光照应激对SD大鼠睾丸促性腺激素释放激素受体表达的影响 被引量：6

1

作者 时姗姗 马恒辉 +5 位作者 章如松 周航波 陶晓倩 柳海燕 林杈英 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2011年第2期122-126,共5页

目的多种应激方式均能抑制生殖功能,但其对调控机制仍缺少系统的研究。通过观察光照应激状态下SD大鼠睾丸内促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)受体蛋白和mRNA表达变化,为寻找应激状态下生殖系统调节机制提供依... 目的多种应激方式均能抑制生殖功能,但其对调控机制仍缺少系统的研究。通过观察光照应激状态下SD大鼠睾丸内促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)受体蛋白和mRNA表达变化,为寻找应激状态下生殖系统调节机制提供依据。方法建立SD大鼠光照应激模型,将70只大鼠随机分为14组,其中7组(实验组)24 h持续光照,包括短期光照应激(2、3、4和7d)和长期光照应激(14、21和28d),另7组按正常昼夜节律并作为对照组;分别取实验组和相应对照组的睾丸组织,采用Western blot和RT-PCR分析GnRH受体在各时间段大鼠睾丸组织中的蛋白和mRNA表达变化,并用化学发光法检测血清中睾酮的含量。结果 Western blot结果显示:与对照组比较,持续光照2、3、4和7 d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体表达无明显变化;持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体的表达分别升高了27.8%±11.2%和40.6%±24.8%,差异具有统计学意义(P<0.05);持续光照28 d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体的表达升高了26.1%±33.6%,但差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示:GnRH受体的mRNA表达和其蛋白表达呈现相同的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。随着光照时间的延长,睾酮分泌量与对照组相比持续上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GnRHR随着光照应激时间的延长,在大鼠睾丸中蛋白表达量发生改变。提示在光照应激中,GnRH受体对生殖功能具有潜在的生理调节功能。 展开更多

关键词 光照 应激 睾丸 促性腺激素释放激素

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光照应激对SD大鼠小肠促性腺激素释放激素受体表达的影响 被引量：5

2

作者 时姗姗 陶晓倩 +4 位作者 韩雪峰 卢坤刚 张艳梅 柳海燕 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1127-1130,1135,I0003,共6页

目的:机体遭受各种创伤应激后,常出现各种胃肠道症状,并且已有研究表明大鼠的消化系统广泛分布有促性腺激素释放激素(GnRH)受体免疫反应阳性细胞。文中观察光照应激状态下SD大鼠小肠黏膜GnRH受体的分布和表达变化。方法:建立SD大鼠光照... 目的:机体遭受各种创伤应激后,常出现各种胃肠道症状,并且已有研究表明大鼠的消化系统广泛分布有促性腺激素释放激素(GnRH)受体免疫反应阳性细胞。文中观察光照应激状态下SD大鼠小肠黏膜GnRH受体的分布和表达变化。方法:建立SD大鼠光照应激模型,24 h持续光照,分为短期光照应激(2、3、4、7 d)和长期光照应激(14、21、28 d),分别取应激组和相应对照组的小肠组织,采用免疫组化和Western blot技术分析GnRH受体在各时间段大鼠小肠组织中的分布和表达变化。结果:Western blot结果显示:与对照组相比,持续光照2、3、4、7 d后,实验组大鼠小肠GnRH受体表达无明显变化;持续光照14 d和21 d后,实验组大鼠小肠GnRH受体的相对表达量分别约升高了56.5%和59.9%,具有显著性差异(P<0.05);持续光照28 d后,实验组大鼠小肠GnRH受体的相对表达量约升高了27.8%,但无显著性差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,GnRH受体在大鼠小肠中的分布未见明显改变,但长期应激后期实验组(14、21、28 d)GnRH受体免疫组化显色较深,说明GnRH受体表达升高,这与Western blot的结果基本一致。结论:GnRH受体随着光照应激时间的延长,在大鼠小肠中表达量发生改变。提示在光照应激中,GnRH对消化功能具有潜在的生理调节功能。 展开更多

关键词 光照 应激 小肠 促性腺激素释放激素

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BRAF VE1抗体在结直肠癌中检测BRAF V600E突变的应用 被引量：2

3

作者 时姗姗 王璇 +6 位作者 夏秋媛 陆珍凤 叶胜兵 杨万瑞 马恒辉 饶秋 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1383-1385,共3页

目的使用BRAF VE1抗体免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF V600E位点突变,并分析其敏感性和特异性。方法采用ARMS法和免疫组化法检测36例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态,并使用测序验证。结果免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF VE1抗... 目的使用BRAF VE1抗体免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF V600E位点突变,并分析其敏感性和特异性。方法采用ARMS法和免疫组化法检测36例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态,并使用测序验证。结果免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF VE1抗体的敏感性为100%,特异性为62.9%。与甲状腺样本BRAF V600E突变相比,结直肠癌标本为细胞质着色,染色呈棕黄色。结论免疫组化法可高效、快速、低成本初步筛选结直肠癌的BRAF V600E突变,但需分子检测进一步确认。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 BRAFV600E 突变检测 靶向治疗 免疫组织化学

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miRNA在肿瘤分子病理学研究中的应用 被引量：8

4

作者 时姗姗 王建东 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1111-1113,1119,共4页

微小RNA(miRNA)是一种内源性、非编码的RNA,它主要在转录后水平调控基因的表达,其表达状况与机体生理、病理状态密切相关。目前发现,恶性肿瘤组织中存在不同于正常机体的特征性miRNA表达谱,通过测定这些miRNA的表达变化可能成为恶性肿... 微小RNA(miRNA)是一种内源性、非编码的RNA,它主要在转录后水平调控基因的表达,其表达状况与机体生理、病理状态密切相关。目前发现,恶性肿瘤组织中存在不同于正常机体的特征性miRNA表达谱,通过测定这些miRNA的表达变化可能成为恶性肿瘤早期诊断、靶向治疗及预后的重要手段。本文就肿瘤miRNA的研究进展,及其在分子病理学方面应用前景作一综述。 展开更多

关键词 MIRNA 分子病理学诊断 靶向治疗 预后

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光照应激对SD大鼠睾丸中Annexin 5表达的影响 被引量：1

5

作者 时姗姗 王大勇 +7 位作者 柳海燕 陶晓倩 韩雪峰 卢坤刚 张艳梅 戈一峰 崔英霞 姚兵 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-191,共3页

目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和West... 目的观察光照应激状态下SD大鼠睾丸组织中annexin5的表达变化。方法建立SD大鼠光照应激模型,24h持续光照,分为光照应激短期(2、3、4、7d)和光照应激长期(14、21、28d),分别取应激状态和相应对照组的大鼠睾丸组织,采用免疫组织化学和Western blotting技术分析annexin5免疫定位和蛋白相对表达。结果Western blotting结果显示:短期光照应激组(2、3、4、7d)的实验组大鼠睾丸annexin5表达与对照组相比无明显变化;在持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量与对照组相比分别从3.09提高到4.16,从4.20提高到5.28(P<0.01,P<0.05);而持续光照28d后,实验组大鼠睾丸annexin5的相对表达量(4.87)与对照组(4.13)比较无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学显示,annexin5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但光照应激长期实验组(14、21、28d)annexin5免疫组化显色较深,说明annexin5表达升高,这与Westernblotting的结果基本一致。结论长期光照应激使大鼠睾丸annexin5的表达量明显增加。annexin5参与了应激过程,并可能参与了睾丸中某些重要生理功能的调节。 展开更多

关键词 光 应激 ANNEXIN 5 基因

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荧光原位杂交技术在尿脱落细胞学检查中的应用 被引量：1

6

作者 时姗姗 王璇 +2 位作者 马恒辉 周晓军 王建东 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第3期330-332,共3页

荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种细胞遗传学与分子生物学相结合的新技术。它具有准确、可靠、快速等优点。近来,我院将FISH方法用于膀胱癌的诊断及膀胱癌术... 荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种细胞遗传学与分子生物学相结合的新技术。它具有准确、可靠、快速等优点。近来,我院将FISH方法用于膀胱癌的诊断及膀胱癌术后监测[1-2],现将相关的检测结果分析报道如下。 展开更多

关键词 血尿 荧光原位杂交 泌尿道

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介绍一种新型探针稀释液 被引量：1

7

作者 时姗姗 章如松 饶秋 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期806-806,共1页

随着分子生物学的不断发展，越来越多的分子生物学技术广泛运用于临床及綦础医学的研究，荧光原位杂交（fluoresceneinsiluhybridization，FISH）检测是分子诊断的重要工具由于探针合成的成本较高，影响FISH技术在临床应用中的普及。本... 随着分子生物学的不断发展，越来越多的分子生物学技术广泛运用于临床及綦础医学的研究，荧光原位杂交（fluoresceneinsiluhybridization，FISH）检测是分子诊断的重要工具由于探针合成的成本较高，影响FISH技术在临床应用中的普及。本文推荐一种新型探针稀释液，效果良好，可降低其成本，现介绍如下。 展开更多

关键词 探针稀释液 FISH 新型

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Cathepsin K在肉芽肿诊断和鉴别诊断中的应用

8

作者 时姗姗 章如松 +6 位作者 余波 王璇 何燕 马恒辉 王建东 饶秋 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期981-982,986,共3页

目的观察Cathepsin K在克罗恩病、结核、结节病、异物肉芽肿等肉芽肿性病变中的表达,探讨其在诊断肉芽肿病变中的临床价值。方法采用免疫组化EnVision两步法检测Cathepsin K、CD68在10例克罗恩病、5例结核、4例结节病和5例异物肉芽肿中... 目的观察Cathepsin K在克罗恩病、结核、结节病、异物肉芽肿等肉芽肿性病变中的表达,探讨其在诊断肉芽肿病变中的临床价值。方法采用免疫组化EnVision两步法检测Cathepsin K、CD68在10例克罗恩病、5例结核、4例结节病和5例异物肉芽肿中的表达,并结合阳性细胞数量及其位置进行分析。结果 Cathepsin K在克罗恩病、结核、结节病和异物肉芽肿中活化的类上皮细胞中呈强阳性表达,在成纤维母细胞中呈弱阳性表达,在背景中的巨噬细胞中不表达;而CD68表达于所有类型的巨噬细胞。与CD68相比,Cathepsin K的表达更具特异性。结论 Cathepsin K广泛表达于机体各类肉芽肿中,包括克罗恩病、结核、结节病和异物肉芽肿,其可作为诊断肉芽肿的一种有效标记物。 展开更多

关键词 肉芽肿 CATHEPSIN K CD68

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有源配电网的综合供电恢复及改进遗传算法 被引量：25

9

作者 李振坤 刘俊 +2 位作者 杨帆 楼越焕 时姗姗 《电力系统保护与控制》 EI CSCD 北大核心 2014年第17期24-30,共7页

随着分布式电源在配电网中渗透率的提高,利用DG的孤岛运行能力为故障后配电网中非故障区域的停电负荷恢复供电,可有效提高配电网的供电可靠性。在考虑功率平衡、DG孤岛个数和配电网内联络开关的影响因素下,对有源配电网的恢复供电进行... 随着分布式电源在配电网中渗透率的提高,利用DG的孤岛运行能力为故障后配电网中非故障区域的停电负荷恢复供电,可有效提高配电网的供电可靠性。在考虑功率平衡、DG孤岛个数和配电网内联络开关的影响因素下,对有源配电网的恢复供电进行了研究。通过将备用联络线路等值为DG,在恢复决策过程中同时考虑DG与联络开关,提高了整体方案的优越性。在利用DG对负荷恢复供电的过程中,充分考虑了DG的类型及控制特性,通过将DG分为主电源和从电源,研究了主从控制模式下孤岛供电的恢复方案。在孤岛划分过程中,采用改进遗传算法进行了求解,结合有源配电网的网络结构以及故障后孤岛的主从控制模式,提出了染色体编码时的两大约束条件以及基因组与基因子块的概念,染色体间的交叉和变异操作全部基于基因组进行操作,有效避免了无效解的产生。最后对一包含3条馈线、7台DG的配电网进行了仿真研究,验证了所提方法的有效性。 展开更多

关键词 有源配电网 分布式电源 供电恢复 孤岛划分 主从控制 改进遗传算法

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结直肠癌中K-ras基因突变的检测及其临床病理学意义 被引量：21

10

作者 王璇 王建东 +3 位作者 罗春英 马恒辉 时姗姗 周晓军 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第1期19-22,共4页

目的 K-ras基因在结直肠癌发生、发展中均有重要作用。K-ras野生型的患者对西妥昔单抗(Cetuximab,C225)敏感,而突变型者不敏感。文中探讨结直肠癌中K-ras基因突变情况及其临床病理学意义。方法从结直肠癌石蜡标本中提取基因组DNA,采用... 目的 K-ras基因在结直肠癌发生、发展中均有重要作用。K-ras野生型的患者对西妥昔单抗(Cetuximab,C225)敏感,而突变型者不敏感。文中探讨结直肠癌中K-ras基因突变情况及其临床病理学意义。方法从结直肠癌石蜡标本中提取基因组DNA,采用焦磷酸测序(pyrosequencing)法检测67例结直肠癌中K-ras基因的突变情况。结果 K-ras基因突变率为38.8%(26/67),发现6种突变类型,即第12密码子(GGT→GAT、GGT→GTT、GGT→TGT、GGT→AGT、GGT→GCT)突变和第13密码子(GGC→GAC)突变。K-ras基因突变57.7%发生在第12密码子的第2位碱基,最多见突变类型为(GGT→GAT)。女性患者K-ras基因突变率(57.7%)高于男性患者(26.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移组K-ras基因突变率(58.8%)高于无淋巴结转移组(32.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。K-ras基因突变与患者年龄、肿瘤位置、浸润深度、组织学类型及Dukes'分期无显著相关性(P>0.05)。结论焦磷酸测序可用于K-ras基因突变的快速检测;K-ras基因突变在女性结直肠癌患者及有淋巴结转移的患者中多见,可望成为判断结直肠癌预后的重要指标。 展开更多

关键词 焦磷酸测序 结直肠癌 K-RAS基因 突变

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非小细胞肺癌化疗药物敏感基因表达及其临床病理特征分析 被引量：15

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作者 罗春英 王璇 +3 位作者 时姗姗 周晓军 马恒辉 王建东 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第5期481-484,共4页

目的肺癌是全球癌症死亡的首要原因,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌总数的85%。目前化疗是晚期NSCLC常规治疗方案。文中分析几种常见化疗药物敏感性相关基因mRNA在中国人群中表达情况及其与临床病理特征... 目的肺癌是全球癌症死亡的首要原因,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌总数的85%。目前化疗是晚期NSCLC常规治疗方案。文中分析几种常见化疗药物敏感性相关基因mRNA在中国人群中表达情况及其与临床病理特征的相关性以便进行个体化治疗。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative re-verse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测49例NSCLC石蜡组织标本中编码3型β微管蛋白的TUBB3基因、核苷酸切除修复交叉互补组1基因(excision repair cross complementation group1,ERCC1)、胸苷酸合成酶基因(thymidylate syn-thetase,TYMS)、核糖核苷酸还原酶亚单位M1基因(ribonucleotide reductase M1,RRM1)mRNA表达水平。结果 TUBB3mRNA在53.33%NSCLC组织中高表达;ERCC1 mRNA在40.00%NSCLC组织中高表达,其中肺腺癌高表达率为53.33%、肺鳞状细胞癌为8.33%,两者之间的表达差异有统计学意义,P=0.019;TYMS mRNA在76.19%NSCLC组织中低表达;RRM1mRNA在78.57%NSCLC组织中低表达。TUBB3、ERCC1、TYMS、RRM1基因mRNA表达与NSCLC患者的性别、年龄、肿瘤分化程度无显著相关性。结论多数中国人NSCLC肿瘤组织中TYMS、RRM1 mRNA低表达;肺腺癌ERCC1 mRNA表达明显高于肺鳞状细胞癌。研究结果提示,多数NSCLC患者对化疗药物吉西他滨、培美曲塞敏感,肺鳞癌患者较腺癌患者应用铂类抗癌药物更有效。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 药物敏感性 实时荧光定量RT—PCR 基因表达

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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响 被引量：13

12

作者 陶晓倩 王大勇 +6 位作者 柳海燕 林钗英 韩雪峰 时姗姗 崔英霞 戈一峰 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2010年第4期342-346,共5页

目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标... 目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 间质细胞 睾酮 3β-羟基类固醇脱氢酶

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促性腺激素释放激素激动剂通过ERK MAPK途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA表达 被引量：10

13

作者 柳海燕 时姗姗 +6 位作者 陶晓倩 卢坤刚 韩雪峰 张艳梅 崔英霞 李晓军 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第8期789-793,共5页

目的:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的10肽激素,通过刺激促性腺激素释放激素的合成和分泌,调节性激素的合成。GnRH对睾丸间质细胞也具有直接的刺激作用。文中研究GnRH激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞ERK MAPK信号通路和3β-HSD... 目的:促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的10肽激素,通过刺激促性腺激素释放激素的合成和分泌,调节性激素的合成。GnRH对睾丸间质细胞也具有直接的刺激作用。文中研究GnRH激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞ERK MAPK信号通路和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,血清饥饿2 h。GnRHa(10-7mol/L)和ERK抑制剂PD98059(50μmol/L)刺激细胞后Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、总ERK(t-ERK)的蛋白表达,荧光实时定量PCR检测3β-HSD mRNA表达。结果:结果显示GnRHa刺激间质细胞0、5、10、30、60和90 min后,p-ERK水平在5 min时达到最高,与对照组比较升高了约3.5倍(P<0.05);10 min时开始下降,但与对照组相比较仍显著升高2.2倍(P<0.05);90 min时恢复到正常水平。加入ERK选择性抑制剂PD98059后,p-ERK水平显著下降50%(P<0.05);再用GnRHa刺激细胞5 min,p-ERK水平仍无法恢复正常水平。用PD98059处理细胞后,再加入GnRHa培养24 h,3β-HSD mRNA水平也显著下降(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRH激动剂可能通过ERKMAPK信号通路来调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA的表达,进而调控睾酮的分泌。 展开更多

关键词 促性腺激素释放激素 ERK MAPK 睾丸间质细胞 3Β-HSD

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大鼠睾丸间质细胞中促性腺激素释放激素激动剂调控睾酮合成的机制 被引量：8

14

作者 柳海燕 陶晓倩 +8 位作者 时姗姗 张艳梅 卢坤刚 韩雪峰 崔英霞 戈一峰 黄宇烽 李晓军 姚兵 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1337-1341,共5页

目的:研究促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的调控机制。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,GnRHa(10-7 mol/L)分别处理间质细胞6、12、24、36、48 h后,Western blot方法分析3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD... 目的:研究促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的调控机制。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,GnRHa(10-7 mol/L)分别处理间质细胞6、12、24、36、48 h后,Western blot方法分析3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)蛋白的变化;MEK1/2抑制剂PD98059(50μmol/L)和GnRHa共作用于间质细胞后,分析3β-HSD蛋白表达和睾酮水平的变化。结果:GnRHa处理间质细胞不同时间后,结果显示3β-HSD蛋白的表达对GnRHa的刺激具有时间依赖性。GnRHa处理12 h后,3β-HSD蛋白表达与对照组相比显著上升45%(P<0.05),24 h达到最高水平,升高1.0倍(P<0.05);48 h后3β-HSD恢复至正常水平。加入PD98059后,显著抑制了GnRHa对3β-HSD的刺激作用,3β-HSD水平下降了61%(与GnRHa组相比,P<0.05),睾酮水平也随之显著下降45%(与GnRHa组相比,P<0.05)。结论:GnRHa可能通过细胞外信号调节激酶(ERK1/2)途径调控大鼠睾丸间质细胞3β-HSD的表达,进而促进睾酮的合成。 展开更多

关键词 促性腺激素释放激素激动剂 原代培养 ERK1/2 间质细胞 3β-羟基类同醇脱氢酶

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TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤1例并文献复习 被引量：8

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作者 涂频 程静 +4 位作者 周晓蝶 时姗姗 刘标 徐艳 石群立 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期450-452,共3页

目的探讨TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及预后。方法对1例TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤进行临床病理学观察,并复习相关文献。结果患者男性,25岁,胸部CT示胸腺侵袭性占位伴左上纵隔淋巴结增大。镜检:肿瘤... 目的探讨TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断及预后。方法对1例TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤进行临床病理学观察,并复习相关文献。结果患者男性,25岁,胸部CT示胸腺侵袭性占位伴左上纵隔淋巴结增大。镜检:肿瘤细胞弥漫分布,瘤细胞圆形,小至中等大小,胞质少,核深染,圆形、卵圆形或不规则,核分裂象易见,脂肪组织内有肿瘤细胞累及。免疫表型:肿瘤细胞弥漫一致性表达CD99、CD34和CD43,不表达TdT、MPO、CD117、CD1a、CD2、CD3、CD4和CD8等。基因重排检测结果显示存在IGH-B和TCRD基因重排。结论 TdT阴性的T淋巴母细胞淋巴瘤是一种罕见的高度恶性肿瘤,其诊断与鉴别诊断主要依赖于病理学形态、免疫表型和分子病理学检测。 展开更多

关键词 淋巴瘤 TDT T淋巴母细胞 临床病理

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促性腺激素释放激素拮抗剂对In-R1-G9细胞表达胰高血糖素的影响 被引量：6

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作者 张艳梅 柳海燕 +7 位作者 陶晓倩 时姗姗 卢坤刚 韩雪峰 崔英霞 戈一峰 李晓军 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1136-1139,共4页

目的:促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)能降低小鼠糖尿病的发生率,文中在细胞水平研究GnRHant对In-R1-G9细胞内胰高血糖素(glucagon)表达的调控作用。方法:分别用终浓度为0.1、10、1 000 nmol/L的GnRHant处理培养的In-R1-G9细胞2 h(... 目的:促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)能降低小鼠糖尿病的发生率,文中在细胞水平研究GnRHant对In-R1-G9细胞内胰高血糖素(glucagon)表达的调控作用。方法:分别用终浓度为0.1、10、1 000 nmol/L的GnRHant处理培养的In-R1-G9细胞2 h(对照组用甘露醇处理),通过Western blot和荧光定量PCR技术观察胰高血糖素在蛋白水平及转录水平的变化。结果:与对照组相比,低浓度的GnRHant(0.1 nmol/L)使胰高血糖素在蛋白水平和转录水平的表达均有所降低,但是无统计学意义(P>0.05);而高浓度的GnRHant(10 nmol/L、1 000 nmol/L)能明显地降低胰高血糖素的表达(P<0.05)。结论:一定浓度的GnRHant能降低In-R1-G9细胞内胰高血糖素的表达。 展开更多

关键词 GNRH拮抗剂 In—R1-G9细胞 胰高血糖素

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肺原发原始神经外胚叶肿瘤的临床病理观察 被引量：4

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作者 彭李博 魏雪 +2 位作者 时姗姗 周晓军 吴波 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第3期277-279,共3页

目的原始神经外胚叶肿瘤(primitive neuroectodermal tumour,PNET)是一种少见的恶性小圆细胞肿瘤,文中探讨肺原发原始神经外胚叶肿瘤的临床病理特征。方法收集2例原发于肺的PNET患者资料,分析其临床病理特点,采用免疫组化检测相关免疫... 目的原始神经外胚叶肿瘤(primitive neuroectodermal tumour,PNET)是一种少见的恶性小圆细胞肿瘤,文中探讨肺原发原始神经外胚叶肿瘤的临床病理特征。方法收集2例原发于肺的PNET患者资料,分析其临床病理特点,采用免疫组化检测相关免疫标志物,并通过荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)检测EWS基因易位情况。结果 2例患者年龄分别为33岁和17岁,显微镜下肿瘤细胞为形态单一的小圆细胞,弥漫或片状、梁状分布,细胞质少,核呈椭圆形或短梭形,核分裂象易见,肿瘤内散在不规则坏死灶,可见菊形团结构。免疫组织化学标记显示肿瘤细胞均表达CD99、FLI-1和Syn,而CKpan、EMA、Desmin、Cg A、TTF1、CD34均阴性。2例患者EWS基因易位检测均阳性,分别于术后7个月、32个月死亡。结论原发于肺的PNET罕见,选择恰当的免疫标志物(CD99、FLI-1、Syn)及FISH检测EWS基因易位有助于提高诊断的准确性。 展开更多

关键词 原始神经外胚叶肿瘤 肺部 免疫组化 EWS基因易位

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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响 被引量：3

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作者 陶晓倩 林钗英 +7 位作者 柳海燕 时姗姗 路榕 黄宇烽 李晓军 戈一峰 崔英霞 姚兵 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期183-188,共6页

目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反... 目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅹ型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P<0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD的表达分别升高55%、69%和59%(P<0.05),17β-HSD10升高了104%(P<0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P<0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P<0.05)和47%(P<0.01)。结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 睾丸间质细胞 胆固醇侧链断裂酶 17-羟甾类脱氢酶类

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膜联蛋白5对雄性SD大鼠睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响 被引量：4

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作者 林钗英 柳海燕 +3 位作者 陶晓倩 时姗姗 路榕 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2011年第4期340-345,共6页

目的研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid deh... 目的研究注射膜联蛋白5后雄性SD大鼠睾丸类固醇急性调节蛋白(Steroidogenic acute regulatory protein,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450 cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和3β-羟类固醇脱氢酶(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)表达的改变,初步探讨膜联蛋白5影响睾酮分泌的机制。方法将20只SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组又分为7.5μg/kg组、15μg/kg组和30μg/kg组,每组5只。对照组大鼠腹腔注射等量的pH8.0 Tris-HCl,实验组腹腔注射不同剂量的膜联蛋白5,1次/d,连续20 d。用RT-PCR方法分别检测对照组和各实验组SD大鼠睾丸组织中睾酮合成相关的StAR、P450scc和3β-HSD mRNA的表达变化,并用Western blot方法检测以上3种物质蛋白质水平的变化。结果与对照组相比,在mRNA水平上,7.5μg/kg组和15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc mRNA表达分别增加了25.9%[(0.68±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01]和27.8%[(0.69±0.04)vs(0.54±0.03),P<0.01];3β-HSD mRNA表达分别升高了32.9%[(1.05±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01]和53.2%[(1.21±0.07)vs(0.79±0.10),P<0.01];而30μg/kg组表达差异无统计学意义;在蛋白水平上,15μg/kg组大鼠睾丸组织P450 scc蛋白表达提高了34.2%[(0.37±0.04)vs(0.28±0.02),P<0.01],7.5μg/kg组和15μg/kg组的3β-HSD表达也分别增加了14.7%[(1.53±0.10)vs(1.34±0.05),P<0.01]和24.4%[(1.67±0.14)vs(1.34±0.05),P<0.01];而StAR的表达无论在转录水平还是在蛋白水平上,较对照组差异均无统计学意义。结论膜联蛋白5可通过调节P450scc与3β-HSD的表达来调节睾酮合成。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 类固醇急性调节蛋白 胆固醇侧链裂解酶 3β-羟类固醇脱氢酶

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FISH技术在鉴别上尿路尿道上皮癌与良性疾病引起血尿中的作用 被引量：3

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作者 王建东 吴晋蓉 +3 位作者 程文 王璇 时姗姗 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1091-1093,1097,共4页

目的探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)作为非创性分子检查方法,用于鉴别上尿路尿道上皮癌(upper urinary tract urothelial carcinoma,UUT-UC)和良性泌尿系统疾病引起的血尿。方法运用一组荧光标记的DNA... 目的探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)作为非创性分子检查方法,用于鉴别上尿路尿道上皮癌(upper urinary tract urothelial carcinoma,UUT-UC)和良性泌尿系统疾病引起的血尿。方法运用一组荧光标记的DNA探针检测34例UUT-UC患者和33例泌尿系统良性疾病患者血尿脱落细胞中3、7、9、17号染色体异常,并对结果进行分析。结果 34例UUT-UC患者血尿中25例(73.5%)检测出染色体异常,而良性疾病患者血尿脱落细胞检测出2例发生染色体异常(6.1%)(P<0.001)。结论 FISH检测脱落细胞3、7、9、17染色体异常,可以作为一种非创性方法用于鉴别UUT-UC和良性疾病引起的血尿。 展开更多

关键词 尿道肿瘤 尿道上皮癌 血尿 荧光原位杂交

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