ERα和ClC-3的周期性表达与他莫昔芬抗乳腺癌作用的相关性研究

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作者 李雪苛 侯秀颖 +3 位作者 刘世情 杨海峰 朱林燕 何伟丽 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期417-426,共10页

目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间... 目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间相互作用;胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)双阻断释放法和诺考达唑阻滞细胞周期,流式细胞术检测细胞周期;MTT法检测细胞活力;Western blot检测ERα和ClC-3的蛋白表达;免疫荧光染色检测ERα和ClC-3的亚细胞分布。结果:(1)网络数据库分析表明,ERα和ClC-3的表达显著相关;免疫共沉淀实验显示这两种蛋白存在相互作用;(2)使用TdR双阻断释放法和诺考达唑获得不同周期的人乳腺癌T47D细胞;(3)TAM对G2/M期的细胞活力抑制作用最强;(4)ERα和ClC-3的蛋白表达均有周期差异,且二者亚细胞分布存在周期性特点并表现为共定位;(5)ERα和ClC-3在各周期均存在蛋白间的相互作用;(6)TAM作用于各周期细胞后,处于G2/M期细胞的ERα蛋白表达最高,但对ClC-3在各周期的表达无显著影响。结论:人乳腺癌T47D细胞中ERα和ClC-3的表达和分布存在周期差异性,并且ERα和ClC-3存在蛋白间的相互作用;ERα的周期特性可能介导了TAM的抗乳腺癌作用周期特异性。 展开更多

关键词 乳腺癌 雌激素受体Α ClC-3氯通道 他莫昔芬 细胞周期

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双氢青蒿素通过激活氯通道促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放疗敏感性 被引量：3

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作者 刘世情 周丛然 +5 位作者 唐鑫伟 周汉芬 李雪苛 侯秀颖 杨海峰 朱林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期255-264,共10页

目的:探讨ClC-3氯通道在双氢青蒿素(DHA)促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放射增敏中的作用。方法:MTT法检测DHA对CNE-2Z细胞和正常鼻咽上皮NP69-SV40T细胞活力的抑制作用;集落形成实验检测DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用;Western blot检测ClC-3蛋... 目的:探讨ClC-3氯通道在双氢青蒿素(DHA)促进鼻咽癌CNE-2Z细胞放射增敏中的作用。方法:MTT法检测DHA对CNE-2Z细胞和正常鼻咽上皮NP69-SV40T细胞活力的抑制作用;集落形成实验检测DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用;Western blot检测ClC-3蛋白的表达;siRNA技术下调ClC-3蛋白的表达;全细胞膜片钳技术记录细胞氯电流。结果:(1)相较于NP69-SV40T细胞,DHA可选择性抑制CNE-2Z细胞活力,IC_(10)值分别为(13.020±4.831)μmol/L和(5.244±1.050)μmol/L(P<0.01);(2)集落形成实验结果显示,DHA对CNE-2Z细胞具有放疗增敏作用,放射增敏比为1.9;(3)DHA能激活CNE-2Z细胞的氯通道,产生外向氯电流;但对NP69-SV40T细胞的氯通道则无影响;(4)DHA促进CNE-2Z细胞的ClC-3氯通道蛋白的表达(P<0.01);(5)氯通道阻断剂NPPB可抑制DHA对CNE-2Z细胞的放射增敏作用,抑制比达1.84;同时也抑制DHA激活的氯电流;(6)下调CNE-2Z的ClC-3蛋白可抑制DHA对鼻咽癌CNE-2Z细胞的放射增敏作用,抑制比达4.19;DHA对CNE-2Z细胞的氯电流的激活作用则不再产生。结论:DHA对鼻咽癌CNE-2Z细胞产生放疗增敏作用,很可能与ClC-3氯通道被激活有关。 展开更多

关键词 鼻咽癌 双氢青蒿素 放射增敏 ClC-3氯通道

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低渗诱导高分化鼻咽癌细胞CNE-1容积激活性氯电流 被引量：4

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作者 朱林燕 左婉红 +2 位作者 张海峰 陈丽新 王立伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1094-1097,共4页

目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%... 目的:研究细胞外低渗诱导的高分化鼻咽癌细胞CNE-1的容积激活性氯电流。方法:全细胞膜片钳记录氯电流,通过应用氯通道阻断剂、离子置换和改变细胞容积方法研究该电流的特性。结果:当细胞在等渗环境中背景电流微弱且稳定,细胞外给予47%低渗刺激后电流迅速增大,呈外向优势,对阴离子通透性的大小为:I->Br->Cl->葡萄糖酸。氯通道阻断剂ATP和NPPB可逆性地抑制此电流,ATP的抑制作用在外向电流显著强于内向电流。此电流对细胞容积改变敏感,细胞肿胀时被激活,细胞发生皱缩时则被抑制。结论:细胞外低渗诱导CNE-1细胞产生氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,在CNE-1细胞容积调节中起重要作用。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 CNE-1细胞 氯化物通道 膜片钳术

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藏药二十一味寒水石丸中5个成分的测定 被引量：3

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作者 朱林燕 孔子铭 +1 位作者 谢建锋 韩泳平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2526-2531,共6页

目的建立二十一味寒水石丸（寒水石、木香、牛黄、藏木香等）中木香烃内酯、去氢木香内酯、胆酸、土木香内酯和异土木香内酯的RP-HPLC测定方法。方法二十一味寒水石丸甲醇提取液的测定在迪马Diamonsil-2 C18（4.6 mm×250 mm,5μm... 目的建立二十一味寒水石丸（寒水石、木香、牛黄、藏木香等）中木香烃内酯、去氢木香内酯、胆酸、土木香内酯和异土木香内酯的RP-HPLC测定方法。方法二十一味寒水石丸甲醇提取液的测定在迪马Diamonsil-2 C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱进行,流动相分别为乙腈-水（65∶35）、甲醇-0.1%醋酸溶液（75∶25）和乙腈-0.1%磷酸水（52∶48）;体积流量分别为1.0、0.8、1.0 m L/min;柱温均为30℃;其中木香烃内酯和去氢木香内酯检测使用二极管阵列检测器,检测波长225 nm;胆酸检测使用蒸发光散射检测器,漂移管温度90℃,氮气体积流量为1.6 L/min;土木香内酯和异土木香内酯的检测波长为220 nm。结果木香烃内酯、去氢木香内酯、胆酸、土木香内酯和异土木香内酯线性范围分别为0.043 5-0.435μg（r=0.999 8）、0.045-0.45μg（r=0.999 9）、0.506 5-2.533μg（r=0.999 9）、0.64-2.4μg（r=0.999 3）、0.64-2.4μg（r=0.999 9）;平均回收率分别为99.5%、99.7%、99.8%、99.3%、99.6%;RSD分别为0.8%、0.9%、1.3%、0.7%、1.1%（n=9）。结论本方法可用于二十一味寒水石丸中5个成分的定量测定。 展开更多

关键词 二十一味寒水石丸 木香烃内酯 去氢木香内酯 胆酸 土木香内酯 异土木香内酯 HPLC

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抑制氯通道阻抑鼻咽癌细胞周期和细胞增殖 被引量：21

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作者 王立伟 陈丽新 +7 位作者 朱林燕 毛建文 孙雪荣 聂思槐 张瑾 钟平 蔡波 李攀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期715-718,共4页

目的 :研究Cl-通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩 (RVD)、增殖及细胞周期分布中的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)RVD ,用台盼蓝拒染法检测细胞存活率 ,MTT法检测细胞增殖能力。用流式细胞仪测定细胞周期不同时相... 目的 :研究Cl-通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩 (RVD)、增殖及细胞周期分布中的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)RVD ,用台盼蓝拒染法检测细胞存活率 ,MTT法检测细胞增殖能力。用流式细胞仪测定细胞周期不同时相细胞百分率。结果 :Cl-通道抑制剂硝基苯丙胺基苯甲酸 (NPPB)剂量依赖性抑制RVD和细胞增殖 ,10 0 μmol/LNPPB明显阻抑细胞周期进程 ,使细胞停滞于G1期 ,G1期细胞百分率从 5 4 %提高到71% ,但对细胞存活率没有显著影响。结论 :阻抑Cl-通道可阻滞细胞于G1期而抑制细胞增殖。提示Cl-通道和RVD的激活是促进细胞从G1期进入S期和维持增殖所必需的因素。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 肿瘤细胞 氯化物通道 细胞周期

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丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞氯通道的激活作用 被引量：8

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作者 李媛 刘善文 +6 位作者 李华荣 马文波 潘廷才 朱林燕 叶文才 王立伟 陈丽新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1205-1209,共5页

目的研究丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用并分析该通道的生理学和药理学特性。方法采用膜片钳全细胞记录技术记录丹参酮ⅡA激活的CNE-2Z细胞氯电流,细胞外高张刺激或灌流氯离子通道阻断剂,观察并分析电流的特性。... 目的研究丹参酮ⅡA对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用并分析该通道的生理学和药理学特性。方法采用膜片钳全细胞记录技术记录丹参酮ⅡA激活的CNE-2Z细胞氯电流,细胞外高张刺激或灌流氯离子通道阻断剂,观察并分析电流的特性。结果细胞外灌流1nmol.L-1的丹参酮ⅡA激活CNE-2Z细胞产生一个具有明显外向优势的电流,该电流没有明显的电压依赖性和时间依赖性的失活,电流的翻转电位为(-5.9±0.2)mV,接近氯离子平衡电位。渗透性容积缩小可以完全抑制该电流,氯通道阻断剂NPPB可以部分抑制该电流。结论丹参酮ⅡA激活鼻咽癌细胞膜上的氯通道,诱导氯电流,该电流具有容积敏感性。 展开更多

关键词 中药药理 丹参酮ⅡA 氯通道 鼻咽肿瘤 氯通道阻 断剂 膜片钳技术

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Cl^-在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中的作用 被引量：12

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作者 陈丽新 王立伟 +7 位作者 朱林燕 聂思槐 张谨 钟平 罗海兵 蔡波 李攀 Tim Jacob 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期490-493,共4页

目的 :研究鼻咽癌细胞的调节性容积回缩 (RVD)及Cl-在其中所起的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)在细胞外低渗刺激时的细胞容积改变 ,用离子置换法和通道阻断法阐明Cl-在RVD中所起的作用。结果 :细胞外低渗刺激... 目的 :研究鼻咽癌细胞的调节性容积回缩 (RVD)及Cl-在其中所起的作用。方法 :活细胞图像分析低分化鼻咽癌细胞 (CNE - 2Z)在细胞外低渗刺激时的细胞容积改变 ,用离子置换法和通道阻断法阐明Cl-在RVD中所起的作用。结果 :细胞外低渗刺激使细胞膨胀并诱发RVD。在 16 0 - 2 30mOsmol/L范围内 ,RVD与细胞膨胀程度正相关。用葡萄糖酸取代灌流液Cl-时RVD增强 ,细胞内Cl-耗竭时RVD消失。氯通道阻断剂阻抑RVD ,但不同的阻断剂对RVD的阻抑率有明显差异。结论 :Cl-是CNE - 2Z细胞RVD的关键离子 ,Cl-通道激活 ,Cl-外流是RVD的主要机制。 展开更多

关键词 调节性容积回缩 RVD 肿瘤细胞培养 氯离子通道 鼻咽肿瘤

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黄芪甲苷拮抗马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤 被引量：17

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作者 马莲顺 肖植涛 +7 位作者 叶杰成 刘梅 郑广娟 李楚天 陆伟标 陈德臻 杨海峰 朱林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1966-1970,共5页

目的:观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤的影响。方法:(1)体外实验:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致人近曲小管上皮细胞(HK-2)存活率降低的拮抗作用;(2)动物体内实验:马兜铃酸Ⅰ腹腔注射6 d建立昆明小... 目的:观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致的急性肾小管损伤的影响。方法:(1)体外实验:四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察黄芪甲苷对马兜铃酸Ⅰ所致人近曲小管上皮细胞(HK-2)存活率降低的拮抗作用;(2)动物体内实验:马兜铃酸Ⅰ腹腔注射6 d建立昆明小鼠急性肾损伤模型,同时用50 mg.kg-1.d-1黄芪甲苷灌胃进行干预治疗。7 d后检测尿蛋白、尿γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平的变化和肾脏组织形态学变化。结果:(1)黄芪甲苷能增加马兜铃酸Ⅰ处理的HK-2细胞存活率,并呈剂量依赖趋势;(2)黄芪甲苷干预组小鼠尿蛋白、尿γ-GT、SCr、和BUN的水平均低于马兜铃酸肾损伤组;近曲小管坏死和裸基底膜面积也较马兜铃酸肾损伤组明显改善。结论:黄芪甲苷可以拮抗马兜铃酸Ⅰ诱导的急性肾小管损伤。 展开更多

关键词 马兜铃酸Ⅰ 黄芪甲苷 急性肾损伤 小鼠

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DSF-Cu通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡 被引量：7

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作者 杨亚萍 汪亚帷 +7 位作者 李梦佳 张可凡 孙晓雪 梁志红 陈丽新 王立伟 杨海峰 朱林燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1208-1217,共10页

目的探测双硫仑(disulfiram,DSF)螯合氯化铜(DSF-Cu)通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。方法采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及线粒体膜电位(mitochond... 目的探测双硫仑(disulfiram,DSF)螯合氯化铜(DSF-Cu)通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。方法采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的改变。AFM探测细胞表面形貌和超微结构、细胞高度、宽度及粗糙度的变化。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)观察细胞骨架F-actin的分布和重组。结果细胞周期检测显示DSF-Cu将CNE-2Z细胞周期阻滞于G2/M期。Annexin-V/PI检测细胞凋亡显示随药物浓度增加,与对照组相比,实验组早凋率和晚凋率、坏死率细胞均明显增加。进一步检测凋亡相关信号发现DSF-Cu可促进CNE-2Z细胞内活性氧水平的增加及诱导MMP下降。AFM成像表明,与对照组相比,随着药物浓度增大,细胞逐渐变小,胞质浓缩,高度增加,膜表面粗糙度降低,变得平整光滑;细胞伪足由对照组的丰富密集,逐渐变短、萎缩,甚至完全破坏。LSCM进一步观察发现DSF-Cu引起F-actin荧光强度减弱,结构重排,严重影响微丝的功能。结论 DSF-Cu可诱导CNE-2Z细胞依赖线粒体的凋亡途径,利用AFM在单细胞水平上分析DSF-Cu对细胞膜的毒性作用,为鼻咽癌的治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 双硫仑 原子力显微镜 细胞骨架 活性氧 凋亡 鼻咽癌 线粒体膜电位

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顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流 被引量：10

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作者 阳小雅 王立伟 +4 位作者 朱林燕 杨林杰 毛建文 Tim Jacob 陈丽新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期666-669,共4页

目的:研究抗癌药顺铂对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用以及该电流的特性。方法:采用膜片钳技术记录顺铂激活的CNE-2Z细胞全细胞电流;离子置换法等方法分析通道的特性。结果:细胞外灌流5μmol/L的顺铂诱发CNE-2Z细胞产生一个... 目的:研究抗癌药顺铂对低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)氯通道的激活作用以及该电流的特性。方法:采用膜片钳技术记录顺铂激活的CNE-2Z细胞全细胞电流;离子置换法等方法分析通道的特性。结果:细胞外灌流5μmol/L的顺铂诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的电流,电流的翻转电位为(-6.69±0.51)mV,接近氯离子平衡电位(-0.9 mV)。该电流的激活依赖于细胞内ATP。顺铂激活的细胞膜氯通道对阴离子的通透性顺序为:I-≥Br->Cl->gluconate。氯通道阻断剂tamoxifen完全抑制该电流。结论:抗癌药顺铂可以激活一个电流特征与容积激活性氯通道相似的氯通道。 展开更多

关键词 顺铂 鼻咽肿瘤 细胞凋亡 氯化物通道

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儿童膀胱副神经节瘤1例 被引量：7

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作者 杨海峰 朱林燕 +4 位作者 王智园 石灵春 李伟平 李楚天 何青莲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期117-118,共2页

关键词 膀胱肿瘤 副神经节瘤 儿童 嗜铬细胞瘤 病例报道

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港澳台侨与大陆大学生学习风格差异研究 被引量：10

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作者 陈丽新 张海峰 +2 位作者 朱林燕 柏志全 王立伟 《高教探索》 CSSCI 北大核心 2009年第6期104-107,共4页

本研究对暨南大学的港澳台侨学生与大陆学生的学习风格进行调查,分析他们的学习风格差异,为深化教育改革提供第一手材料,以使我们的教学更适应不同类型学生的特点。本研究向暨南大学医学类专业2005、2006年级港澳台侨学生和大陆学生发... 本研究对暨南大学的港澳台侨学生与大陆学生的学习风格进行调查,分析他们的学习风格差异,为深化教育改革提供第一手材料,以使我们的教学更适应不同类型学生的特点。本研究向暨南大学医学类专业2005、2006年级港澳台侨学生和大陆学生发放所罗门学习风格量表进行问卷调查,结果表明这两类学生在信息加工、理解方面存在差异,外招生偏于活跃和综合型,而内招生偏于沉思与序列型,而两类学生在信息感知和输入方面没有显著差异,都偏于感悟型与视觉型。 展开更多

关键词 学习风格 所罗门学习风格量表 医学生

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大黄素阻抑人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期进程 被引量：6

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作者 李梦佳 马莲顺 +5 位作者 杨亚萍 朱玮玮 陈丽新 王立伟 朱林燕 杨海峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1417-1421,共5页

目的:探讨大黄素抗人乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关机制。方法:采用MTT法检测大黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析周期分布和凋亡情况;原子力显微镜(AFM)观察细胞膜表面超微结构的变化。结果:大黄素呈剂量依赖性地抑制MCF-7... 目的:探讨大黄素抗人乳腺癌MCF-7细胞增殖及其相关机制。方法:采用MTT法检测大黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析周期分布和凋亡情况;原子力显微镜(AFM)观察细胞膜表面超微结构的变化。结果:大黄素呈剂量依赖性地抑制MCF-7细胞的增殖;大黄素能使MCF-7细胞阻滞在G0/G1期;Annexin V/PI双染法结果表明,大黄素对MCF-7细胞没有明显的促凋亡作用。AFM观察细胞膜超微结构,结果显示对照组细胞核区饱满,膜表面平坦光滑;大黄素作用48 h可致细胞核区坍塌萎缩,细胞表面颗粒密集,膜表面的平均粗糙度(Ra)和均方粗糙度(Rq)与对照组相比均有显著增加(P<0.05)。结论:大黄素通过阻断MCF-7细胞的细胞周期进程及影响细胞膜超微结构而发挥抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 大黄素 MCF-7细胞 细胞增殖 细胞周期 原子力显微镜

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细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达 被引量：3

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作者 柏志全 张海峰 +4 位作者 陈丽新 朱林燕 左婉红 和树同 王立伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期202-205,共4页

目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质... 目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白D1 绿色荧光蛋白 质粒构建 免疫荧光 免疫印迹

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氯通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量：3

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作者 柏志全 李华荣 +5 位作者 张海峰 刘善文 朱林燕 叶文才 陈丽新 王立伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1304-1308,共5页

目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度... 目的探讨氯离子通道在藤黄酸诱导低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡过程中的作用。方法采用MTT比色法检测细胞增殖,Hoechst 33342染色法分析细胞凋亡,全细胞膜片钳技术记录氯电流。结果藤黄酸明显抑制CNE-2Z细胞增殖,其抑制作用呈时间和浓度依赖性,IC50为3.1μmol/L;8μmol/L藤黄酸诱导细胞凋亡作用可被氯离子通道阻断剂NPPB和Tamoxifen抑制。藤黄酸诱发CNE-2Z细胞产生一个有明显外向优势的氯电流,可被NPPB明显抑制。结论藤黄酸可能通过激活氯离子通道而诱导CNE-2Z细胞凋亡和抑制细胞增殖,提示氯通道参与藤黄酸诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 藤黄酸 鼻咽癌 细胞凋亡 氯离子通道 膜片钳技术

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ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩 被引量：4

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作者 叶东 张海峰 +2 位作者 朱林燕 王立伟 陈丽新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期216-220,共5页

目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blottin... 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。 展开更多

关键词 ClC-3氯通道 SIRNA 鼻咽癌细胞 细胞容积

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冰片对鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道的激活作用 被引量：3

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作者 孟龙 王海波 +8 位作者 邓志钦 汪源 伍嘉宝 赖周毅 吕瑞玲 孙晓雪 朱林燕 陈丽新 王立伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1671-1676,共6页

目的探讨冰片对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录冰片激活CNE-2Z细胞膜电流,分析其电流特性;用活细胞图像法观察并测量冰片对细胞体积的影响。结果细胞外灌流冰片(20μmol
... 目的探讨冰片对低分化鼻咽癌(CNE-2Z)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录冰片激活CNE-2Z细胞膜电流,分析其电流特性;用活细胞图像法观察并测量冰片对细胞体积的影响。结果细胞外灌流冰片(20μmol·L-1)诱导CNE-2Z细胞膜氯通道开放,产生氯电流,该电流有明显外向优势,无电压及时间依赖性失活,其翻转电位接近氯离子平衡电位,该电流可被氯通道阻断剂tamoxifen抑制,细胞外灌流47%高渗溶液完全抑制该电流。细胞外灌流冰片30 min,细胞体积缩小约9.4%,该作用可被tamoxifen完全抑制。结论冰片可以激活低分化鼻咽癌细胞容积敏感性氯通道,导致细胞体积缩小,氯通道在冰片引起细胞体积缩小中起着重要作用。 展开更多

关键词 冰片 氯通道 氯通道阻断剂 癌细胞 膜片钳技术 细胞体积

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钩吻总碱对肝癌细胞氯通道的激活作用 被引量：3

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作者 王海波 孙晓雪 +6 位作者 邓志钦 吕瑞玲 赖周毅 孟龙 朱林燕 陈丽新 王立伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1529-1535,共7页

目的探讨钩吻总碱对肝癌(HepG_2)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法活细胞图像法观察记录钩吻总碱作用后HepG_2细胞容积的变化;全细胞膜片钳技术记录钩吻总碱对HepG_2细胞膜电流的作用,通过细胞外灌流高渗液,氯通道阻断剂ta... 目的探讨钩吻总碱对肝癌(HepG_2)细胞氯通道的激活作用及对细胞容积的影响。方法活细胞图像法观察记录钩吻总碱作用后HepG_2细胞容积的变化;全细胞膜片钳技术记录钩吻总碱对HepG_2细胞膜电流的作用,通过细胞外灌流高渗液,氯通道阻断剂tamoxifen和5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)研究电流的生理学及药理学特性。结果细胞外灌流钩吻总碱50min,细胞体积减小(12.48±2.2)%(P<0.01),该现象可被氯通道阻断剂tamoxifen抑制。膜片钳结果显示,细胞外灌流钩吻总碱(2μmol·L^(-1))可激活HepG_2细胞膜氯电流,该电流有明显外向优势,无电压及时间依赖性失活,其翻转电位为(-3.21±0.67)mV,接近氯离子平衡电位(-0.9mV),可被氯通道阻断剂tamoxifen和NPPB抑制,细胞外灌流47%高渗溶液亦可明显抑制该电流。结论钩吻总碱可引起肝癌HepG_2细胞体积缩小,诱导凋亡性容积缩小(AVD)发生,该作用可被氯通道阻断剂明显抑制,提示氯通道可能为钩吻总碱抗癌作用的靶点之一。 展开更多

关键词 钩吻总碱 肝癌细胞 凋亡性容积缩小 膜片钳技术 氯通道 氯通道阻断剂

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红花注射液对脂多糖诱导的兔弥散性血管内凝血的作用 被引量：3

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作者 朱玮玮 李梦佳 +4 位作者 马莲顺 刘梅 林熙 朱林燕 肖飞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1481-1486,共6页

目的:研究红花注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:兔耳缘静脉持续滴注LPS建立兔DIC模型。采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT);凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞... 目的:研究红花注射液对脂多糖(LPS)诱导的兔弥散性血管内凝血(DIC)的作用。方法:兔耳缘静脉持续滴注LPS建立兔DIC模型。采用全自动凝血分析仪检测活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT);凝固法测定纤维蛋白原含量;全自动血细胞分析仪进行血小板计数;发色底物法测定蛋白C及抗凝血酶Ⅲ的活性;全自动血浆分析仪测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)和血尿素氮(BUN);ELISA法检测血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果:DIC模型组APTT和PT进行性延长,ALT活性和BUN含量显著升高,蛋白C和抗凝血酶Ⅲ的活性显著降低,血小板计数进行性减少,血浆FDP和TNF-α含量显著升高。给予红花注射液后,DIC模型兔APTT和PT的延长明显缩短,血小板计数、纤维蛋白原含量、蛋白C及抗凝血酶Ⅲ活性均明显恢复,血浆ALT、BUN、FDP和TNF-α水平均明显降低。结论:红花注射液对LPS诱导的兔DIC有较好的拮抗作用。 展开更多

关键词 红花注射液 脂多糖类 肝素 弥散性血管内凝血 血小板

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氯通道在阿霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用 被引量：2

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作者 刘梅 罗海 +8 位作者 林嘉伟 魏燕 李媛 刘善文 孟龙 邹丽莉 朱林燕 王立伟 陈丽新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1249-1253,共5页

目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉... 目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉素诱导CNE-2Z细胞发生凋亡性容积减小,细胞外灌流阿霉素2 h,细胞容积减小约10%;(3)阿霉素可激活氯通道,产生一个有较明显外向优势的氯电流;(4)氯通道阻断剂5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)-benzoate(NPPB)明显抑制阿霉素诱导的凋亡性容积减小、细胞凋亡和氯电流。结论阿霉素可通过激活氯通道而诱导细胞凋亡,氯通道在阿霉素诱导的鼻咽癌细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多

关键词 阿霉素 鼻咽肿瘤 氯通道 膜片钳技术 凋亡 凋亡性容积减小

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