基于SYBR GreenⅡ的BVDV NS3基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

1

作者 李阳 张世勋 +4 位作者 赫鸣睿 刘珊珊 岳山 刘宇 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第2期23-31,共9页

为了建立基于SYBR GreenⅡ的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,设计并筛选了BVDV NS3基因的qRT-PCR引物,建立了BVDV NS3 qRT-PCR检测方法,并利用CFX96和猪警-2000 qRT-PCR仪检测了临床牛血清样本。结果显... 为了建立基于SYBR GreenⅡ的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NS3基因实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,设计并筛选了BVDV NS3基因的qRT-PCR引物,建立了BVDV NS3 qRT-PCR检测方法,并利用CFX96和猪警-2000 qRT-PCR仪检测了临床牛血清样本。结果显示,筛选出1对特异性好的引物,CFX96和猪警-2000 qRT-PCR的标准品最小检出值分别为1×10^(1)copies·μL^(-1)和1×10^(2) copies·μL^(-1),特异性和重复性均良好,且临床血清样本的检测结果准确、一致。研究为BVDV检测提供了技术手段。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 NS3基因 实时荧光定量PCR SYBR GreenⅡ

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降解黄曲霉毒素B1的鹅源乳酸菌筛选及其生物学特性研究

2

作者 李晶 刘梦 +7 位作者 孙婉婷 刘珊珊 赵达 李犇 裴洪岩 刘宇 王雪 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第1期38-43,50,共7页

通过筛选可以降解黄曲霉毒素B1(Aflatoxins B1,AFB1)的鹅源乳酸菌,为防治鹅黄曲霉病开发乳酸菌微生态制剂奠定基础。研究以香豆素为唯一碳源对成年健康鹅粪便中分离菌株进行初筛,确定分离株对AFB1降解能力,再对筛选菌株进行抗逆性等生... 通过筛选可以降解黄曲霉毒素B1(Aflatoxins B1,AFB1)的鹅源乳酸菌,为防治鹅黄曲霉病开发乳酸菌微生态制剂奠定基础。研究以香豆素为唯一碳源对成年健康鹅粪便中分离菌株进行初筛,确定分离株对AFB1降解能力,再对筛选菌株进行抗逆性等生物学特性研究,并进行16S rRNA鉴定。结果表明:确定9株分离菌对AFB1降解率达到50%以上,其中菌株DT951降解率达到75%;经生物学特性研究表明,菌株DT951在pH 3.0酸性环境及0.2%、0.3%的胆盐浓度环境下都有较好的耐受性;经16S rRNA鉴定DT951为唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)。综上所述,研究筛选出1株唾液乳杆菌DT951,具有较好降解AFB1的能力和耐受性,为深入研究降解AFB1的鹅源益生菌制剂提供参考依据。 展开更多

关键词 鹅 曲霉菌病 黄曲霉毒素B1 唾液乳杆菌 生物学特性

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氯化-N-十二烷基吡啶-1-乙酰胺杀灭或抑制病原体的活性研究

3

作者 苏思雨 陈楠楠 +4 位作者 赵志博 朱战波 周玉龙 张泽财 刘宇 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第1期27-33,共7页

季铵盐类表面活性剂是一类低毒、高效的广谱消毒剂,能杀灭多种细菌和病毒,在养殖业和医学等领域的消毒中应用前景广阔。研究旨在明确自主合成的季铵盐类表面活性剂氯化-N-十二烷基吡啶-1-乙酰胺(C12cmpC)对禽源致病菌和牛病毒性腹泻病毒... 季铵盐类表面活性剂是一类低毒、高效的广谱消毒剂,能杀灭多种细菌和病毒,在养殖业和医学等领域的消毒中应用前景广阔。研究旨在明确自主合成的季铵盐类表面活性剂氯化-N-十二烷基吡啶-1-乙酰胺(C12cmpC)对禽源致病菌和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的抗菌抗病毒活性。通过MIC、MBC和时间杀菌试验,明确C12cmpC的体外杀灭、抑制革兰阴性和阳性细菌的效果。通过细胞形态观察、细胞活性检测和BVDV m RNA的qRT-PCR检测,初步明确C12cmpC的抗病毒活性。结果表明,C12cmpC对鹅大肠杆菌(QS195313)的MIC为250 mg·L^(-1),MBC为500 mg·L^(-1)。C12cmpC对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌标准株的MIC为31.25 mg·L^(-1),MBC为62.5 mg·L^(-1)。此外,C12cmpC对MDBK细胞的最大安全浓度为5 mg·L^(-1)。其与BVDV作用1、5、30、60 min后,MDBK细胞中病毒m RNA水平均显著降低。研究表明新型季铵盐类表面活性剂氯化-N-十二烷基吡啶-1-乙酰胺具有较好的抗菌抗病毒活性,研究为新型消毒剂的开发提供了理论依据。 展开更多

关键词 季铵盐类表面活性剂 消毒剂 抗菌效果 禽源致病菌 牛病毒性腹泻病毒

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黄芩苷对扑热息痛诱导的小鼠肝脏氧化应激和凋亡的影响

4

作者 蒋鹏轩 谢艺萌 +4 位作者 张年洁 王巧玉 甄明哲 朱战波 王新 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第4期34-39,共6页

为探究黄芩苷(BA)对扑热息痛(APAP)诱导急性肝损伤的保护作用,并对其机制进行初步探讨。试验将小鼠随机分为空白对照组(CON组)、黄芩苷对照组(BA组)、APAP模型对照组(APAP组)、黄芩苷低剂量组(APAP+L-BA组)和黄芩苷高剂量组(APAP+H-BA组... 为探究黄芩苷(BA)对扑热息痛(APAP)诱导急性肝损伤的保护作用,并对其机制进行初步探讨。试验将小鼠随机分为空白对照组(CON组)、黄芩苷对照组(BA组)、APAP模型对照组(APAP组)、黄芩苷低剂量组(APAP+L-BA组)和黄芩苷高剂量组(APAP+H-BA组)。H&E染色制作病理组织切片,观察肝脏病理学变化,检测血清ALT、AST水平,用试剂盒测定肝脏GSH、GSH-Px、MDA水平,Western blot测定Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。结果表明:与CON组相比,APAP组血清中ALT、AST水平上升,肝组织GSH和GSH-Px的含量下降,MDA水平上升,Bax的表达增加,Bcl-2的表达减少,且H&E染色结果显示肝脏明显损伤;与APAP组相比,APAP+L-BA组和APAP+H-BA组血清ALT、AST、MDA水平降低,GSH和GSH-Px的含量升高,Bax的蛋白表达水平降低,Bcl-2的蛋白表达增加,且H&E染色结果显示肝脏受损情况明显减轻。综上,BA对APAP诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与减轻小鼠肝脏内氧化应激引起的自由基-抗氧化酶失衡和调节凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 黄芩苷 急性肝损伤 氧化应激 凋亡 扑热息痛 小鼠

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牛大肠杆菌油乳剂疫苗免疫的研究 被引量：4

5

作者 朱战波 崔玉东 +5 位作者 侯喜林 贾永泉 余丽芸 朴范泽 何传桂 张鑫慧 《黑龙江八一农垦大学学报》 1999年第4期66-72,共7页

应用K99、F41菌毛兼生性牛大肠杆菌分离株8511-2菌毛亚单位油佐剂灭活苗、8511-2全菌体灭活苗、 8511-2菌毛与菌体混合灭活苗给产犊前7周和4周的怀孕母牛免疫， 用玻片凝集试验检测母牛抗体水平；产犊后8-10h犊牛口服攻毒800亿菌/ml 851... 应用K99、F41菌毛兼生性牛大肠杆菌分离株8511-2菌毛亚单位油佐剂灭活苗、8511-2全菌体灭活苗、 8511-2菌毛与菌体混合灭活苗给产犊前7周和4周的怀孕母牛免疫， 用玻片凝集试验检测母牛抗体水平；产犊后8-10h犊牛口服攻毒800亿菌/ml 8511-2株。结果表明：三种苗免疫母牛均能使犊牛获得一定保护，犊牛腹泻平均保护率分别为55.6%、89.1%、94.6%，对照组为16.3%；菌毛苗和混合苗效果优于全菌体苗。方差分析表明：不同菌苗之间以及不同免疫程序之间的K99免疫效果均存在显著差异，不同菌苗之间F41免疫效果差异显著；利用最小二乘法建立数学模型，结合动态趋势图分析母牛抗体效价的变化规律，表明：K99免疫效果优于F41，两次免疫效果优于单免。 展开更多

关键词 牛 大肠杆菌病 免疫 油乳剂疫苗 大肠杆菌

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中草药菌毒灵对鹅源致病菌的抗菌作用研究 被引量：6

6

作者 朱战波 刘宇 +6 位作者 卢杰 周瑞进 王传富 李亚微 谭磊 崔莉 王新 《中兽医医药杂志》 2008年第4期35-36,共2页

关键词 抗菌作用 致病菌 中草药 细菌性传染病 鹅 细菌质粒 葡萄球菌病 巴氏杆菌病

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兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联蜂胶灭活苗的研制 被引量：1

7

作者 朱战波 李凤华 +3 位作者 李冬野 崔玉东 侯喜林 朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》 2004年第4期56-60,共5页

应用兔出血症病毒(RHDV)和巴氏杆菌(Pm)联合研制而成的蜂胶佐剂灭活苗,用 1 mL 免疫试验兔,免疫后第 5d,对 RHDV 保护率达 100%(5/5);免疫后第 14d,对巴氏杆菌的保护率达 100%(4/4),第 7d 即产生较强的免疫力。T 细胞总玫瑰花环形成率(E... 应用兔出血症病毒(RHDV)和巴氏杆菌(Pm)联合研制而成的蜂胶佐剂灭活苗,用 1 mL 免疫试验兔,免疫后第 5d,对 RHDV 保护率达 100%(5/5);免疫后第 14d,对巴氏杆菌的保护率达 100%(4/4),第 7d 即产生较强的免疫力。T 细胞总玫瑰花环形成率(Et率)、活性玫瑰花环形成率(Ea率)的测定结果表明:蜂胶具有提高机体细胞免疫功能的作用;通过 HI 法监测兔病毒性出血症抗体水平,结果表明:蜂胶苗产生抗体时间较早,第 7d 抗体效价可达到较高水平(26.8),第 21 d 达到高峰(28.8)。 展开更多

关键词 兔病毒性出血症 巴氏杆菌病 蜂胶 灭活苗

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猪伪狂犬病诊断方法研究进展 被引量：9

8

作者 刘建柱 崔玉东 +1 位作者 朱战波 朴范泽 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期33-36,共4页

猪伪狂犬病是由猪疱疹病毒I型引起的一种高度传染性、致死性的传染病。其疾病的传播是由易感母猪传染给新生仔猪,导致仔猪呼吸困难、发热、精神沉郁、呕吐、下痢、震颤而大批死亡,给养猪业造成巨大的经济损失。为了减少该病的发生,广大... 猪伪狂犬病是由猪疱疹病毒I型引起的一种高度传染性、致死性的传染病。其疾病的传播是由易感母猪传染给新生仔猪,导致仔猪呼吸困难、发热、精神沉郁、呕吐、下痢、震颤而大批死亡,给养猪业造成巨大的经济损失。为了减少该病的发生,广大兽医工作者建立了许多检测和诊断的方法,为有效的控制伪狂犬病的暴发提供了有力的保证。 展开更多

关键词 猪 伪狂犬病 诊断 病毒 分离 鉴定 动物试验 免疫学 血清学 变态反应

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乳酸菌益生特性及在猪生产中应用研究进展 被引量：14

9

作者 刘宇 李阳 +6 位作者 刘通 岳山 周金玲 赵静虎 王华欣 史同瑞 朱战波 《动物医学进展》 北大核心 2016年第6期87-90,共4页

病原菌耐药性和药物残留问题日益受到人们的关注,寻找饲用抗生素替代品已成为研究热点。乳酸菌具备诸多益生特性,可代谢产生抑菌物质,抑制或杀死肠道病原菌,与病原菌竞争肠黏膜黏附位点,调节肠道黏膜免疫,维持肠道屏障功能,改善肠道菌... 病原菌耐药性和药物残留问题日益受到人们的关注,寻找饲用抗生素替代品已成为研究热点。乳酸菌具备诸多益生特性,可代谢产生抑菌物质,抑制或杀死肠道病原菌,与病原菌竞争肠黏膜黏附位点,调节肠道黏膜免疫,维持肠道屏障功能,改善肠道菌群平衡,改善猪只健康,已成为饲用抗生素潜在的替代品之一。论文综述了乳酸菌生物学特性、益生作用和在猪生产中的应用。 展开更多

关键词 乳酸菌 益生菌特性 应用

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C基因型牛副流感3型病毒的分离鉴定 被引量：6

10

作者 冉旭华 张峣 +6 位作者 曹思 卢元赫 张玲玲 刘阳阳 倪宏波 朱战波 闻晓波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期1368-1373,共6页

为了对宁夏地区患有呼吸系统疾病的舍饲牛进行病原鉴定,试验主要利用RT-PCR方法对样品进行牛副流感3型病毒(BPIV3)M基因序列扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行亚克隆。通过氨苄青霉素平板筛选,将... 为了对宁夏地区患有呼吸系统疾病的舍饲牛进行病原鉴定,试验主要利用RT-PCR方法对样品进行牛副流感3型病毒(BPIV3)M基因序列扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行亚克隆。通过氨苄青霉素平板筛选,将鉴定为阳性的克隆菌进行核苷酸序列测定并利用分子生物学软件与GenBank上参考序列进行同源性比对。测序结果表明,从样品中分离到了1株BPIV3,并命名为NX49,其M基因全长为1 056bp;进化分析表明,NX49隶属于BPIV3C基因型,其M基因与中国山东C型分离株SD0835具有较高同源性,核苷酸同源性为99.4%;理化分析表明,该毒株对温度、酸及有机物均敏感,高温孵育下Mg2+对该病毒无保护力;血凝试验表明,NX49对豚鼠红细胞凝集效价仅为1∶4,且仅在4℃孵育时出现凝集反应。本研究成功分离得到一株BPIV3C型毒株,这将有助于中国BPIV3分子进化规律及病毒流行特点的进一步研究。 展开更多

关键词 牛副流感3型病毒 C基因型 分离 鉴定 同源性比对

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牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H的表达与纯化 被引量：4

11

作者 胡旭 梁宏儒 +6 位作者 姜东君 赵达 高佳滨 陈为宏 尹辉 乔波 朱战波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期38-41,共4页

试验对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)基因进行克隆、鉴定,并在原核系统中表达。以多杀性巴氏杆菌(CVCC448)强毒株基因组为模板,扩增OmpH基因,连接T载体,经测序鉴定正确后与表达载体pET-28a连接构建重组表达质粒OmpH-pET28a,将此重组质... 试验对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)基因进行克隆、鉴定,并在原核系统中表达。以多杀性巴氏杆菌(CVCC448)强毒株基因组为模板,扩增OmpH基因,连接T载体,经测序鉴定正确后与表达载体pET-28a连接构建重组表达质粒OmpH-pET28a,将此重组质粒转化入表达宿主E.coli BL21菌株内,抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导,表达产物通过镍离子亲和层析纯化,之后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,OmpH基因的编码区为978bp,编码326个氨基酸残基,融合蛋白分子质量约为37ku。Western blotting检测结果显示,表达的重组蛋白OmpH可与鼠抗多杀性巴氏杆菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。多杀性巴氏杆菌OmpH基因的成功表达,为进一步研究其免疫作用奠定了基础。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白H 克隆 表达 鉴定

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牛轮状病毒UK株NSP1基因序列分析及原核表达 被引量：2

12

作者 冉旭华 曹思 +4 位作者 张峣 魏晓曼 闻晓波 倪宏波 朱战波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1104-1109,共6页

轮状病毒是引起多种幼龄动物及5周龄以下儿童腹泻的主要病原体。NSP1非结构蛋白是轮状病毒基因5的产物,为长约55ku的RNA结合蛋白。现已发现NSP1蛋白是一种毒力决定因子,可颉颃宿主先天性免疫应答。参照GenBank收录的牛轮状病毒UK株序列... 轮状病毒是引起多种幼龄动物及5周龄以下儿童腹泻的主要病原体。NSP1非结构蛋白是轮状病毒基因5的产物,为长约55ku的RNA结合蛋白。现已发现NSP1蛋白是一种毒力决定因子,可颉颃宿主先天性免疫应答。参照GenBank收录的牛轮状病毒UK株序列设计并合成1对特异性引物,本试验利用RT-PCR方法扩增牛轮状病毒UK株NSP1基因,克隆入pET-28a(+)表达载体,经双酶切和测序鉴定,并利用分子生物学软件进行同源性比对分析。本试验结果显示获得的NSP1基因全长编码区序列为1 473bp,编码491个氨基酸,与美国WC3株同源性最高。将阳性重组质粒转入E.coli Rosetta(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析,结果表明重组蛋白分子质量约为55ku,以包涵体形式表达,可与鼠抗His-tag抗体反应。本试验成功获得牛轮状病毒UK株NSP1基因,且实现了在原核表达系统中高效表达重组蛋白,本试验结果为研究NSP1蛋白在细胞内定位与其活性之间的相互关系奠定了基础。 展开更多

关键词 牛轮状病毒UK株 NSP1 序列分析 原核表达

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齐齐哈尔地区仔猪腹泻大肠杆菌血清型与毒力基因分析 被引量：9

13

作者 陈楠楠 史同瑞 +5 位作者 尹珺伊 侯美如 王岩 秦平伟 刘宇 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2018年第6期19-23,共5页

为了解黑龙江省齐齐哈尔地区仔猪腹泻大肠杆菌的优势血清型和毒力基因流行情况,从齐齐哈尔地区40个养猪场的腹泻仔猪体内分离到100株致病性大肠杆菌,通过凝集试验和分子生物学检测方法进行血清型及毒力基因检测。血清型检测结果表明,10... 为了解黑龙江省齐齐哈尔地区仔猪腹泻大肠杆菌的优势血清型和毒力基因流行情况,从齐齐哈尔地区40个养猪场的腹泻仔猪体内分离到100株致病性大肠杆菌,通过凝集试验和分子生物学检测方法进行血清型及毒力基因检测。血清型检测结果表明,100株大肠杆菌有49个分离株鉴定出血清型,其中O8、O9、O101、O147、O157、O64为优势血清型,占定型菌株的77.55%。毒力基因PCR测定结果表明,黏附素基因987P(50/71,70.42%)、肠毒素基因LT(65/71,91.54%)、强毒力岛FyuA(43/71,60.56%)为主要流行的毒力基因。研究揭示了齐齐哈尔地区仔猪腹泻大肠杆菌的优势血清型和主要携带的毒力基因,为临床防治大肠杆菌性仔猪腹泻提供了科学依据。 展开更多

关键词 齐齐哈尔地区 猪 致病性大肠杆菌 血清型 毒力基因

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猪细小病毒感染诊断方法研究进展 被引量：4

14

作者 刘建柱 侯喜林 +2 位作者 朱战波 崔玉东 朴范泽 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期46-49,共4页

猪细小病毒感染是由猪细小病毒引起的一种病毒性传染病。其疾病的传播是由易感母猪通过胎盘传染给胎儿 ,导致母猪流产 ,产出死胎、木乃伊胎或弱子 ,给养猪业造成巨大的经济损失。为了减少该病的发生 ,广大兽医工作者建立了许多用于检测... 猪细小病毒感染是由猪细小病毒引起的一种病毒性传染病。其疾病的传播是由易感母猪通过胎盘传染给胎儿 ,导致母猪流产 ,产出死胎、木乃伊胎或弱子 ,给养猪业造成巨大的经济损失。为了减少该病的发生 ,广大兽医工作者建立了许多用于检测和诊断该病的方法 ,如病毒分离培养、对流免疫电泳试验、血清中和试验、酶联免疫吸附试验、银加强胶体金技术及聚合酶链反应等。 展开更多

关键词 猪细小病毒 诊断方法

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黑龙江某牛场腹泻犊牛大肠杆菌致病株分离鉴定及耐药性和耐药基因检测 被引量：8

15

作者 岳山 刘宇 +9 位作者 刘通 周金玲 王华欣 赵静虎 何泊宁 刘珊珊 张世勋 王天 刘增禄 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第6期79-82,共4页

为了解黑龙江省绥化市某规模化奶牛场腹泻犊牛大肠杆菌分离株的耐药性及耐药基因携带情况,在2016年4月,收集该牛场群发腹泻犊牛的8份粪便,通过细菌分离鉴定,生化实验等鉴定方法,确定牛群腹泻的病因为大肠杆菌感染。结果显示对氟苯尼考,... 为了解黑龙江省绥化市某规模化奶牛场腹泻犊牛大肠杆菌分离株的耐药性及耐药基因携带情况,在2016年4月,收集该牛场群发腹泻犊牛的8份粪便,通过细菌分离鉴定,生化实验等鉴定方法,确定牛群腹泻的病因为大肠杆菌感染。结果显示对氟苯尼考,多粘菌素B高度敏感,对青霉素具有较强的耐药性,耐药率达100%,其四环素、环丙沙星、恩诺沙星耐药率达75%;应用PCR方法检测大肠杆菌耐药基因,共检出5种耐药基因,分别为bla TEM、tet A、Sul2、aac(3)-Ⅱ、Par C。表明该牛场大肠杆菌分离株的耐药现象特别严重,提示该养殖场应合理使用抗生素。 展开更多

关键词 犊牛 大肠杆菌 药敏试验 PCR 耐药基因

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牛产气荚膜梭菌黑龙江分离株的分型鉴定 被引量：7

16

作者 王华欣 刘宇 +9 位作者 赵静虎 刘通 周金玲 岳山 何泊宁 刘珊珊 张世勋 王天 刘增禄 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第6期89-91,96,共4页

为了对三株未知型牛源产气荚膜梭菌(Clostridium Perfringens,Cl.perfringens)进行基因分型鉴定,将三株未知型菌株进行厌氧培养、纯化,观察培养特性,进行革兰氏染色镜检以及生化管鉴定,根据产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因以及产气... 为了对三株未知型牛源产气荚膜梭菌(Clostridium Perfringens,Cl.perfringens)进行基因分型鉴定,将三株未知型菌株进行厌氧培养、纯化,观察培养特性,进行革兰氏染色镜检以及生化管鉴定,根据产气荚膜梭菌α、β、ε和ι毒素基因以及产气荚膜梭菌16S r RNA保守基因分别合成5对引物,建立PCR方法。经培养特性、革兰氏染色镜检、生化特性以及16S r RNA保守基因细菌PCR鉴定均符合产气荚膜梭菌,PCR结果表明,三株产气荚膜梭菌均为A型。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 16S RRNA PCR 基因分型

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牛产气荚膜梭菌分离株毒素基因的检测与分析 被引量：7

17

作者 刘增禄 赫鸣睿 +10 位作者 周金玲 何泊宁 王天 赵尚琪 王丽 张世勋 刘珊珊 岳山 刘通 刘宇 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第4期21-27,共7页

为了解黑龙江省牛源产气荚膜梭菌分离株的基因型,检测β2和CPE两种次要毒素因子在牛源产气荚膜梭菌分离株中的携带情况。通过PCR方法检测了产气荚膜梭菌13个野毒株的cpa、cpb、etx、itx四种分型毒素、cpb2、cpb2的两个等位基因突变体(at... 为了解黑龙江省牛源产气荚膜梭菌分离株的基因型,检测β2和CPE两种次要毒素因子在牛源产气荚膜梭菌分离株中的携带情况。通过PCR方法检测了产气荚膜梭菌13个野毒株的cpa、cpb、etx、itx四种分型毒素、cpb2、cpb2的两个等位基因突变体(atypical cpb2和consensus cpb2)及肠毒素(cpe)基因。结果表明:92.3%(12/13)的产气荚膜梭菌分离株为A型,检测到1株D型;A型菌中β2毒素基因检出率为66.7%(8/12);β2毒素基因阳性菌株中75%(6/8)携带非典型cpb2基因,50%(4/8)携带典型cpb2基因,非典型突变体占优势。动物致病性试验发现β2毒素阳性菌株(8株)与β2毒素基因阴性菌株(4株)各有2株分离株具有致病性。所有菌株CPE毒素基因PCR检测均为阴性。研究为产气荚膜梭菌病的发病机理和疫苗开发提供了理论依据。 展开更多

关键词 牛 产气荚膜梭菌 β2毒素 CPE毒素 致病性

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猪用复合微生态制剂制备及保存期内活菌数研究 被引量：6

18

作者 张军 刘宇 +1 位作者 朱战波 杨焕民 《黑龙江八一农垦大学学报》 2011年第1期63-65,87,共4页

为了确定两种猪肠道益生菌的固体发酵效果,以及复合微生态制剂在不同保存条件下的活菌数变化。对猪肠道益生菌干酪乳杆菌、罗伊氏乳酸杆菌进行固体发酵,测定其活菌数,然后按照一定比例将两种益生菌与液体发酵的纳豆芽孢杆菌冻干菌粉混... 为了确定两种猪肠道益生菌的固体发酵效果,以及复合微生态制剂在不同保存条件下的活菌数变化。对猪肠道益生菌干酪乳杆菌、罗伊氏乳酸杆菌进行固体发酵,测定其活菌数,然后按照一定比例将两种益生菌与液体发酵的纳豆芽孢杆菌冻干菌粉混合制成复合微生态制剂;测定该制剂在4℃和室温保存状态下14 d内及半年内益生菌活菌数量的变化。保存14 d内的微生态制剂,室温条件下活菌数先增加后逐渐减少,而4℃保存的制剂活菌数缓慢减少。室温保存状态下的微生态制剂活菌数半年内迅速减少,4℃保存的微生态制剂益生菌死亡的速度比室温保存的略微缓慢,但差异不显著(p>0.05)。半年后对4℃和室温保存状态下保存的益生菌活菌数计数结果分别为1.3×109CFU.g-11、.5×109CFU.g-1,微生态制剂活菌数仍能超过3×108CFU.g-1,可以继续使用。研究表明复合微生态制剂中的乳酸菌在4℃和室温条件下均能保存活性半年以上。 展开更多

关键词 猪 微生态制剂 干酪乳杆菌 罗伊氏乳酸杆菌 纳豆芽孢杆菌 保存期

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气肿疽梭菌HLJ-1株分离鉴定及系统进化分析 被引量：6

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作者 周金玲 吴丹丹 +2 位作者 周玉龙 朱战波 朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第6期83-88,共6页

2015年6月,内蒙古某牛场爆发疑似气肿疽疫病,为了有效防控该病,无菌采集炎性气肿的肌肉进行需氧和厌氧菌的分离鉴定和药敏试验,结果在厌氧条件下从患病牛肌肉内分离出无荚膜,革兰氏染色呈阳性两端钝圆的杆菌。经表型特征和生化鉴定表明... 2015年6月,内蒙古某牛场爆发疑似气肿疽疫病,为了有效防控该病,无菌采集炎性气肿的肌肉进行需氧和厌氧菌的分离鉴定和药敏试验,结果在厌氧条件下从患病牛肌肉内分离出无荚膜,革兰氏染色呈阳性两端钝圆的杆菌。经表型特征和生化鉴定表明分离菌株与气肿疽梭菌相符,进一步对16S rDNA通用引物扩增得到的基因测序结果分析表明,其与气肿疽梭菌株同源性最高达95.8%,毒素检测表明含有α毒素。以上结果证明该菌株为气肿疽梭菌。分离菌株对蒽诺沙星、环丙沙星等药物高度敏感。为该病的防制提供了理论依据和物质基础。 展开更多

关键词 牛 气肿疽梭菌 分离 鉴定

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黑龙江某规模化场奶牛急性乳房炎病原分离鉴定与药敏实验 被引量：6

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作者 刘通 刘宇 +9 位作者 赵静虎 王华欣 周金玲 岳山 何泊宁 刘珊珊 张世勋 王天 刘增禄 朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第6期65-68,共4页

2016年5月,黑龙江省某规模化牛场爆发急性乳房炎,为确诊其病因,无菌采取10份乳样进行细菌的分离鉴定,并对分离菌株进行培养特性检查、生化试验鉴定和药敏试验。经检查10份乳样中大肠杆菌单独感染1例,葡萄球菌单独感染1例,链球菌单独感染... 2016年5月,黑龙江省某规模化牛场爆发急性乳房炎,为确诊其病因,无菌采取10份乳样进行细菌的分离鉴定,并对分离菌株进行培养特性检查、生化试验鉴定和药敏试验。经检查10份乳样中大肠杆菌单独感染1例,葡萄球菌单独感染1例,链球菌单独感染1例,葡萄球菌和链球菌混合感染4例,葡萄球菌和酵母菌混合感染2例。该研究为该牛场奶牛乳房炎的病因分析和防治提供了指导。 展开更多

关键词 奶牛乳房炎 细菌分离鉴定 药敏试验

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