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环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制
被引量：
1
1
作者
时浩清
訾晓渊
+2 位作者
张春雷
杨琦
孙颖浩
《山东医药》
CAS
2019年第35期1-5,共5页
目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形...
目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭及迁移能力。免疫共沉淀实验筛选与circRNA-1565结合的miRNA分别为miR-21和miR-153,采用双荧光素酶报告基因实验观察circRNA-1565对miR-21和miR-153的调控作用。将PC-3细胞分为si445组、si445+miR-21 inhibitor组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组,分别转染si445、si445+miR-21 inhibitor、si445+miR-153 inhibitor及阴性对照siRNA,并检测细胞侵袭、迁移能力。采用Western blotting法检测si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、蜗牛家族转录抑制子1(SNAIL1)蛋白表达。结果观察组与对照组不同时间点细胞增殖OD值、克隆形成个数、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05),观察组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均低于对照组(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,circRNA-1565可以分别与miR-21及miR-153直接结合。与阴性对照组比较,其余三组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均降低,且si445组、si445+miR-21 inhibitor组降低更明显(P均<0.05)。si445组、si445+miR-21 inhibitor组进入下室的细胞个数、细胞移动距离比较P均>0.05。si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞PI3K蛋白相对表达量依次升高(P均<0.05),三组细胞PTEN和SNAIL1蛋白相对表达量比较P均>0.05。结论circRNA-1565可促进前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移,其机制可能与竞争性结合miR-153并沉默其下游靶蛋白PI3K表达有关。
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关键词
前列腺癌
PC-3细胞
环状RNA-1565
微小RNA-153
磷脂酰肌醇3-激酶
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题名
环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制
被引量：
1
1
作者
时浩清
訾晓渊
张春雷
杨琦
孙颖浩
机构
海军军医大学附属长海医院
出处
《山东医药》
CAS
2019年第35期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(81430058)
海军军医大学博士创新基金资助项目(20152093)
文摘
目的观察环状RNA(circRNA)-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将PC-3细胞分为观察组和对照组,分别转染circRNA-1565 siRNA(si445)和阴性对照siRNA。两组转染24 h,分别检测其培养0~4 d细胞增殖、克隆形成、凋亡、侵袭及迁移能力。免疫共沉淀实验筛选与circRNA-1565结合的miRNA分别为miR-21和miR-153,采用双荧光素酶报告基因实验观察circRNA-1565对miR-21和miR-153的调控作用。将PC-3细胞分为si445组、si445+miR-21 inhibitor组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组,分别转染si445、si445+miR-21 inhibitor、si445+miR-153 inhibitor及阴性对照siRNA,并检测细胞侵袭、迁移能力。采用Western blotting法检测si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)、蜗牛家族转录抑制子1(SNAIL1)蛋白表达。结果观察组与对照组不同时间点细胞增殖OD值、克隆形成个数、细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P均>0.05),观察组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均低于对照组(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,circRNA-1565可以分别与miR-21及miR-153直接结合。与阴性对照组比较,其余三组进入下室的细胞个数、细胞移动距离均降低,且si445组、si445+miR-21 inhibitor组降低更明显(P均<0.05)。si445组、si445+miR-21 inhibitor组进入下室的细胞个数、细胞移动距离比较P均>0.05。si445组、si445+miR-153 inhibitor组、阴性对照组细胞PI3K蛋白相对表达量依次升高(P均<0.05),三组细胞PTEN和SNAIL1蛋白相对表达量比较P均>0.05。结论circRNA-1565可促进前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移,其机制可能与竞争性结合miR-153并沉默其下游靶蛋白PI3K表达有关。
关键词
前列腺癌
PC-3细胞
环状RNA-1565
微小RNA-153
磷脂酰肌醇3-激酶
Keywords
prostate carcinoma
PC-3 cells
circRNA-1565
microRNA-153
phosphatidylinositol 3-kinase
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
环状RNA-1565对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及其机制
时浩清
訾晓渊
张春雷
杨琦
孙颖浩
《山东医药》
CAS
2019
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