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七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
1
作者
施灵玲
程燕咏
张磊
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1115-1123,共9页
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷...
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷的情况,将七氟烷组细胞使用3%七氟烷连续处理3 d,每日1次,每次处理2 h。OPC分化成熟为少突胶质细胞后,使用免疫荧光染色和蛋白质印迹法(Western blotting)检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和髓鞘关联糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)的表达情况。采用细胞增殖实验(BrdU、Ki67染色)、细胞存活率实验(CCK8)检测七氟烷对OPC增殖能力和少突胶质细胞存活率的影响。采用Western blotting检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白含量。使用慢病毒转染技术,在OPC内过表达YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein F1,YTHDF1),后采用CCK8检测细胞增殖和存活情况。结果·免疫荧光结果提示,反复暴露于七氟烷会导致表达成熟髓鞘表面标志物(MBP、MAG)的原代少突胶质细胞数量减少;Western blotting结果表明,多次七氟烷处理导致原代OPC中caspase-3表达上调;CCK8结果表明,随着七氟烷处理次数的增加,原代OPC的存活率下降;然而,BrdU、Ki67染色结果显示,原代OPC在七氟烷处理后增殖能力增强。此外,过表达YTHDF1可以部分改善多次七氟烷处理而导致的原代OPC存活率下降(均P<0.05)。结论·多次七氟烷处理损伤原代少突胶质细胞的成髓鞘能力和存活率,表现为部分原代OPC凋亡;同时七氟烷处理代偿性提高了存活的原代OPC的增殖能力。
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关键词
七氟烷
少突胶质细胞
髓鞘
细胞增殖
凋亡
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职称材料
七氟烷对幼年猕猴前额叶皮质基因表达的影响
2
作者
施灵玲
张磊
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023年第4期371-376,共6页
目的:分析研究猕猴多次七氟烷麻醉后的差异表达基因。方法:猕猴在出生后第7天、第21天和第35天接受了3次七氟烷麻醉暴露。在第3次七氟烷麻醉后立即收集前额叶皮层进行RNA测序分析。结果:转录组的差异表达基因分析显示,上调基因主要富集...
目的:分析研究猕猴多次七氟烷麻醉后的差异表达基因。方法:猕猴在出生后第7天、第21天和第35天接受了3次七氟烷麻醉暴露。在第3次七氟烷麻醉后立即收集前额叶皮层进行RNA测序分析。结果:转录组的差异表达基因分析显示,上调基因主要富集在胚胎发育的正向调控、牙齿发育、胚胎前肢的形态发生中,而下调基因主要富集在对转录激活因子活性、RNA聚合酶Ⅱ转录调控区序列特异性结合和MAPK信号通路的调节中。结论:通过RNA测序技术分析研究猕猴多次七氟烷麻醉后前额叶皮层的差异表达基因,为之后研究七氟烷麻醉引起的神经毒性研究筛选出关键基因,对全身麻醉机制研究提供有力依据。
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关键词
麻醉
七氟烷
猕猴
RNA测序
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职称材料
题名
七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
1
作者
施灵玲
程燕咏
张磊
机构
上海交通大学医学院附属第九人民医院麻醉科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期1115-1123,共9页
基金
国家自然科学基金(82171173,82201321)
上海市“科技创新行动计划”启明星项目(扬帆专项)(22YF1422500)
上海交通大学医学院“双百人”项目(20191818)。
文摘
目的·探索多次七氟烷处理对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响。方法·提取出生当日大鼠皮层的少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)并进行体外培养。细胞分为对照组和七氟烷处理组。为了模拟临床使用七氟烷的情况,将七氟烷组细胞使用3%七氟烷连续处理3 d,每日1次,每次处理2 h。OPC分化成熟为少突胶质细胞后,使用免疫荧光染色和蛋白质印迹法(Western blotting)检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)和髓鞘关联糖蛋白(myelin-associated glycoprotein,MAG)的表达情况。采用细胞增殖实验(BrdU、Ki67染色)、细胞存活率实验(CCK8)检测七氟烷对OPC增殖能力和少突胶质细胞存活率的影响。采用Western blotting检测半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的蛋白含量。使用慢病毒转染技术,在OPC内过表达YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTH N6-methyladenosine RNA binding protein F1,YTHDF1),后采用CCK8检测细胞增殖和存活情况。结果·免疫荧光结果提示,反复暴露于七氟烷会导致表达成熟髓鞘表面标志物(MBP、MAG)的原代少突胶质细胞数量减少;Western blotting结果表明,多次七氟烷处理导致原代OPC中caspase-3表达上调;CCK8结果表明,随着七氟烷处理次数的增加,原代OPC的存活率下降;然而,BrdU、Ki67染色结果显示,原代OPC在七氟烷处理后增殖能力增强。此外,过表达YTHDF1可以部分改善多次七氟烷处理而导致的原代OPC存活率下降(均P<0.05)。结论·多次七氟烷处理损伤原代少突胶质细胞的成髓鞘能力和存活率,表现为部分原代OPC凋亡;同时七氟烷处理代偿性提高了存活的原代OPC的增殖能力。
关键词
七氟烷
少突胶质细胞
髓鞘
细胞增殖
凋亡
Keywords
sevoflurane
oligodendrocyte
myelin
cell proliferation
apoptosis
分类号
R614.2 [医药卫生—麻醉学]
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题名
七氟烷对幼年猕猴前额叶皮质基因表达的影响
2
作者
施灵玲
张磊
机构
上海交通大学医学院附属第九人民医院麻醉科
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023年第4期371-376,共6页
基金
国家自然科学基金(81970990)。
文摘
目的:分析研究猕猴多次七氟烷麻醉后的差异表达基因。方法:猕猴在出生后第7天、第21天和第35天接受了3次七氟烷麻醉暴露。在第3次七氟烷麻醉后立即收集前额叶皮层进行RNA测序分析。结果:转录组的差异表达基因分析显示,上调基因主要富集在胚胎发育的正向调控、牙齿发育、胚胎前肢的形态发生中,而下调基因主要富集在对转录激活因子活性、RNA聚合酶Ⅱ转录调控区序列特异性结合和MAPK信号通路的调节中。结论:通过RNA测序技术分析研究猕猴多次七氟烷麻醉后前额叶皮层的差异表达基因,为之后研究七氟烷麻醉引起的神经毒性研究筛选出关键基因,对全身麻醉机制研究提供有力依据。
关键词
麻醉
七氟烷
猕猴
RNA测序
Keywords
anesthesia
sevoflurane
macaques
RNA sequencing
分类号
R614 [医药卫生—麻醉学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
七氟烷对原代少突胶质细胞增殖和分化的影响
施灵玲
程燕咏
张磊
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
七氟烷对幼年猕猴前额叶皮质基因表达的影响
施灵玲
张磊
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2023
0
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