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超声波处理对蜂王浆蛋白功能和结构的影响 被引量:7
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作者 王艺 刘帆 +3 位作者 臧梦璐 方诗文 李璇 薛峰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第10期50-56,共7页
探讨不同功率的超声波处理(20 kHz,200、400、600 W)对蜂王浆蛋白溶解性、乳化性、起泡性、水解度以及表面疏水性的影响。同时,通过对王浆蛋白二级结构、三级结构和微观结构的分析,探讨超声波处理改善蜂王浆蛋白功能特性的机制。结果表... 探讨不同功率的超声波处理(20 kHz,200、400、600 W)对蜂王浆蛋白溶解性、乳化性、起泡性、水解度以及表面疏水性的影响。同时,通过对王浆蛋白二级结构、三级结构和微观结构的分析,探讨超声波处理改善蜂王浆蛋白功能特性的机制。结果表明,与未处理组相比较,蜂王浆蛋白经过400 W处理后,其溶解度增加10.90%,乳化活性增加67.18%,乳化稳定性增加15.87%,起泡性增加60.00%,起泡稳定性增加118.75%,水解度增加83.33%,表面疏水性增加18.65%。蛋白质的二、三级结构分析显示,该处理条件可以诱导蛋白质发生去折叠化。微观结构分析显示,蛋白质经400 W处理后,其表面较为粗糙,碎片化程度增加。这些结果表明,超声波处理所诱导的蛋白质构象的变化,是其功能特性得以改善的主要原因。 展开更多
关键词 蜂王浆蛋白质 超声波 功能特性 结构
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牛结核杆菌MPB70-ESAT-6融合蛋白的原核表达及抗原反应性分析 被引量:1
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作者 姜秀云 董阳 +5 位作者 包艳红 张建宁 方诗文 金海玲 王宁 马红霞 《中国兽药杂志》 2019年第3期7-12,共6页
为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、... 为增强单个蛋白的抗原性,利用(Gly4Ser)3柔性连接肽将牛结核杆菌MPB70和ESAT-6融合。采用重叠延伸PCR技术将牛结核杆菌mpb70与esat-6基因连接,获得融合基因mpb70-esat-6,连接至T-Vector pMD19中,获得克隆质粒pMD-70-esat-6。经Bam HⅠ、EcoRⅠ酶切、纯化,并与p ET28a(+)载体连接,构建了pET-70-esat-6重组表达质粒。SDS-PAGE发现,在27.2 ku处表达了融合蛋白MPB70-ESAT-6,Western blotting证实,MPB70-ESAT-6与牛结核阳性血清反应性良好。MPB70-ESAT-6融合蛋白的研究为牛结核病诊断抗原及相关疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 牛结核杆菌 mpb70基因 esat-6基因 融合蛋白 原核表达
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