2.5,5,10μmol/L)后,观察细胞形态变化并进行β-半乳糖苷酶染色,筛选β-半乳糖苷酶表达最高的作为后续... 目的探讨奥沙利铂(OXA)诱导的结肠癌细胞衰老模型的表型及其特性。方法结肠癌细胞HCT-116及HT-29通过不同剂量的奥沙利铂处理(OXA 0,2.5,5,10μmol/L)后,观察细胞形态变化并进行β-半乳糖苷酶染色,筛选β-半乳糖苷酶表达最高的作为后续实验衰老模型。将结肠癌细胞HCT-116及HT-29分别分为未处理组(OXA 0μmol/L)和衰老模型组(OXA 2.5μmol/L),通过激光共聚焦检测衰老标志物p21、β-gal的表达水平,通过流式细胞术检测Edu表达情况,通过蛋白免疫印迹检测DNA损伤相关蛋白γ-H2AX、p53及周期相关蛋白p16、CDK2的表达情况,通过qRT-PCR检测衰老相关分泌表型因子IL-6、IL-8、IL-10、CXCL10、MMP-1、MMP-3的表达。分别用0-80μmol/L奥沙利铂处理HCT-116及HT-29,然后CCK-8法检测未处理组和衰老组细胞活力。结果奥沙利铂浓度为2.5μmol/L的处理组β-半乳糖苷酶表达量最高,并出现细胞形态肿胀、直径增大的衰老细胞表征,将2.5μmol/L组作为衰老模型组。与未处理组比较,衰老模型组p21、β-gal双阳性细胞比率显著增高(HCT-116双阳性细胞比率为63.67%±2.028%,HT-29双阳性细胞比率78.33%±1.33%,P<0.001)。与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞Edu阳性比例显著下降(P<0.001)。与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞的γ-H2AX、p53、p21及CDK2显著升高(P<0.001)。与未处理的结肠癌细胞相比,衰老细胞衰老相关分泌表型因子IL-6、IL-8、IL-10、CXCL10、MMP-1、MMP-3的mRNA表达水平均显著提高(P<0.001)。与未处理组相比,衰老模型组同一浓度奥沙利铂处理后细胞活力显著升高(P<0.001)。结论低剂量奥沙利铂会造成结肠癌细胞DNA损伤、导致细胞周期阻滞和诱发衰老,而衰老细胞增殖能力下降且具有衰老相关分泌表型及化疗抵抗的特性。 展开更多
关键词 细胞衰老 奥沙利铂 结肠癌
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lncRNA FTX对结肠癌伊立替康耐药株增殖、迁移能力的影响
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作者 程柏杨 潘鹭翔 +2 位作者 朱茂荣 王盈雯 顾锦涛 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第8期961-967,共7页
目的研究长链非编码RNA FTX(long noncoding RNA FTX,lncRNA FTX)对结肠癌细胞伊立替康(irinotecan,CPT-11)耐药株增殖、迁移的影响。方法对从lnCAR数据库(https://lncar.renlab.org/)中获取的80例临床样本FTX的表达情况以及70例结肠癌... 目的研究长链非编码RNA FTX(long noncoding RNA FTX,lncRNA FTX)对结肠癌细胞伊立替康(irinotecan,CPT-11)耐药株增殖、迁移的影响。方法对从lnCAR数据库(https://lncar.renlab.org/)中获取的80例临床样本FTX的表达情况以及70例结肠癌患者生存率进行统计学分析。采用药物浓度梯度构建人结肠癌伊立替康耐药细胞株(HCT-116/CPT-11R),通过CCK-8(cell counting kit-8)测定其耐药指数,并通过荧光实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测正常结肠细胞NCM460、结肠癌细胞HCT-116以及构建的耐药细胞株的FTX表达水平。构建敲低lncRNA FTX的慢病毒载体(sh-FTX)及对照空白载体(sh-NC)转染HCT-116/CPT-11R耐药株中,经过嘌呤霉素筛选获得lncRNA FTX稳定下调的结肠癌细胞耐药株,并通过qPCR鉴定敲低效率。通过克隆形成实验及CCK-8实验分别检测lncRNA FTX对sh-NC组、sh-FTX组耐药细胞克隆形成能力及生长活力的影响。利用划痕实验检测lncRNA FTX对sh-NC组、sh-FTX组耐药株细胞迁移能力的影响。通过Western blot检测sh-NC组、sh-FTX组耐药株细胞增殖相关蛋白c-myc和迁移相关蛋白Vimentin、MTA-1表达水平。结果统计数据显示,结肠癌患者的FTX表达高于正常人(P<0.01);且生存分析结果显示FTX低表达组的生存率高于FTX高表达组(P<0.05),其中低表达组患者的5年生存率约为高表达组的5倍。结肠癌伊立替康耐药株HCT-116/CPT-11R构建成功,耐药株中lncRNA FTX的表达水平显著高于正常结肠细胞以及结肠癌细胞(P<0.01)。sh-FTX能显著降低耐药细胞株中FTX的表达水平(P<0.001)。与sh-NC组比较,sh-FTX组HCT-116/CPT-11R的增殖能力和迁移能力被显著抑制(P<0.005)。lncRNA FTX被敲低后,HCT-116/CPT-11R细胞中增殖相关蛋白c-myc以及转移相关蛋白Vimentin、MTA-1蛋白表达水平降低,HCT-116耐药株的迁移和增殖能力被显著抑制(P<0.05或P<0.005)。结论lncRNA FTX在结肠癌细胞系耐药株HCT-116/CPT-11R中高表达,体外实验发现敲低lncRNA FTX能显著抑制HCT-116/CPT-11R增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 结肠癌 耐药 长链非编码RNA FTX 增殖 迁移
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