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激活巨噬细胞Toll样受体7对肺动脉高压中肺动脉平滑肌增殖与迁移的影响
1
作者
张若柳
方学升
+1 位作者
席照青
包明威
《中国医药导报》
2025年第2期1-6,24,共7页
目的探索激活巨噬细胞的Toll样受体7(TLR7)对肺动脉高压(PH)大鼠肺动脉平滑肌(PASMC)增殖与迁移的影响及其机制。方法动物实验:12只雄性标准体重大鼠适应性喂养1周后,使用随机数字表法均分为两组,PH组腹腔注射野百合碱60 mg/kg,对照组...
目的探索激活巨噬细胞的Toll样受体7(TLR7)对肺动脉高压(PH)大鼠肺动脉平滑肌(PASMC)增殖与迁移的影响及其机制。方法动物实验:12只雄性标准体重大鼠适应性喂养1周后,使用随机数字表法均分为两组,PH组腹腔注射野百合碱60 mg/kg,对照组腹腔注射生理盐水60 mg/kg,4周后取肺组织行免疫荧光染色。细胞实验:取健康雄性标准体重大鼠的原代PASMC,其单独培养为PASMC组,与RAW264.7细胞共培养为co-culture组,与激活TLR7的RAW264.7细胞共培养为R848+co-culture组。α-SMA免疫荧光染色鉴定PASMC;PASMC或RAW264.7细胞各分为四组,分别用0、0.1、1.0、10.0μg/ml的R848处理24 h或48 h,采用CCK8法检测细胞增殖;划痕实验检测迁移;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67表达;PCR检测CD68、CD86、CD206、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10转录情况。结果大鼠免疫荧光染色显示,PH大鼠肺血管周围TLR7+巨噬细胞增多。CCK8与迁移实验提示,co-culture组与R848+co-culture组细胞增殖活性与迁移能力均高于PASMC组(P<0.05),R848+co-culture组高于co-culture组(P<0.01)。Western blot法与PCR法检测结果显示,co-culture组与R848+co-culture组PASMC中PCNA及Ki67 mRNA及蛋白表达均高于PASMC组(P<0.05),R848+co-culture组高于co-culture组(P<0.01)。PCR结果提示,0.1μg/ml R848处理巨噬细胞,代表M1表型的CD86、促炎性细胞因子TNF-α及IL-6转录水平高于0μg/ml R848处理巨噬细胞,抑炎性细胞因子IL-10转录低于0μg/ml R848处理巨噬细胞(P<0.05)。结论在PH病理机制中,激活巨噬细胞TLR7可促进PASMC的增殖与迁移,其潜在机制可能与巨噬细胞向M1型分化及促炎性细胞因子TNF-α、IL-6转录增多有关。
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关键词
TOLL样受体7
巨噬细胞
肺动脉平滑肌细胞
肺动脉高压
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题名
激活巨噬细胞Toll样受体7对肺动脉高压中肺动脉平滑肌增殖与迁移的影响
1
作者
张若柳
方学升
席照青
包明威
机构
武汉大学人民医院心内科
出处
《中国医药导报》
2025年第2期1-6,24,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(81970438)。
文摘
目的探索激活巨噬细胞的Toll样受体7(TLR7)对肺动脉高压(PH)大鼠肺动脉平滑肌(PASMC)增殖与迁移的影响及其机制。方法动物实验:12只雄性标准体重大鼠适应性喂养1周后,使用随机数字表法均分为两组,PH组腹腔注射野百合碱60 mg/kg,对照组腹腔注射生理盐水60 mg/kg,4周后取肺组织行免疫荧光染色。细胞实验:取健康雄性标准体重大鼠的原代PASMC,其单独培养为PASMC组,与RAW264.7细胞共培养为co-culture组,与激活TLR7的RAW264.7细胞共培养为R848+co-culture组。α-SMA免疫荧光染色鉴定PASMC;PASMC或RAW264.7细胞各分为四组,分别用0、0.1、1.0、10.0μg/ml的R848处理24 h或48 h,采用CCK8法检测细胞增殖;划痕实验检测迁移;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67表达;PCR检测CD68、CD86、CD206、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10转录情况。结果大鼠免疫荧光染色显示,PH大鼠肺血管周围TLR7+巨噬细胞增多。CCK8与迁移实验提示,co-culture组与R848+co-culture组细胞增殖活性与迁移能力均高于PASMC组(P<0.05),R848+co-culture组高于co-culture组(P<0.01)。Western blot法与PCR法检测结果显示,co-culture组与R848+co-culture组PASMC中PCNA及Ki67 mRNA及蛋白表达均高于PASMC组(P<0.05),R848+co-culture组高于co-culture组(P<0.01)。PCR结果提示,0.1μg/ml R848处理巨噬细胞,代表M1表型的CD86、促炎性细胞因子TNF-α及IL-6转录水平高于0μg/ml R848处理巨噬细胞,抑炎性细胞因子IL-10转录低于0μg/ml R848处理巨噬细胞(P<0.05)。结论在PH病理机制中,激活巨噬细胞TLR7可促进PASMC的增殖与迁移,其潜在机制可能与巨噬细胞向M1型分化及促炎性细胞因子TNF-α、IL-6转录增多有关。
关键词
TOLL样受体7
巨噬细胞
肺动脉平滑肌细胞
肺动脉高压
Keywords
Toll-like receptor 7
Macrophage
Pulmonary artery smooth muscle cells
Pulmonary hypertension
分类号
R543.2 [医药卫生—心血管疾病]
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作者
出处
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被引量
操作
1
激活巨噬细胞Toll样受体7对肺动脉高压中肺动脉平滑肌增殖与迁移的影响
张若柳
方学升
席照青
包明威
《中国医药导报》
2025
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