重楼叶多糖改善D-半乳糖衰老模型小鼠脾脏免疫功能和抗氧化能力 被引量：20

1

作者 刘功成 王作伟 +4 位作者 李亭亭 杜金莹 杜小刚 曹晓涵 曾宪垠 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第16期366-369,383,共5页

采用D-半乳糖注射诱导衰老模型,探讨了重楼叶多糖(PPLPs)对小鼠脾脏免疫功能和抗氧化的影响。分别对小鼠D-半乳糖、D-半乳糖和PPLPs、D-半乳糖和VC以及生理盐水处理,持续42 d。结果显示:与模型组相比,灌胃PPLPs或VC均能显著增加小鼠脾... 采用D-半乳糖注射诱导衰老模型,探讨了重楼叶多糖(PPLPs)对小鼠脾脏免疫功能和抗氧化的影响。分别对小鼠D-半乳糖、D-半乳糖和PPLPs、D-半乳糖和VC以及生理盐水处理,持续42 d。结果显示:与模型组相比,灌胃PPLPs或VC均能显著增加小鼠脾脏指数(p<0.05),显著上调脾脏免疫相关基因(T-bet、GATA、IFN-γ、IL-2、TNF-α、IL-4和IL-10)m RNA表达水平(p<0.05),也显著增强了脾脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu Zn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性(p<0.05);同时,灌胃PPLPs或VC显著降低了脾脏丙二醛(MDA)含量(p<0.05)。结果表明,PPLPs可增强脾脏免疫功能并提高小鼠的抗氧化活性。 展开更多

关键词 重楼多糖 衰老 免疫 抗氧化 脾脏

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小尾寒羊黄体期和卵泡期生殖轴凋亡基因的表达研究及其与发情的关系 被引量：7

2

作者 曹晓涵 刘秋月 +6 位作者 王翔宇 狄冉 胡文萍 张效生 张金龙 曾宪垠 储明星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2091-2097,共7页

旨在分析Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL基因在小尾寒羊黄体期和卵泡期下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异,并探究这些基因与绵羊常年发情性状的关系。以常年发情小尾寒羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术,对比分析了Bad... 旨在分析Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL基因在小尾寒羊黄体期和卵泡期下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达差异,并探究这些基因与绵羊常年发情性状的关系。以常年发情小尾寒羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术,对比分析了Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL4个基因在不同繁殖状态下(黄体期和卵泡期)小尾寒羊下丘脑-垂体-性腺轴各组织中的表达特征,采用放射免疫法(RIA)检测相应时期血清雌二醇和孕酮含量。结果表明,Bad、Bax、Bcl-2和Bcl-xL4个基因在下丘脑、垂体、卵巢均有表达,Bad和Bcl-2在黄体期的垂体和卵巢中的表达量均显著高于卵泡期(P<0.05),在下丘脑中2个时期表达量都没有显著差异(P>0.05);Bax和Bcl-xL在黄体期下丘脑、垂体和卵巢中的表达量与卵泡期均无显著差异(P>0.05)。黄体期血清中孕酮含量显著高于卵泡期(P<0.05),而2个时期血清中雌二醇含量没有显著差异(P>0.05)。Bad和Bcl-2基因在小尾寒羊黄体期和卵泡期的垂体和卵巢中差异表达,可能参与调控黄体期到卵泡期的发情状态转换,从而启动小尾寒羊发情。 展开更多

关键词 绵羊 凋亡相关基因 生殖轴 组织表达 发情

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GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑GnRH合成及性腺反馈系统的影响 被引量：5

3

作者 韩兴发 曹晓涵 +2 位作者 杜小刚 宋天增 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期562-569,共8页

探讨GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑GnRH合成及性腺反馈系统的影响。36只SD雄鼠随机分为免疫组、手术去势组及对照组,免疫组于12周龄时初免,8周后加免。放免法测定血清抗体滴度、激素浓度及下丘脑正中隆起GnRH含量,实时荧光定量PCR分析下... 探讨GnRH主动免疫对SD雄鼠下丘脑GnRH合成及性腺反馈系统的影响。36只SD雄鼠随机分为免疫组、手术去势组及对照组,免疫组于12周龄时初免,8周后加免。放免法测定血清抗体滴度、激素浓度及下丘脑正中隆起GnRH含量,实时荧光定量PCR分析下丘脑生殖相关基因mRNA的变化。结果显示,GnRH主动免疫后12只免疫鼠中11只血清GnRH抗体滴度显著升高,血清LH、FSH及T浓度显著降低(P<0.05),睾丸严重萎缩(免疫去势鼠)。与对照鼠相比,免疫去势显著降低下丘脑GnRH含量(P<0.01),且显著下调下丘脑雌激素α受体(ERα)、雄激素受体(AR)、Kiss-1、GPR54及GnRH的mRNA表达水平(P<0.05)。手术去势鼠除血清LH、FSH浓度及下丘脑ERα的mRAN表达水平显著高于对照鼠外(P<0.05),其余指标均与免疫去势鼠类似。结果首次表明,GnRH主动免疫抑制性腺负反馈调节作用及降低了下丘脑GnRH的合成。 展开更多

关键词 GNRH 主动免疫 下丘脑 性腺负反馈系统 mRNA 大鼠

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猪繁殖与呼吸综合征病毒的危害及免疫策略 被引量：14

4

作者 王振华 曹晓涵 +2 位作者 宋禾 王迪 曾宪垠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期239-244,共6页

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)一直是危害世界养猪业较严重的疾病,给世界养猪业造成巨大经济损失。其病毒感染机理、抗体依赖性增强(ADE)作用及高度变异性使目前的商品化疫苗存在着缺陷,不... 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)一直是危害世界养猪业较严重的疾病,给世界养猪业造成巨大经济损失。其病毒感染机理、抗体依赖性增强(ADE)作用及高度变异性使目前的商品化疫苗存在着缺陷,不能完全阻止经呼吸系统及胎盘传播猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)。鉴于此,应结合PRRSV的致病特点、免疫特性及生物学特性探索性地设计新型疫苗,对预防该病具有重要意义。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 危害 免疫

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20种川产道地药材对番茄灰霉菌的抑制作用研究 被引量：5

5

作者 刘铁秋 孙雪丹 +3 位作者 何苗 罗友 卢勇 曾宪垠 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期114-119,共6页

通过使用无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷、石油醚和水6种溶剂对20种具有抑菌潜力的川产道地药材活性物质进行提取,以番茄灰霉病菌为供试菌,采用菌丝生长速率法研究其抑菌效果,通过系统研究川产道地药材提取物抑菌效果,在扩充中药... 通过使用无水乙醇、乙酸乙酯、丙酮、三氯甲烷、石油醚和水6种溶剂对20种具有抑菌潜力的川产道地药材活性物质进行提取,以番茄灰霉病菌为供试菌,采用菌丝生长速率法研究其抑菌效果,通过系统研究川产道地药材提取物抑菌效果,在扩充中药材抑菌实验理论数据的基础上,为进一步研发中药杀菌剂提供基础参考。结果表明,在供试浓度为0.1g/mL条件下,乙醇提取物中黄柏、川射干、花椒、黄连、石菖蒲、大黄、川乌抑菌率为100%;乙酸乙酯提取物中川射干、黄连、桔梗、石菖蒲、使君子、川乌抑菌率为100%;三氯甲烷提取物中续断、金银花抑菌率为100%;丙酮提取物中石菖蒲抑菌率为100%;石油醚和水提液抑菌率均小于80%。 展开更多

关键词 川产道地药材 提取物 番茄灰霉菌 抑菌

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GnRH主动免疫雌性大鼠调控机制研究 被引量：2

6

作者 曹晓涵 韩兴发 +4 位作者 杜小刚 陈志渝 孟风艳 储明星 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期502-508,共7页

旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清... 旨在探讨GnRH主动免疫雌性SD大鼠的调控机制。24只雌性SD大鼠随机分为免疫组、卵巢切除组和空白对照组(n=8),免疫组于12周龄注射疫苗,4周后加免;卵巢切除组11周龄外科手术摘除卵巢;空白对照组不作任何处理。使用放射免疫分析法测定血清激素E2、P4、FSH和LH含量,荧光定量PCR分析各基因mRNA表达情况。结果显示,主动免疫显著降低血清E2、P4、FSH和LH含量,至56周处死时,E2和LH含量有微弱上升,但4种激素含量均显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组相比,主动免疫显著下调下丘脑GPR54、KiSS-1、GnRH和ER-αmRNA,垂体GnRH-R、FSH-β和LH-βmRNA以及卵巢FSHR、LHR和ER-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结果表明,GnRH主动免疫能显著抑制雌性SD大鼠性腺发育,降低血清性激素含量,通过下丘脑ER-αmRNA-GPR54/KiSS-1通路保持动物较长时间去势;但GnRH主动免疫造成的动物去势存在恢复的可能。 展开更多

关键词 GNRH 主动免疫 调控 机制 雌性大鼠

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抑制素主动免疫对大鼠生殖激素及卵巢发育的影响:Montanide和Freund’s佐剂效应比较 被引量：1

7

作者 曹晓涵 王振华 +3 位作者 韩兴发 朱时雅 张福刚 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期558-563,共6页

本研究采用新疆细毛羊抑制素成熟区序列重组融合蛋白(roINH)作为免疫原,以Montanide(MON)和Freund’s(FA)作为佐剂,主动免疫SD大鼠,测定生殖激素及卵巢发育情况,评价佐剂效应。选用72只9～10周龄性成熟雌性SD大鼠,随机分为3组,分别皮下... 本研究采用新疆细毛羊抑制素成熟区序列重组融合蛋白(roINH)作为免疫原,以Montanide(MON)和Freund’s(FA)作为佐剂,主动免疫SD大鼠,测定生殖激素及卵巢发育情况,评价佐剂效应。选用72只9～10周龄性成熟雌性SD大鼠,随机分为3组,分别皮下注射生理盐水(对照组)、roINH+MON(MON组)和roINH+FA(FA组)。各组大鼠每20d免疫1次,连续免疫3次。结果,MON组产生的抗体滴度显著高于FA组(P<0.05);与对照组相比,注射roINH+MON和roINH+FA均可极显著提高大鼠血清FSH平均含量(P<0.01),显著提高P峰值(P<0.05),而FSH及P平均含量及峰值在2个免疫组间无显著差异(P>0.05);LH含量和峰值在2个试验组间无显著差异(P>0.05);MON和FA组成熟卵泡数无显著差异(P>0.05),但均显著高于对照组(P<0.05);MON组脓包直径及炎症反应小于FA组。结果表明,应用roINH作为免疫原并配以MON或FA佐剂免疫大鼠均能取得较好的免疫效果,且MON佐剂炎症反应小于FA佐剂。 展开更多

关键词 抑制素 主动免疫 佐剂 抗体 卵巢发育

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新疆细毛羊抑制素α亚基cDNA的克隆、序列分析与表达 被引量：1

8

作者 张成云 吴志焕 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期15-19,共5页

根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得了约812 bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩... 根据GenBank上登录的绵羊抑制素α亚基基因序列,设计合成2对引物,以新疆细毛羊卵巢提取的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增获得了约812 bp片段,经pMD18-T载体克隆和测序分析证实为新疆细毛羊抑制素α亚基前体基因。进一步通过PCR反应扩增新疆细毛羊INHα亚基基因片段,经过NcoⅠ和HindⅢ双酶切后定向克隆于pET32a原核表达载体,获得pET-INH重组表达载体。将携带有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol.L-1IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大约为32 ku,与预期表达蛋白大小一致。Western blot检测表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。新疆细毛羊抑制素α亚基基因的克隆、表达为进一步研究其功能和应用奠定了基础。 展开更多

关键词 新疆细毛羊 抑制素α亚基 基因克隆 表达

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GnRH免疫对肉牛去势效果及生产性能的影响 被引量：2

9

作者 徐贤坤 曾宪垠 《动物科学与动物医学》 2004年第7期37-38,共2页

本文综述了GnRH免疫的作用机理及其在肉牛免疫去势和生产性能影响方面的研究进展,并展望了该项技术在国内肉牛畜牧业发展方面的应用前景。

关键词 GNRH 免疫去势 肉牛

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油茶籽壳提取物抗氧化及抗癌活性研究 被引量：24

10

作者 淦永鉴 李旭 +5 位作者 杨莉琳 丁春邦 曾宪垠 张怀渝 陈志渝 杜小刚 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期171-174,182,共5页

目的：观察油茶籽壳不同溶剂提取物（乙酸乙酯、正丁醇、氯仿、水）体外抗氧化和抗肿瘤活性。方法：采用Folin-Ciocalteu和三氯化铝方法检测总酚及总黄酮含量;采用DPPH法和邻二氮菲-Fe2＋氧化法测抗氧化活性;采用CCK-8法测细胞的活性。... 目的：观察油茶籽壳不同溶剂提取物（乙酸乙酯、正丁醇、氯仿、水）体外抗氧化和抗肿瘤活性。方法：采用Folin-Ciocalteu和三氯化铝方法检测总酚及总黄酮含量;采用DPPH法和邻二氮菲-Fe2＋氧化法测抗氧化活性;采用CCK-8法测细胞的活性。结果：油茶籽壳乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、氯仿提取物、水提取物总酚含量分别为79.25±4.552、51.81±3.651、2.762±0.523、19.73±1.191mg/g;总黄酮含量分别为26.73±0.613、15.63±1.126、13.16±0.672、5.734±0.761mg/g;油茶籽壳乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、氯仿提取物、水提取物在15.625~250μg/m L范围内体外抗氧化活性均具有剂量依赖性;对Hep G2细胞增殖抑制作用在62.5~250μg/m L范围内均具有剂量依赖性。结论：体外抗氧化活性和抗肿瘤活性强弱均表现为乙酸乙酯提取物〉正丁醇提取物〉水提取物〉氯仿提取物,其中乙酸乙酯是油茶籽壳提取的有效溶剂。 展开更多

关键词 油茶籽壳 提取物 抗氧化活性 抗肿瘤活性

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BSA在不同形貌氧化锌材料上的吸附热力学 被引量：2

11

作者 刘小霞 邓浩 +5 位作者 王妍媖 鲁志伟 曾宪垠 王显祥 邹平 饶含兵 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2156-2163,共8页

采用高分子模板法合成了4种不同形貌的ZnO,分别为球状颗粒(ZnO NPs)、针状(ZnO NRs)、片状(ZnO NSs)和棒状(ZnO NBs).利用X射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和能谱仪(EDS)对产物进行了表征.通过傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)和圆二... 采用高分子模板法合成了4种不同形貌的ZnO,分别为球状颗粒(ZnO NPs)、针状(ZnO NRs)、片状(ZnO NSs)和棒状(ZnO NBs).利用X射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和能谱仪(EDS)对产物进行了表征.通过傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)和圆二色光谱仪(CD)研究了小牛血清白蛋白(BSA)在不同形貌ZnO上的等温吸附规律、吸附热力学和吸附作用机理.结果表明,4种不同形貌的ZnO对BSA的吸附均较好地符合Langmuir等温吸附模型;吸附量随温度的升高略有增加;从热力学参数(ΔG,ΔH,ΔS)可知,吸附反应为自发进行的吸热反应,作用机理主要为氢键和静电作用.从热力学角度,针状的ZnO更有利于BSA的吸附. 展开更多

关键词 氧化锌 小牛血清白蛋白 形貌 吸附热力学

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疫苗佐剂胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸的研究进展 被引量：3

12

作者 王亚丽 王振华 曾宪垠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期49-52,共4页

胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸(cytosine phosphate guanidine oligodeoxynucleotide,CpG ODN)是指含有非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心序列的核苷酸序列,近年来,CpG ODN作为一种新型免疫佐剂的研究越来越多,可诱发机体产生多种免... 胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸(cytosine phosphate guanidine oligodeoxynucleotide,CpG ODN)是指含有非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心序列的核苷酸序列,近年来,CpG ODN作为一种新型免疫佐剂的研究越来越多,可诱发机体产生多种免疫学效应,提高系统免疫和黏膜免疫水平,具有安全性高,耐受性强等特点。 展开更多

关键词 CPGODN 佐剂 系统免疫 黏膜免疫

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GnRH免疫去势调控绵羊下丘脑-垂体-肌肉生长轴机制的研究进展 被引量：1

13

作者 宋天增 赵旺生 +4 位作者 陈晓英 张明 曾宪垠 刘桂琼 姜勋平 《中国草食动物科学》 CAS 2023年第3期57-60,84,共5页

促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽神经激素,在哺乳动物生殖活动中起着重要的调节作用。GnRH免疫去势是利用外源性GnRH刺激动物机体产生大量的GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡失调,改变下丘脑-垂体-性腺轴间的正常反... 促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽神经激素,在哺乳动物生殖活动中起着重要的调节作用。GnRH免疫去势是利用外源性GnRH刺激动物机体产生大量的GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡失调,改变下丘脑-垂体-性腺轴间的正常反馈调节关系,减少生殖激素的合成与释放,从而达到免疫去势的目的。文章综述了GnRH免疫对动物生殖轴的影响,动物下丘脑-垂体-肌肉/骨骼生长轴的调控过程,对动物生长的影响和T(睾酮)对动物生殖、生长的影响,以期为进一步研究GnRH免疫去势调控绵羊下丘脑-垂体-肌肉生长轴的机制提供参考。 展开更多

关键词 绵羊 下丘脑-垂体-肌肉生长轴 免疫去势 促性腺激素释放激素

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GnRH主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响

14

作者 随芬芬 韩兴发 +4 位作者 曹晓涵 杜小刚 孟风艳 储明星 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1140-1146,共7页

旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血... 旨在探讨促性腺激素释放激素(Gonadotropin releasing hormone,GnRH)主动免疫对公猪体内粪臭素代谢的影响。36只公猪随机分为免疫组(10周龄时初免,18周龄加免)、手术去势组(1周龄外科阉割)及完整对照组(不作任何处理)。应用ELISA检测血清中睾酮、雌二醇及雄烯酮含量,采用高效液相色谱检测脂肪中粪臭素、雄烯酮和血液中雄烯酮含量,荧光定量PCR检测肝中粪臭素代谢相关基因mRNA表达量,ELISA检测肝中粪臭素代谢相关蛋白表达。结果显示,GnRH主动免疫后,血清睾酮浓度显著下降(P<0.05),睾丸严重萎缩。免疫组和手术组公猪血清中睾酮、雌二醇、雄烯酮浓度和脂肪中粪臭素、雄烯酮含量相似(P>0.05),均显著低于对照组(P<0.05)。免疫组公猪肝中CAR、COUP-TF1、CYP2E1、CYB5A、CYP2C49、GSTO2mRNA表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2A19mRNA表达量手术组显著高于免疫组(P<0.05),免疫组显著高于对照组(P<0.05);而PXR、SULT1A1mRNA表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。免疫组公猪肝中CYP2A19、CYP2C49和GSTO2蛋白表达变化与手术组相似(P>0.05),均显著高于对照组(P<0.05);CYP2E1和CYB5A蛋白表达量在手术组最高,对照组最低,免疫组介于两组之间,与两组均有显著性差异(P<0.05);而SULT1A1蛋白表达量在3组间无明显差异(P>0.05)。综上表明,GnRH主动免疫降低公猪血清中睾酮、雌二醇和雄烯酮含量,上调肝CYP450s和GSTO2基因和蛋白表达,加速粪臭素在肝中的代谢,从而降低公猪膻味。 展开更多

关键词 GnRH主动免疫 肝 粪臭素代谢 公猪膻味

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SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究 被引量：3

15

作者 韩兴发 李俊丽 +2 位作者 曹晓涵 储明星 曾宪垠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期738-749,共12页

旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单... 旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果。本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法。以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元。将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原П(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA)。试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组)。将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型GnRH蛋白100μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠。放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应。2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B (INHB)浓度(P<0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnRHR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P<0.05)。3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75%)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P<0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P<0.05),精子发生受到明显抑制(P<0.05)。综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题。本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考。 展开更多

关键词 GNRH 新蛋白构型 免疫去势 大鼠

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RNA干扰及其在动物繁殖中的应用

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作者 吴志焕 付秀芬 曾宪垠 《黑龙江动物繁殖》 2008年第4期9-12,共4页

RNA干扰(RNAi)是由短的双链RNA降解内源的同源mRNA而引发的转录后基因沉默现象。RNAi作为一种调控特定基因表达的工具,被称为基因组的免疫现象,已成为当前繁殖领域的研究热点之一。该文就RNAi的发现、RNAi的过程及其在动物繁殖中的应用... RNA干扰(RNAi)是由短的双链RNA降解内源的同源mRNA而引发的转录后基因沉默现象。RNAi作为一种调控特定基因表达的工具,被称为基因组的免疫现象,已成为当前繁殖领域的研究热点之一。该文就RNAi的发现、RNAi的过程及其在动物繁殖中的应用等方面的研究进展作一概述。 展开更多

关键词 RNA干扰 基因 动物繁殖

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