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三品系小型猪35个微卫星基因座的遗传学研究 被引量：45
1
作者 商海涛 牛荣 +4 位作者 魏泓 黄中波 甘世祥 王爱德 曾养志 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期17-20,共4页
利用 35个微卫星基因座对中国三个品系的小型猪 (贵州小型香猪、广西巴马小型猪、版纳小耳猪近交系 )进行了遗传检测。计算出三个小型猪品系个体样本在 35个微卫星基因座的纯合率 ,并对其进行t检验。计算出各品系的平均杂合度 ,多态信... 利用 35个微卫星基因座对中国三个品系的小型猪 (贵州小型香猪、广西巴马小型猪、版纳小耳猪近交系 )进行了遗传检测。计算出三个小型猪品系个体样本在 35个微卫星基因座的纯合率 ,并对其进行t检验。计算出各品系的平均杂合度 ,多态信息含量 (PIC)及品系间的遗传距离 ,并进行了系统聚类。结果表明三个品系的小型猪其基因纯合率均较高 ,其中版纳小耳猪近交系的基因纯合率最高 ;PIC和平均杂合度均较低 ;贵州小型香猪和广西巴马小型猪亲缘关系较近 ,并均与版纳小耳猪近交系的亲缘关系略远。 展开更多
关键词 小型猪 微卫星 亲缘关系 遗传学
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微卫星PCR聚丙烯酰胺凝胶银染法影响因素的分析研究 被引量：23
2
作者 霍金龙 曾嵘 +5 位作者 潘伟荣 张娟 罗古月 牛自兵 何飞 曾养志 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第1期11-15,共5页
微卫星PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的DNA检测方法。此法分离小于500bP的DNA片段效果很好,分辨率极高,只相差1bp的片段也能分开,且可容纳相对大量的DNA。再结合银染法使该方法得到了广大科研工作着的青睐,本研究通过多方面摸索... 微卫星PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的DNA检测方法。此法分离小于500bP的DNA片段效果很好,分辨率极高,只相差1bp的片段也能分开,且可容纳相对大量的DNA。再结合银染法使该方法得到了广大科研工作着的青睐,本研究通过多方面摸索对该方法进行了总结和改良。 展开更多
关键词 微卫星 聚合酶链式反应(PCR) 聚丙烯酰胺凝胶 银染
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五种品系猪亲缘关系的RAPD分析 被引量：16
3
作者 吴开平 吴丰春 +3 位作者 魏泓 王爱德 甘世祥 曾养志 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期217-220,共4页
应用190个RAPD引物对贵州小型猪,巴马小型猪、西双版纳近交系小耳猪JB和JS亚系、荣昌猪Ⅰ系、长白猪的亲缘关系进行了初步分析,其中39个引物的扩增结果具有非常明显的品系间多态性,将其扩增结果以RAPDistancepackageVersion1 04程序进... 应用190个RAPD引物对贵州小型猪,巴马小型猪、西双版纳近交系小耳猪JB和JS亚系、荣昌猪Ⅰ系、长白猪的亲缘关系进行了初步分析,其中39个引物的扩增结果具有非常明显的品系间多态性,将其扩增结果以RAPDistancepackageVersion1 04程序进行分析,计算相对遗传距离指数1 -F,再用NJ法进行聚类分析,构建系统树。结果表明,三种小型猪相互间亲缘关系较近,尤以贵州小型猪与巴马小型猪更近。荣昌猪Ⅰ系和长白猪关系较近,但与小型猪关系较远。 展开更多
关键词 随机扩增多态DNA 小型猪 亲缘关系 RAPD
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成年版纳微型猪近交系克隆猪的制备 被引量：11
4
作者 叶雷 李红 +13 位作者 魏红江 许成盛 卿玉波 潘伟荣 李鸿辉 成文敏 富国文 信吉阁 李思 魏太云 李小兵 张崇义 汪霞 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1491-1498,共8页
本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细... 本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 成年猪成纤维细胞 细胞培养 生物学特征 体细胞核移植
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中国三种实验用小型猪线粒体DNA D-loop多态性分析(英文) 被引量：8
5
作者 刘中禄 魏泓 +2 位作者 曾养志 王爱德 甘世祥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期123-127,共5页
分析中国三种实验用小型猪线粒体DNA （mtDNA）D-loop的多态性，建立各品种品系猪的遗传标记，为各品种、品系猪的鉴别提供依据。应用PCR技术分别对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪和长白猪的血液总DNA样品中mtDNA ... 分析中国三种实验用小型猪线粒体DNA （mtDNA）D-loop的多态性，建立各品种品系猪的遗传标记，为各品种、品系猪的鉴别提供依据。应用PCR技术分别对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪和长白猪的血液总DNA样品中mtDNA Dloop进行扩增，用23种限制性内切酶消化，观察其酶切多态。PCR扩增其mtDNA Dloop 5′端227bp高变区域，应用PCR–SSCP和PCR直接测序分析，观察其单链构象多态和序列多态。结果显示：三种小型猪之间未见酶切长度多态、单链构象多态和序列多态。与长白猪之间表现出单链构象多态和序列多态。本研究认为：三种实验用小型猪之间mtDNA多态性贫乏，证明其亲源关系很近，在母系起源和进化上有一致性，应用PCR–RFLP、PCR–SSCP和PCR直接测序分析，尚不能作为三种实验用小型猪品种、品系鉴定的依据，但与长白猪等欧系猪比较有一定差异。 展开更多
关键词 小型猪 聚合酶链反应 线粒体DNA控制区 多态性
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版纳微型猪近交系133家系SLA-DQ cDNA的克隆和序列分析 被引量：15
6
作者 曾嵘 苗永旺 +2 位作者 霍金龙 潘伟荣 曾养志 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第4期215-221,共7页
目的阐明版纳微型猪近交系133家系(BMI-133)免疫相关基因及其可能在猪-人异种器官移植中的作用。方法提取外周血总RNA,通过反转录、cDNA合成及转化,最终获得了具有完整阅读框架的SLA-DQA和SLA-DQBcDNA克隆。结果序列分析表明,所获得的DQ... 目的阐明版纳微型猪近交系133家系(BMI-133)免疫相关基因及其可能在猪-人异种器官移植中的作用。方法提取外周血总RNA,通过反转录、cDNA合成及转化,最终获得了具有完整阅读框架的SLA-DQA和SLA-DQBcDNA克隆。结果序列分析表明,所获得的DQAcDNA长度为830bp,编码255个氨基酸残基;DQBcDNA长度为1103bp,编码262个氨基酸残基。结论和其他已报道的小型猪比较,本研究克隆的序列无论在核苷酸还是氨基酸水平上都与之存在差异,由此确定这是BMI-133的两个特有的新等位基因。另外,通过与人的相应序列对比发现,BMI-133与人类相应基因相比具有较高的同源性。随着研究的深入,BMI-133家系极有可能成为供异种器官移植的专用近交系猪群。 展开更多
关键词 版纳微型猪 近交系 主要组织相容性复合物 SLA—DQ基因
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西双版纳小耳猪群体遗传结构的RFLP分析 被引量：9
7
作者 陈丙波 周建华 +1 位作者 魏泓 曾养志 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第1期15-19,共5页
目的　对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法　采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记浕 -珠蛋白 - 3’HVR多基因座小卫星探针 ,对西双版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获... 目的　对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法　采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记浕 -珠蛋白 - 3’HVR多基因座小卫星探针 ,对西双版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。结果　 2kb以上的谱带数在 6～ 1 5条之间 ,HinfⅠ酶切产生的图带数低于HaeⅢ。JB亚系内 80 5、 80 7家系和JS亚系内 1 1 1、 1 2 1、1 2 1、 1 51家系不同个体间的相似系数分别为 0 94± 0 0 9、 0 85± 0 0 8、 0 84± 1 7、 0 78±1 6、 0 83± 0 42、 0 87± 0 0 7,显著高于各家系间的相似系数 ,JB亚系内的 80 5家系和JS亚系内的 1 51家系不同个体间相似系数较大 ,分别为 0 94和 0 87。结论　西双版纳小耳猪近交程度较高 ,个体间差异较小 。 展开更多
关键词 家系 珠蛋白 RFLP分析 多基因 HRP 化学发光法 标记 西双版纳 猪群 相似系数
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版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的体外培养及其生物学特征研究 被引量：7
8
作者 许成盛 魏红江 +6 位作者 李红 汪霞 杨朝霞 卿玉波 潘伟荣 信吉阁 曾养志 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期323-327,共5页
试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤... 试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;细胞冻存前和复苏后存活率分别为98.0%和94.07%;生长曲线呈"S"型,倍增时间为33 h;对所制备的染色体核型分析显示2n=38(XY),并在体外培养14代后仍能保持正常核型。本研究建立了稳定的版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的培养方法,将为体细胞克隆、转基因和异种器官移植等相关的研究提供技术基础。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 成纤维细胞 细胞培养 生物学特征
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猪微卫星多态性两种检测方法的比较研究 被引量：6
9
作者 霍金龙 罗古月 +3 位作者 张娟 潘伟荣 张美 曾养志 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期314-317,共4页
为了确定一种安全、有效的检测猪微卫星多态性的实验方法,采用两种电泳和两种染色方法对大白猪基因组DNA进行了6个微卫星座位的PCR扩增,并将扩增产物在2.5%的琼脂糖凝胶上电泳,EB染色,然后又在8%的聚丙烯酰胺凝胶上电泳,AgNO3染色。结... 为了确定一种安全、有效的检测猪微卫星多态性的实验方法,采用两种电泳和两种染色方法对大白猪基因组DNA进行了6个微卫星座位的PCR扩增,并将扩增产物在2.5%的琼脂糖凝胶上电泳,EB染色,然后又在8%的聚丙烯酰胺凝胶上电泳,AgNO3染色。结果表明两种方法检测出的等位基因数目和基因多态性水平存在差异,8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳在区分微小差异片段能力上明显优于2.5%的琼脂糖凝胶电泳。 展开更多
关键词 猪 微卫星 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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EDC交联改性的脱细胞异种(猪)肌腱生物学特性研究 被引量：7
10
作者 解传飚 林月秋 +2 位作者 阮默 冷元曦 曾养志 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2010年第4期425-429,共5页
目的探讨EDC交联的脱细胞异种(猪)肌腱生物学特性,为其作为肌腱移植材料的应用研究提供依据。方法猪肌腱脱细胞后进行EDC改性处理,进行组织形态学、生物力学、体外降解性能、免疫性能和细胞相容性检测,并与新鲜肌腱、深低温冷冻肌腱和... 目的探讨EDC交联的脱细胞异种(猪)肌腱生物学特性,为其作为肌腱移植材料的应用研究提供依据。方法猪肌腱脱细胞后进行EDC改性处理,进行组织形态学、生物力学、体外降解性能、免疫性能和细胞相容性检测,并与新鲜肌腱、深低温冷冻肌腱和单纯脱细胞肌腱进行比较。结果 EDC改性的脱细胞肌腱免疫原性最低,且力学性能、体外降解特性显著优于单纯脱细胞肌腱,而与新鲜肌腱、冻存肌腱无显著性差异,各组之间的细胞相容性无显著性差异。结论 EDC改性的脱细胞肌腱具有较低的免疫原性和较好的生物学力学特性,是一种具有潜在应用价值的肌腱支架材料。 展开更多
关键词 肌腱 猪 EDC 生物学特性
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核酸疫苗的研究及应用进展 被引量：10
11
作者 李月涛 霍金龙 +1 位作者 信吉阁 曾养志 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第4期1-5,15,共6页
核酸疫苗(DNA疫苗)是20世纪90年代发展起来的一种新型疫苗。核酸疫苗不仅可引起体液免疫反应,而且能诱导高水平的细胞免疫应答,尤其是细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应,被认为在病毒、细菌、寄生虫等病原体感染的防治中具有更大的优势。核酸疫... 核酸疫苗(DNA疫苗)是20世纪90年代发展起来的一种新型疫苗。核酸疫苗不仅可引起体液免疫反应,而且能诱导高水平的细胞免疫应答,尤其是细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应,被认为在病毒、细菌、寄生虫等病原体感染的防治中具有更大的优势。核酸疫苗既可作为病毒、细菌或寄生虫的预防疫苗,也可作为非感染性疾病如肿瘤病的治疗用疫苗。 展开更多
关键词 核酸疫苗 病毒 细菌 寄生虫
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用12对微卫星引物对版纳小耳猪近交系的遗传学分析 被引量：8
12
作者 牛荣 黄中波 +1 位作者 魏泓 曾养志 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第1期42-45,共4页
目的　分析版纳小耳猪近交系种群的遗传变异及近交程度。方法　利用 12个微卫星基因座对版纳小耳猪近交系进行了遗传检测。结果　两个亚系以及各家系的聚类情况与小型猪系谱分布一致。且各家系基因纯合率均较高。结论　版纳小耳猪近交... 目的　分析版纳小耳猪近交系种群的遗传变异及近交程度。方法　利用 12个微卫星基因座对版纳小耳猪近交系进行了遗传检测。结果　两个亚系以及各家系的聚类情况与小型猪系谱分布一致。且各家系基因纯合率均较高。结论　版纳小耳猪近交系不仅分化为若干个含有不同性状的家系 ,而且也达到了一个很高的近交程度。 展开更多
关键词 小型猪 DNA 遗传学 微卫星 近交系
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版纳微型猪近交系胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特征 被引量：5
13
作者 李红 魏红江 +3 位作者 许成盛 汪霞 卿玉波 曾养志 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期678-682,共5页
以版纳微型猪近交系妊娠47d的胎儿为材料,采用胰蛋白酶消化法消化培养胎儿成纤维细胞,对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测.结果表明,培养的版纳微型猪近交系胎儿成纤... 以版纳微型猪近交系妊娠47d的胎儿为材料,采用胰蛋白酶消化法消化培养胎儿成纤维细胞,对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测.结果表明,培养的版纳微型猪近交系胎儿成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;细胞冻存前和复苏后的存活率分别为98.06%和92.12%;生长曲线呈"S"形,倍增时间为36h;对所制备染色体核型进行分析,显示2n=38,XY,并在体外培养14个代次后仍能保持正常核型. 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 胎儿成纤维细胞 细胞培养 生物学特征
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中国版纳近交系小型猪心脏异种抗原表位α1,3-Gal的分布 被引量：3
14
作者 张伟 应大君 +2 位作者 朱楚洪 曾养志 宋林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期258-260,共3页
目的　研究中国版纳小型猪心脏的异种抗原α1,3 Gal的分布和半定量分析 ,为小型猪心脏的转基因和异种移植提供资料。方法　通过亲和免疫组织化学法和图像分析对 10头版纳小型猪心脏进行α1,3 Gal的分布和半定量研究。结果　α1,3 Ga... 目的　研究中国版纳小型猪心脏的异种抗原α1,3 Gal的分布和半定量分析 ,为小型猪心脏的转基因和异种移植提供资料。方法　通过亲和免疫组织化学法和图像分析对 10头版纳小型猪心脏进行α1,3 Gal的分布和半定量研究。结果　α1,3 Gal主要分布于细胞膜 ,细胞浆也有少量表达 ,胞核无表达。在小型猪心内膜、心肌间质、心外膜、神经束膜等处有α1,3 Gal分布 ,心肌细胞未发现α1,3 Gal分布。半定量分析发现α1,3 Gal表达量心房内膜最多 ,心肌间质最少。结论　异种抗原α1,3 Gal在心脏中的表达存在较大差异 。 展开更多
关键词 异种抗原 近交系猪 心脏移植 免疫组织化学 中国版纳近交系 表位α1 3-Gal
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版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的形态及生物力学研究 被引量：5
15
作者 董世武 孙建森 +3 位作者 应大君 寿建国 姚远 曾养志 《四川动物》 CSCD 2002年第2期69-71,共3页
本研究观察了版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的解剖学、组织学形态 ,并对其腰椎进行轴向载荷压缩试验。小型猪椎骨及肋骨在解剖学、组织学方面与人近似 ,其腰椎能承受人类正常生理载荷。因此 ,版纳小型猪椎骨、肋骨可以作为异种骨移植的材料。
关键词 版纳小型猪 近交系 椎骨 肋骨 形态 生物力学
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西双版纳小耳猪DNA指纹分析 被引量：6
16
作者 陈丙波 周建华 +1 位作者 魏泓 曾养志 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期295-297,共3页
采用ECL核酸直接标记和检测试剂盒 ,以HRP标记JL - 0 2多位点探针 ,对云南版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切图谱进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。大于 2kb的谱带数在 13～ 17条... 采用ECL核酸直接标记和检测试剂盒 ,以HRP标记JL - 0 2多位点探针 ,对云南版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切图谱进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。大于 2kb的谱带数在 13～ 17条之间 ,JB亚系内 80 5、80 7家系和JS亚系内 111、12 1、133、15 1家系不同个体间的相似系数分别为 0 .92± 0 .0 4、0 .85± 0 .13、0 .86± 0 .0 2、0 .80± 0 .0 5、0 .84± 0 .0 9、0 .88± 0 .0 8,显著高于家系间的相似系数。JB亚系内的 80 5家系和JS亚系内的 15 1家系不同个体间的相似系数最大 ,分别为 0 .92和 0 .88,说明其近交程度较高 ,个体间差异较小 ,均一性较强。另外 ,JB亚系内的 80 5与 80 7两个家系不同个体猪在 11.5kb处 ,均有一条区别于其他家系的特有图带 ,其是否是导致JB亚系体型较大的特异性基因座 ,有待进一步研究。 展开更多
关键词 DNA指纹 西双版纳小耳猪 SOUTHERN杂交
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猪SLA-Ⅱ类基因的研究概况 被引量：3
17
作者 潘伟荣 张清政 +3 位作者 霍金龙 查星琴 牛自兵 曾养志 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期759-763,共5页
猪主要组织相容性复合体又称SLA,即为猪白细胞抗原,其编码基因位于猪的第7号染色体上,是一组紧密连锁、高度多态的基因群,包括多个不同位点,是编码移植抗原,控制免疫细胞各亚群间协同作用的一个基因复合体。它不仅与移植排斥有关,而且... 猪主要组织相容性复合体又称SLA,即为猪白细胞抗原,其编码基因位于猪的第7号染色体上,是一组紧密连锁、高度多态的基因群,包括多个不同位点,是编码移植抗原,控制免疫细胞各亚群间协同作用的一个基因复合体。它不仅与移植排斥有关,而且广泛参与免疫应答的诱导和调节,在遗传、进化、行为、保护及生态等方面都具有重要的科学意义。就SLA-Ⅱ类区域基因目前的研究现状,对它的位置、分类、功能、多态、表达及应用等方面进行了系统阐述。 展开更多
关键词 猪 MHC SLA 移植排斥 免疫应答 SLA-Ⅱ类基因
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RNA干扰技术的应用研究进展 被引量：6
18
作者 信吉阁 王晓洪 +3 位作者 韩佃刚 牛自兵 李月涛 曾养志 《动物医学进展》 CSCD 2006年第2期30-33,共4页
RNA干扰是指由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默现象,广泛存在于真菌、植物和动物中。RNA干扰技术是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在功能基因组的研究中有着广阔的应用前景... RNA干扰是指由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)启动的序列特异的转录后基因沉默现象,广泛存在于真菌、植物和动物中。RNA干扰技术是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在功能基因组的研究中有着广阔的应用前景。文章对RNA干扰的分子机制、生物学功能和RNA扰技术的优势以及其在功能基因组、基因治疗、转基因动物研究、药物开发等方面的应用做一综述。 展开更多
关键词 RAN干扰 RNA干扰技术 功能基因组 基因治疗
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版纳微型猪近交系GHR基因克隆及生物信息学分析 被引量：7
19
作者 王淑燕 霍金龙 +2 位作者 潘伟荣 施晨 曾养志 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第1期48-56,共9页
目的获得版纳微型猪近交系(BMI)生长激素受体基因(GHR)序列,通过生物信息学分析预测GHR功能并进行GHR mRNA多组织表达谱分析。方法以版纳微型猪近交系的肝脏组织为材料提取RNA,RTPCR方法扩增GHR基因编码区序列,将序列连接至pMD18-T载体... 目的获得版纳微型猪近交系(BMI)生长激素受体基因(GHR)序列,通过生物信息学分析预测GHR功能并进行GHR mRNA多组织表达谱分析。方法以版纳微型猪近交系的肝脏组织为材料提取RNA,RTPCR方法扩增GHR基因编码区序列,将序列连接至pMD18-T载体进行克隆、测序和生物信息学分析;半定量PCR检测GHR mRNA在BMI不同组织中表达量的差异。结果克隆出了BMI GHR编码区序列,提交GenBank获得登录号KC999114。该基因CDS长1917 bp,编码638个氨基酸。生物信息学分析表明,与长白猪的GHR序列相比BMI存在4处氨基酸替换,分别为p.E381D、p.A409S、p.L556V和p.A580G,均发生在胞内域。GHR基因多组织表达谱分析显示:GHR mRNA几乎在各组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在小肠、心、肝、神经纤维、脾、卵巢中表达量较高,在肺、胃、大脑、胰和肾中的表达量较低。结论成功克隆了版纳微型猪近交系GHR全长编码区序列,进行了生物信息学功能分析和组织表达谱分析,为进一步阐明版纳微型猪近交系生长矮小机理奠定了基础。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 生长激素受体 生物信息学分析
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猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化 被引量：3
20
作者 成文敏 霍金龙 +4 位作者 信吉阁 潘伟荣 黄言 魏红江 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期635-640,共6页
本研究旨在观察猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化,以期作为判定哺乳动物卵母细胞胞质成熟的指标,同时也为今后克隆技术的发展和相关基因表达调控的研究提供基础。运用线粒体分子探针标记技术检测体外成熟不同时期卵母细胞中... 本研究旨在观察猪卵母细胞线粒体分布及线粒体DNA拷贝数变化,以期作为判定哺乳动物卵母细胞胞质成熟的指标,同时也为今后克隆技术的发展和相关基因表达调控的研究提供基础。运用线粒体分子探针标记技术检测体外成熟不同时期卵母细胞中线粒体的分布变化,运用实时荧光定量PCR技术检测其线粒体DNA拷贝数的变化趋势,揭示线粒体分布、线粒体DNA拷贝数变化与卵母细胞发育潜能的关系。结果表明,猪卵母细胞成熟前后,线粒体分布由未成熟的周边分布变为成熟后的均匀分布,并且线粒体簇变大,着色变深。卵母细胞成熟0、11、22h的mtDNA拷贝数分别为(2 519.52±940.39)、(3 421.47±345.71)和(9 747.58±1 928.24),他们之间无显著性差异(P>0.05)。卵母细胞成熟33h的mtDNA拷贝数为(39 913.61±1 180.26),显著高于成熟0、11和22h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。卵母细胞成熟44h的mtDNA拷贝数为(130 074.30±78 119.45),显著高于成熟33h的mtDNA拷贝数(P<0.05)。由此可见,随着卵母细胞成熟进程的推进,线粒体活性增强,线粒体DNA拷贝数明显增加。 展开更多
关键词 猪卵母细胞 体外成熟 线粒体分布 线粒体DNA拷贝数.
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