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马利兰和环磷酰胺预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征 被引量:4
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作者 施继敏 黄河 +9 位作者 蔡真 罗依 叶秀锦 张洁 李黎 何静松 谢万灼 郑伟燕 孟筱坚 林茂芳 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第2期122-126,共5页
目的:评估以马利兰和环磷酰胺(Bu-CY2)为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:对6例MDS患者进行非亲缘异基因骨髓移植术,以Bu-CY2为预处理方案,Bu 4 m g.k-g 1.d-1,-7 d^-4 d,CY 60 m g.k-g 1... 目的:评估以马利兰和环磷酰胺(Bu-CY2)为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:对6例MDS患者进行非亲缘异基因骨髓移植术,以Bu-CY2为预处理方案,Bu 4 m g.k-g 1.d-1,-7 d^-4 d,CY 60 m g.k-g 1.-d 1,-3 d^-2 d。输入单个核细胞数(MNC)为3.38×108/kg(2.4×108/kg^4.6×108/kg),CD 34+细胞数5.81×106/kg(1.2×106/kg^8.5×106/kg),粒-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)数2.88×105/kg(1.61×105/kg^4.56×105/kg)。以霉酚酸酯加环孢素A(C sA)和短程氨甲蝶呤(MTX)预防移植物抗宿主病,前列腺素E1脂质微球预防肝静脉阻塞病。结果:6例患者中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间为18 d(13~21 d),血小板≥20×109/L的中位时间为21 d(13~24 d)。经DNA短串联重复序列多态性分析和染色体检查,均为供者骨髓植活。早期死亡率为0,移植后随访时间为27个月(6~60个月)。目前实际无病生存6例,缓解期实际生存率100%。结论:以Bu-CY2为预处理方案的非亲缘异基因骨髓移植是治疗MDS的有效方法。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征/治疗 骨髓移植/方法 环磷酰胺/投药和剂量 白消安/投药和剂量 非亲缘供者
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端粒重复序列结合因子在肾脏肿瘤中的表达水平 被引量:3
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作者 施继敏 丁伟 +3 位作者 黄河 张志根 汤立旦 林茂芳 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期496-499,508,共5页
目的 :研究 TRF1蛋白在肾脏恶性肿瘤及相应癌旁组织中的表达水平。方法 :定量分析肾组织中 TRF1蛋白的表达水平 ,应用经倍比稀释的 TRF13 3 -2 77纯化蛋白作为定量标准 ,建立了以抗 TRF13 3 -2 77单抗作定量 Wes-tern- blot的方法 ,并... 目的 :研究 TRF1蛋白在肾脏恶性肿瘤及相应癌旁组织中的表达水平。方法 :定量分析肾组织中 TRF1蛋白的表达水平 ,应用经倍比稀释的 TRF13 3 -2 77纯化蛋白作为定量标准 ,建立了以抗 TRF13 3 -2 77单抗作定量 Wes-tern- blot的方法 ,并以该方法检测 TRF1蛋白在组织中的表达水平。结果 :32例肾肿瘤样本均不同程度的表达TRF1蛋白质 ,均值为 2 .4 2 8± 1.35 2 μg/ μl,癌旁自身对照组织 TRF1的表达水平为 3.6 11± 1.92 2 μg/ μl(t=5 .776 ,P<0 .0 0 1)。肿瘤组织内 TRF13 3 -2 77表达水平较相应癌旁组织显著降低 ,并与肿瘤的恶性程度相关 ,差异具有显著性意义 (P<0 .0 1)。结论 :TRF1蛋白在肾脏恶性肿瘤中的表达明显减低 ,并与肿瘤恶性程度呈负相关。 展开更多
关键词 端粒 肾肿瘤 肾癌 人端粒重复序列结合因子 单克隆抗体 WESTERN-BLOT 蛋白表达水平
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一个可能的与人端粒结合因子相互作用蛋白Tara的分离和克隆 被引量:5
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作者 蓝建平 罗依 +7 位作者 朱园园 孙洁 来晓瑜 李静远 余建 施继敏 林茂芳 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期486-490,共5页
目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,... 目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,并构建 p EGFP- C2真核表达载体 ;核苷酸测序和 Western blot验证目的基因序列和表达载体。结果 :从 TRF1免疫沉淀复合物中分离出了 Tara蛋白 ;人 c DNA文库中 PCR扩增所得产物为 1.7kb,与 Tara基因 CDS序列同源性为 99.9% ;GFP/ Tara融合蛋白约 10 0 k D,Tara在间期 He La细胞中弥散表达于胞浆 ,而有丝分裂细胞则定位于整个细胞。结论 :Tara是一个可能的 TRF1相互作用蛋白 ,其作用机制需进一步实验研究。 展开更多
关键词 端粒 蛋白质类/分析 端粒结合因子 基因 Tara 免疫共沉淀 质谱
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格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植治疗慢性髓性白血病 被引量:3
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作者 罗依 潘杰 +7 位作者 施继敏 谭亚敏 韩晓雁 来晓瑜 朱晓黎 蔡真 林茂芳 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期343-347,共5页
目的:探讨格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植在治疗慢性髓性白血病(CML)中的作用。方法:9例CML患者(5例CP,2例为AP,2例为BP),男性,在清髓性异基因造血干细胞移植前、后口服格列卫(300600mg/d)治疗,移植预处理方案为Bu... 目的:探讨格列卫联合清髓性异基因造血干细胞移植在治疗慢性髓性白血病(CML)中的作用。方法:9例CML患者(5例CP,2例为AP,2例为BP),男性,在清髓性异基因造血干细胞移植前、后口服格列卫(300600mg/d)治疗,移植预处理方案为BuCy2:Bu16mg/kg,口服(6例)或12.8mg/kg,静脉滴注(3例)加CTX120mg/kg。供受者HLA配型完全相合,其中亲缘移植7例,无关供者移植2例。以霉酚酸酯联合环孢菌素A和短程MTX预防aGVHD。移植物有核细胞数5.3(3.7~8.7)×10^8/kg,CD34^+细胞数4.8(2.8~8.5)×10^6/kg,粒一巨噬细胞集落形成的单位数2.8(1.9~5.3)×10^5/kg。结果:9例CML患者在移植前,经格列卫治疗后获完全血液学缓解(HCR)。移植后中性粒细胞〉0.5×10^9/L中位时间12(8~26)天,血小板计数〉20×10^9/L中位时间为20(8~25)天。移植后并发Ⅰ/Ⅱ度aGVHD3例,cGVHD4例,无早期死亡。移植后30天9例患者均获完全细胞遗传学缓解(CCR),STR检测供髓完全植入。中位随访31(7~34)月,1例治疗前CML急变患者移植后4月因复发死亡,其余病患均获完全分子学缓解(CMR),总体无病生存率88.9%。结论:清髓性异基因造血干细胞移植前、后联合格列卫治疗CML,是一种安全有效的治疗方法,值得临床进一步推广。 展开更多
关键词 白血病 髓性 慢性/治疗 造血干细胞移植 清髓性 异基因造血干细胞移植 格列卫
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Pin1在恶性血液病细胞和细胞周期中的表达 被引量:3
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作者 朱园园 施继敏 +7 位作者 孙洁 蓝建平 来晓瑜 李静远 余建 谭亚敏 林茂芳 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期500-503,514,共5页
目的 :研究 Pin1(肽酰脯胺酰顺反式易构酶 )在髓系、淋系 10种恶性血液病细胞株中的表达情况以及其与不同细胞周期的关系。方法 :利用 Realtime- PCR检测血液病细胞株的 Pin1表达 ,同时用 Thymidine和 Nocoda-zole将细胞阻断在不同的细... 目的 :研究 Pin1(肽酰脯胺酰顺反式易构酶 )在髓系、淋系 10种恶性血液病细胞株中的表达情况以及其与不同细胞周期的关系。方法 :利用 Realtime- PCR检测血液病细胞株的 Pin1表达 ,同时用 Thymidine和 Nocoda-zole将细胞阻断在不同的细胞周期 ,用 Realtime- PCR及 Western Blot的方法 ,检测 Pin1的 m RNA和蛋白的表达水平。结果 :Pin1在恶性血液病细胞株中 m RNA的表达明显高于正常人骨髓单个核细胞的表达 (F=10 .5 0 8,P<0 .0 1) ,其在髓系血液病细胞株和淋系恶性血液病细胞株中的表达均较正常人骨髓单个核细胞明显增高 (分别为 F= 13.5 84 ,P<0 .0 1;F=5 .339,P<0 .0 5 )。 Pin1在 G1期 m RNA的表达水平显著高于 S期 (F=4 0 .5 72 ,P<0 .0 5 ) ,S期与 M期比较没有明显差异 (F=8.30 9,P>0 .0 5 )。但在蛋白水平上来看 Pin1的变化不明显。结论 :Pin1的 m R-NA在恶性血液病细胞中呈高表达 ,其表达水平与细胞周期有关 ,其中以 G1期为最高 ,S期最低。 展开更多
关键词 白血病/病理学 基因 PIN1 细胞周期
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人端粒结合因子在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位与周期性表达的研究 被引量:2
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作者 蓝建平 来晓瑜 +7 位作者 朱园园 孙洁 李静远 余建 谭亚敏 施继敏 林茂芳 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期475-480,495,共7页
目的 :研究人端粒结合因子 1(telomere repeatbinding factor 1,TRF1)在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位以及在细胞周期中的表达。方法 :应用分子克隆技术扩增 TRF1基因全长 (TRF1FL )和 N、C端缺失突变体(TRF1ΔNC)序列 ,并克隆入 p EGFP... 目的 :研究人端粒结合因子 1(telomere repeatbinding factor 1,TRF1)在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位以及在细胞周期中的表达。方法 :应用分子克隆技术扩增 TRF1基因全长 (TRF1FL )和 N、C端缺失突变体(TRF1ΔNC)序列 ,并克隆入 p EGFP- C2真核表达载体 ,表达绿色荧光 (GFP)融合蛋白 ;将含目的基因质粒转染端粒酶阳性 Hela细胞和端粒酶阴性 WI38- 2 RA细胞 ,Western Blot验证目的蛋白分子量 ,荧光显微镜观察 TRF1在间期细胞和染色体的定位 ;利用药物阻断 He La细胞于不同周期 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,半定量 Western Blot检测 TRF1在不同细胞周期中的表达。结果 :TRF1FL、TRF1ΔNC序列长度分别为 1.3kb和 0 .9kb;GFP融合TRF1FL、TRF1ΔNC分子量大小分别为 80 k D和 6 0 k D。TRF1FL在间期细胞胞核内呈点状表达 ,在染色体则表达于染色体未端 ,TRF1ΔNC在细胞核内呈弥散性表达 ;TRF1在端粒酶阴性细胞中与早幼粒细胞白血病小体(promyelocytic leukemia body,PML )共定位 ,在端粒阳性细胞中则没有共定位。TRF1在 He La细胞中以 M期表达量最高 ,G1/ S表达最低 ,M期表达量是 G1/ S期的 3.9倍 (t=12 .92 ,P<0 .0 1)。结论 :TRF1在端粒酶阳性和阴性细胞中有不同的定位模式 ,在 He L a细胞中 展开更多
关键词 端粒 端粒结合因子 基因 TRF1 细胞周期 表达
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霉酚酸诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及机制 被引量:1
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作者 朱晓黎 李黎 +3 位作者 施继敏 郑伟燕 余建 黄河 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第4期339-343,共5页
目的:研究霉酚酸(Mycophenolicacid,MPA)诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及其机制。方法:光学显微镜及透射电镜观察细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪分析细胞AnnexinV表达、周期变化及caspase-3... 目的:研究霉酚酸(Mycophenolicacid,MPA)诱导T淋巴细胞白血病细胞株Molt-4凋亡的作用及其机制。方法:光学显微镜及透射电镜观察细胞凋亡的形态学特征,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂,流式细胞仪分析细胞AnnexinV表达、周期变化及caspase-3活性。人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji作为对照。结果:MPA诱导Molt-4细胞的凋亡率与作用浓度和时间成正比;细胞被阻滞于S期。MPA作用24h后细胞内caspase-3活性增高,呈浓度依赖性。MPA不诱导Raji细胞凋亡。结论:MPA可诱导Molt-4细胞凋亡,其作用可能与激活caspase-3有关。 展开更多
关键词 霉酚酸/药理学 白血病 淋巴细胞/病理学 细胞凋亡 MOLT-4 CASPASE-3
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异基因造血干细胞移植植入失败研究进展 被引量:2
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作者 曹丽芹 施继敏 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期651-658,共8页
在过去20年里,随着医学技术和新药研制的发展,以及移植物抗宿主病疗效的提高,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的预后得到了极大的改善,但植入失败仍是allo-HSCT术后面临的少见而严重的并发症。HLA不相合、病毒感染、供者高龄、原发病... 在过去20年里,随着医学技术和新药研制的发展,以及移植物抗宿主病疗效的提高,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的预后得到了极大的改善,但植入失败仍是allo-HSCT术后面临的少见而严重的并发症。HLA不相合、病毒感染、供者高龄、原发病未缓解、骨髓造血微环境损伤、ABO血型不合、T细胞去除术、减剂量预处理方案、有核细胞数较低等均是导致植入失败的危险因素。近年来随着半相合造血干细胞移植的开展,供者特异性抗体在半相合植入失败中的作用引起关注。本文就近年来相关移植失败的机制、影响因素及其预防措施的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 HLA抗原/分析 抗体特异性 活体供者 移植物排斥 危险因素 综述
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一种新型的减速器联接装置
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作者 施继敏 《港口装卸》 北大核心 1993年第6期41-42,共2页
关键词 起重机 减速器 联接装置
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