2004年黑龙江省新城疫病毒分子流行病学分析 被引量：9

1

作者 连宏军 刘培欣 +5 位作者 闫丽辉 曹殿军 孙建宏 梁宏志 韩正博 冉多良 《动物医学进展》 CSCD 2005年第7期91-97,共7页

2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接... 2004年从黑龙江省部分鸡场疑似新城疫(ND)病死鸡和鸽体内分离到9株NDV。对这9株NDV生物学特性进行测定,并对其F基因包括裂解位点在内的540bp片段进行了克隆、测序和同源性分析。结果表明,9株NDV鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)分别在47.8h～78.4h和1.51～2.00之间;8个分离株在F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQKRF117,1个分离株F蛋白裂解位点氨基酸顺序为112RRQRRF117,表明了它们全为ND中、强毒株。同源性分析显示,9株NDV分离株之间核苷酸与推导的氨基酸同源性分别为79.7%～99.7%和79.8%～100%;系统发生树分析表明,6株分离株与台湾株(TW98、TW99和TW2000等)遗传距离较近,可能有共同的起源,为基因Ⅶe型NDV,2株为鸽源NDV基因Ⅵ型,1株与我国特有的F48E9遗传距离最近,为基因Ⅸ型NDV。 展开更多

关键词 2004年 黑龙江省 流行病学分析 新城疫 病毒分子 同源性分析 裂解位点 氨基酸同源性 遗传距离 NDV 生物学特性 系统发生树 分离株 死亡时间 F蛋白 病死鸡 F基因 强毒株 核苷酸 分析表 顺序 鸡场 接种 日龄 鸡胚 鸽源

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13株新城疫病毒强毒株的分离鉴定及部分生物学特性 被引量：9

2

作者 连宏军 闫丽辉 +4 位作者 刘培欣 曹殿军 韩正博 孙建宏 梁宏志 《动物医学进展》 CSCD 2006年第6期64-69,共6页

2004年-2005年从黑龙江省11个地区鸡场、鸽场、鹅场疑似新城疫(ND)病死鸡、鸽、鹅体内分离到24株具有血凝活性的病毒,经HA、HI试验和电镜观察证实了13株病毒为NDV。其鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(IC-PI)分别为36.... 2004年-2005年从黑龙江省11个地区鸡场、鸽场、鹅场疑似新城疫(ND)病死鸡、鸽、鹅体内分离到24株具有血凝活性的病毒,经HA、HI试验和电镜观察证实了13株病毒为NDV。其鸡胚平均死亡时间(MDT)和1日龄雏鸡脑内接种致病指数(IC-PI)分别为36.8 h^73.6 h和1.51~2.00之间,属于NDV强毒株或中强毒株。除HLJ-12-04株外,强毒株的血凝素热稳定性较差,属快速或中速血凝解脱型;弱毒株的血凝素热稳定性好,属慢速血凝解脱型。所有毒株均可较好地凝集鸡和人(O型血)的红细胞,但对其他动物的红细胞凝集性差异较大,对马和兔的红细胞凝集无规律。 展开更多

关键词 新城疫病毒 分离鉴定 生物学特性 毒株

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NDV La Sota株、V4株F蛋白表位的预测 被引量：6

3

作者 孙建宏 曹殿军 +1 位作者 刘培欣 闫丽辉 《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期72-75,共4页

为进一步研究 2 种疫苗的表位,以深入探讨NDV La Sota株、V4疫苗免疫差异的根本所在。应用亲水性、可及性、抗原性、可塑性和二级结构预测等 5 种参数分别对新城疫病毒 La Sota株和 V4 株 F蛋白的 B细胞抗原表位进行了综合预测,预测到... 为进一步研究 2 种疫苗的表位,以深入探讨NDV La Sota株、V4疫苗免疫差异的根本所在。应用亲水性、可及性、抗原性、可塑性和二级结构预测等 5 种参数分别对新城疫病毒 La Sota株和 V4 株 F蛋白的 B细胞抗原表位进行了综合预测,预测到二者的 B细胞抗原表位分别有 19 个,这些表位中含有已经确定的 5 个中和表位, A1: 72aa, A2:78aa, A3: 79aa, A4: 157 aa、161 aa、170 aa、171 aa,A5:343 aa。比较发现,二者有 9 个预测的B细胞表位氨基酸序列存在差异。 展开更多

关键词 抗原表位 B细胞表位 F蛋白 NDV 预测 抗原性 疫苗免疫 种参 新城疫病毒 氨基酸序列

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细胞的抗原表位研究方法 被引量：10

4

作者 孙建宏 曹殿军 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期18-21,共4页

多表位疫苗有望成为预防多种病原体感染的理想疫苗,因而被认为是将来疫苗的发展方向。抗原表位是研究抗原的免疫机制和表位疫苗的基础,近年来在表位研究方面取得了一些可喜的进展,特别是抗原表位的研究方法。B细胞表位的研究方法已经不... 多表位疫苗有望成为预防多种病原体感染的理想疫苗,因而被认为是将来疫苗的发展方向。抗原表位是研究抗原的免疫机制和表位疫苗的基础,近年来在表位研究方面取得了一些可喜的进展,特别是抗原表位的研究方法。B细胞表位的研究方法已经不局限于通过交叠合成多肽进行研究,又诞生了噬菌体随机肽库以及表位预测等方法;在T细胞抗原表位的研究方面也有了相应的预测方法,尤其是将ELISPOT试验、体外抗原提呈试验等应用于T细胞表位活性的鉴定,极大的促进了T细胞表位的研究进展。文章全面系统地对B细胞表位与T细胞表位的研究方法的进展进行了综述。旨在为表位和表位疫苗的研究提供先进的多种技术方法。 展开更多

关键词 细胞 抗原表位 B细胞 T细胞 疫苗

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Menangle病毒研究进展 被引量：2

5

作者 连宏军 刘培欣 +1 位作者 曹殿军 冉多良 《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期32-36,共5页

Menangle病毒(MenV)是近几年出 现的一种能导致新生仔猪繁殖障碍综合征和 人类类似流感症状的副黏病毒科的病原体。 MenV于1997年首次在澳大利亚新南威尔 士商品化猪场分离得到。生物分类、分子生 物学、系统发育树分析和流行病学等多方... Menangle病毒(MenV)是近几年出 现的一种能导致新生仔猪繁殖障碍综合征和 人类类似流感症状的副黏病毒科的病原体。 MenV于1997年首次在澳大利亚新南威尔 士商品化猪场分离得到。生物分类、分子生 物学、系统发育树分析和流行病学等多方面 综合研究表明,MenV具有腮腺炎病毒属的 基本特征,并与腮腺炎病毒属(Rubulavirus)的另一成员Tiomanvirus(TiV)亲源关系最 近,从而证实MenV为腮腺炎病毒属的新成 员。文章重点对Menangle病毒分子生物学、 流行病学和诊断等方面内容进行了综述。 展开更多

关键词 Menangle病毒 分子生物学 流行病学 诊断

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猪γ干扰素基因真核重组表达质粒的构建及活性测定 被引量：1

6

作者 张立娜 刘培欣 +3 位作者 曹殿军 闫丽辉 贾竞波 危艳武 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期101-104,共4页

以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN... 以含有全长猪γ干扰素基因的质粒为模板,通过PCR方法扩增猪γ干扰素并引入酶切位点,酶切后与PCI真核表达载体连接在一起,测序后经比较,所扩增序列同Genebank报道的IFN-γ序列同源性为99·8%.将重组质粒转染PK细胞,检测所转染的pIFN-γ的抗病毒活性.试验结果表明,转染pIFN-γ试验组与正常细胞接毒对照组比较有显著差异,说明所构建的重组质粒转染后具有抗病毒作用. 展开更多

关键词 猪Γ干扰素 真核表达 活性测定

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La Sota与V4疫苗F蛋白的B细胞表位活性检测与比较 被引量：1

7

作者 孙建宏 曹殿军 +3 位作者 刘培欣 闫丽辉 王磊 刘宝全 《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期55-60,共6页

根据La Sota和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较。将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达。应用建... 根据La Sota和V4疫苗株F蛋白B细胞表位预测的结果,进行了表位区的鉴定和比较。将两疫苗株F基因预测存在差异的表位,根据序列位置邻近合并分成6段表位区,分别对每个毒株的6段表位区进行了亚克隆,并对每个毒株的预测区进行了表达。应用建立的Tricine缓冲体系50 g/L^200 g/L线性梯度聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳对表达情况进行了分析,得到5段多肽的大小分别是P1为8.0 ku,P2为10.8 ku,P4为11.6 ku,P5为13.5 ku,P6为10.5 ku。应用La Sota特异性抗血清,利用Western blot-ting对表达的各肽段进行了抗原性鉴定。结果表明,P1、P4、P5、P6段呈阳性反应,说明其中含有线性B细胞表位。这4段分别位于F蛋白的1 aa^48 aa,201 aa^274 aa,377 aa^458 aa和469 aa^530 aa,以前发现的中和性表位均不在这4段区域内。而P2段在West-ern blotting中无抗体反应性,表明它不含线性表位。比较研究发现NDV La Sota与V4株的P4区的B细胞表位活性存在着重要的差异,这种差异可能造成两个毒株的免疫原性差异。 展开更多

关键词 ND LA Sota疫苗 V4疫苗 表位 预测

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银狐生长激素cDNA克隆和原核表达 被引量：2

8

作者 刘玉堂 胡晓航 +3 位作者 闫丽辉 曹殿军 刘培欣 杨传平 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第4期26-30,共5页

为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,... 为了获得重组的银狐生长激素,本试验用Trizol的方法从银狐脑垂体组织中提取总RNA,以mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出生长激素成熟cDNA片段并克隆到载体质粒pMD18-T中;通过含有BamHⅠ酶切位点的特异引物从pMD18-T-fGH中亚克隆出cDNA片段,并将其重组到pPROEXTMHta质粒中,构建了银狐生长激素原核表达质粒pPRO-EXTMHta-fGH。将pPROEXTMHta-fGH原核表达质粒转化DH5α大肠杆菌,用终浓度1 mmol/L IPTG进行诱导,通过SDS-PAGE进行检测。结果表明在转化的大肠杆菌中检测到分子量为26 kD的fGH蛋白的存在,表达量占菌体蛋白总量的35%,并且表达产物以包涵体的形式存在。 展开更多

关键词 银狐 生长激素 克隆 原核表达

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白细胞介素18生物学作用及其在病毒感染中的表达调控 被引量：2

9

作者 刘恒贵 曹殿军 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期6-9,共4页

白细胞介素 1 8( IL -1 8)作为一种能诱导产生 IFN-γ的因子 ,在机体产生抗微生物免疫中起着重要作用。巨噬细胞是生物活性 IL-1 8的主要来源 ,它们持续转录 IL-1 8的 m RNA并表达其前体蛋白。微生物感染可提高巨噬细胞中 IL-1 8基因的... 白细胞介素 1 8( IL -1 8)作为一种能诱导产生 IFN-γ的因子 ,在机体产生抗微生物免疫中起着重要作用。巨噬细胞是生物活性 IL-1 8的主要来源 ,它们持续转录 IL-1 8的 m RNA并表达其前体蛋白。微生物感染可提高巨噬细胞中 IL-1 8基因的表达水平 ,IL-1 8分泌的调节以 IL-1 8前体蛋白翻译后的调节为主 ,而不是对转录活性进行调控。本文综述了 IL -1 8的生物学特性 ,总结了 IL -1 8促进炎症和免疫调节功能的最新知识 ,重点讨论病毒感染时巨噬细胞产生 IL-1 8的 Caspase依赖性调控。 展开更多

关键词 生物学作用 病毒感染 白细胞介素18 表达调控 巨噬细胞 免疫应答 caspase级联反应

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转炉吹炼过程控制 被引量：2

10

作者 曹殿军 《新疆有色金属》 2010年第5期39-40,共2页

喀拉通克铜镍矿冶炼车间转炉是间歇自热式生产,它的主要目的是去硫除铁及杂质,并富集有价金属的一个过程。吹炼工艺主要是造渣过程的控制及提高直收率,降低渣含金属,对以后出合格的金属化高冰镍产品,吹炼过程控制得当,那么所富集的有价... 喀拉通克铜镍矿冶炼车间转炉是间歇自热式生产,它的主要目的是去硫除铁及杂质,并富集有价金属的一个过程。吹炼工艺主要是造渣过程的控制及提高直收率,降低渣含金属,对以后出合格的金属化高冰镍产品,吹炼过程控制得当,那么所富集的有价金属就越多,金属损失就小,渣就符合工艺技术的要求。 展开更多

关键词 转炉 喷溅物 造渣 转炉吹炼 金属化高冰镍

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铜镍转炉炉寿提高的工艺实践

11

作者 曹殿军 徐玉虎 《新疆有色金属》 2010年第4期42-42,47,共2页

通过统计数据分析了影响铜镍转炉寿命的主要因素,采取了相应的解决措施,实施后转炉的大修平均炉寿由75炉提高到130炉。

关键词 铜镍转炉 炉寿 镁铬砖

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mRNA差异显示技术及其改进 被引量：3

12

作者 杨新艳 刘培欣 +1 位作者 单文鲁 曹殿军 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期19-21,共3页

分子生物学的首要任务之一就是比较不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异。在多种基因检测技术中 ,mRNA差异显示技术作为研究细胞、组织在不同条件下 ,基因表达水平差异的重要手段 ,以不可替代的优势已被广泛用于生物学领... 分子生物学的首要任务之一就是比较不同细胞间或同一细胞不同时间与空间基因表达的差异。在多种基因检测技术中 ,mRNA差异显示技术作为研究细胞、组织在不同条件下 ,基因表达水平差异的重要手段 ,以不可替代的优势已被广泛用于生物学领域。该技术与传统的消减杂交等方法进行比较具有简便、快捷、灵敏、高效等优点 ,但也存在假阳性率高、易污染等缺点。为了克服以上缺点又不断涌现出一些改进技术。文章对该技术的原理。 展开更多

关键词 mRNA差异 显示技术 改进技术 分子生物学 生理状态

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禽痘病毒载体在新城疫病毒重组疫苗研究中的应用 被引量：1

13

作者 梁荣 陈杰 曹殿军 《动物医学进展》 CSCD 2000年第1期13-16,共4页

介绍了禽痘病毒粒子及其基因组的特点和禽痘病毒作为重组疫苗载体的优点 ,简述了构建禽痘病毒疫苗的基本方法和国内外以此作载体的新城疫病毒重组活疫苗的研究进展 ,认为以禽痘病毒作载体构建禽类重组疫苗具有广阔的应用前景。

关键词 禽痘病毒 新城疫病毒 基因疫苗 重组疫苗 载体

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牛分技杆菌胞浆特异蛋白质抗原的制备和检测 被引量：1

14

作者 汪广荫 林范泽 +2 位作者 卫广森 曹殿军 杨光 《黑龙江八一农垦大学学报》 1990年第1期1-5,共5页

将牛分枝杆菌Mycobacterium boyis S_(10)株培养于苏通培养基,经低温高速离心,超声波裂解,Sephadex G200柱层析,获得3个峰,制备到3种胞浆蛋白质抗原,经同奶牛结核病分枝杆菌阳性血清。阴性血清及各种分枝杆菌高免牛血清的ELISA检测,并与... 将牛分枝杆菌Mycobacterium boyis S_(10)株培养于苏通培养基,经低温高速离心,超声波裂解,Sephadex G200柱层析,获得3个峰,制备到3种胞浆蛋白质抗原,经同奶牛结核病分枝杆菌阳性血清。阴性血清及各种分枝杆菌高免牛血清的ELISA检测,并与牛PPD,聚合OT等抗原做了比较,以第二峰的胞浆蛋白质抗原的特异性为最好。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 抗原 血清 蛋白 制备

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