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马属动物克隆技术:从实验室到产业应用: 1; 作者刘琦任宏 +6 位作者温鑫才文道力玛伊敏娜赵比力格斯琴何千倩格日乐其木格《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期52-59,共8页; 随着我国经济的快速发展,马产业在文化、体育、生态旅游和食品领域中崭露头角。然而,马属动物的繁殖面临“三低难题”,即自然受孕率低、胚胎存活率低和幼驹成活率低,并且通常为单胎繁殖,这些独特的生物学特性严重制约了良种繁育的进程... 展开更多; 关键词马驴骡体细胞克隆卵母细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

马脐静脉内皮细胞分离培养及其功能验证: 2; 作者赵比力格温鑫 +7 位作者伊敏娜才文道力玛神英超斯琴照伦其其格任宏芒来格日乐其木格《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2953-2962,共10页; 【目的】建立一种简便且高效的体外马脐静脉内皮细胞(equine umbilical vein endothelial cells,eUVECs)分离和培养方法,并提供一个可靠的细胞模型,用于研究马的血管生成功能。【方法】在无菌条件下,从马脐带中分离静脉,并用PBS液彻底... 展开更多; 关键词马脐静脉内皮细胞 Ⅰ型胶原酶消化法培养鉴定 TNF-α 血管新生; 在线阅读下载PDF 职称材料

睾丸支持细胞的功能、分离纯化及鉴定研究进展被引量：8: 3; 作者伊敏娜才文道力玛 +6 位作者陶力王希生神英超杜明任宏芒来格日乐其木格《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2947-2956,共10页; 支持细胞对维持精子形成过程中的微环境起决定作用,它可以通过分泌功能、细胞间连接形成的血睾屏障功能以及吞噬功能等来促进精子的形成过程,其发育异常会导致不同程度的雄性生殖缺陷。基于支持细胞在雄性动物生殖过程中的作用,体外培... 展开更多; 关键词支持细胞功能分离纯化体外培养鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

蒙古马胎儿成纤维细胞永生化细胞体系建立的研究被引量：1: 4; 作者田书岳神英超 +7 位作者王希生王敏伊敏娜才文道力玛陶力赵毕力格芒来格日乐其木格《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期46-57,共12页; 【目的】试验旨在建立永生化蒙古马胎儿成纤维细胞(equine fetal fibroblasts,EFFs)系,为马繁殖与发育生物学研究提供参考。【方法】采用1 mg/mL胶原酶Ⅳ消化分离原代EFFs,利用表达人端粒酶逆转录亚基(hTERT)和潮霉素B抗性的pLV-hTERT-I... 展开更多; 关键词蒙古马马胎儿成纤维细胞(EFFs) 永生化人端粒酶逆转录亚基(hTERT) 细胞增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

马卵巢石蜡切片制作体系的优化被引量：1: 5; 作者陶力神英超 +6 位作者阿鲁斯伊敏娜才文道力玛王希生田书岳芒来格日乐其木格《黑龙江动物繁殖》 2021年第6期4-9,共6页; 为了建立和优化马卵巢石蜡切片制作体系,为完善马属动物繁殖理论知识奠定基础,试验以2~3岁蒙古马为研究对象,选择6匹健康母马卵巢组织,对比了不同固定方法、组织脱水方法、浸蜡方法及苏木精-伊红(Hematoxylin and Eosin,H.E.)染色体系... 展开更多; 关键词马卵巢切片制作石蜡切片 H.E.染色; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马属动物克隆技术:从实验室到产业应用: 1; 作者刘琦任宏温鑫才文道力玛伊敏娜赵比力格斯琴何千倩格日乐其木格; 机构农业农村部马属动物种业创新重点实验室内蒙古自治区马属动物科学研究与技术创新重点实验室内蒙古农业大学动物科学学院马属动物研究中心内蒙古农业大学职业技术学院; 出处《黑龙江动物繁殖》 2025年第2期52-59,共8页; 基金内蒙古自治区教育厅一流学科科研专项(YLXKZX-NND-019)。; 文摘随着我国经济的快速发展,马产业在文化、体育、生态旅游和食品领域中崭露头角。然而,马属动物的繁殖面临“三低难题”,即自然受孕率低、胚胎存活率低和幼驹成活率低,并且通常为单胎繁殖,这些独特的生物学特性严重制约了良种繁育的进程。体细胞克隆作为一种有效的繁育技术,能够为马产业的发展带来显著提升。文章主要综述了体细胞克隆的一般流程、体细胞克隆对马属动物命运的改变、体细胞克隆现存挑战及未来展望,以期为国内马属动物体细胞克隆的发展提供理论参考。; 关键词马驴骡体细胞克隆卵母细胞; Keywords horse donkey mule somatic cell cloning oocytes; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马脐静脉内皮细胞分离培养及其功能验证: 2; 作者赵比力格温鑫伊敏娜才文道力玛神英超斯琴照伦其其格任宏芒来格日乐其木格; 机构内蒙古农业大学动物科学学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2953-2962,共10页; 基金内蒙古自治区自然科学基金(2023SHZR0557) 内蒙古农业大学优秀博士引进人才科研启动项目(NDYB2022-42)。; 文摘【目的】建立一种简便且高效的体外马脐静脉内皮细胞(equine umbilical vein endothelial cells,eUVECs)分离和培养方法,并提供一个可靠的细胞模型,用于研究马的血管生成功能。【方法】在无菌条件下,从马脐带中分离静脉,并用PBS液彻底冲洗。使用0.2%Ⅰ型胶原酶对脐静脉进行消化25~30 min后,收集分离的eUVECs进行培养。每12 h使用倒置显微镜观察eUVECs的生长状况。使用CCK-8法测定第1代(P1)和P3代eUVECs在7 d内的D450 nm值,并绘制生长曲线。通过免疫荧光染色方法鉴定内皮细胞标记物CD31和CD34的表达情况。使用间充质干细胞成脂和成骨分化诱导试剂诱导eUVECs,以验证其是否具有分化特性。确定内皮细胞后,添加梯度上升浓度(5、10、15、20、25 ng/mL)的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激eUVECs,使用CCK-8法检测细胞活性,观察细胞形态变化。使用Matrigel法培养eUVECs,用ImageJ软件分析数据,并统计新生血管的4个指标:成管交叉点、成管长度、成管数和成管面积。寻找体外血管生成能力的最佳TNF-α刺激浓度。【结果】使用0.2%Ⅰ型胶原酶消化法分离的eUVECs 4~5 d内的汇合度达到90%。在倒置显微镜下观察,这些细胞生长良好并呈铺路石状排列。通过免疫荧光染色确认了CD31和CD34在eUVECs中的阳性表达;并且eUVECs表现出薄弱的成脂和成骨分化能力。在Matrigel法培养条件下,20 ng/mL TNF-α处理组的成管交叉点数、成管长度、成管数和成管面积等血管形成能力指标最高,且极显著高于对照组(P<0.01)。然而,在常规培养条件下,随着TNF-α浓度增加到15 ng/mL,eUVECs的增殖受到显著抑制甚至开始导致细胞的凋亡。【结论】Ⅰ型胶原酶脐带注满消化法能够成功分离培养出原代eUVECs,20 ng/mL TNF-α显著增强eUVECs体外血管生成能力,eUVECs可以作为体外研究血管生成的细胞模型。; 关键词马脐静脉内皮细胞 Ⅰ型胶原酶消化法培养鉴定 TNF-α 血管新生; Keywords horse umbilical vein endothelial cells typeⅠcollagenase digestion culture identification TNF-α angiogenesis; 分类号 S821.7 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名睾丸支持细胞的功能、分离纯化及鉴定研究进展被引量：8: 3; 作者伊敏娜才文道力玛陶力王希生神英超杜明任宏芒来格日乐其木格; 机构内蒙古农业大学动物科学学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2947-2956,共10页; 基金国家自然科学基金“mTOR通路对蒙古马血睾屏障建立的调控作用及其机制”(31860642) 内蒙古农业大学引进优秀博士第一层次资助项目(NDYB2016-01) +1 种基金内蒙古自治区科技计划“良种马高效繁育综合技术研发创新及推广示范”(2019GG242)。; 文摘支持细胞对维持精子形成过程中的微环境起决定作用,它可以通过分泌功能、细胞间连接形成的血睾屏障功能以及吞噬功能等来促进精子的形成过程,其发育异常会导致不同程度的雄性生殖缺陷。基于支持细胞在雄性动物生殖过程中的作用,体外培养高纯度支持细胞可成为研究睾丸两大核心功能—精子发生和性激素分泌功能相关调节机制重要的细胞模型。此外,体外培养睾丸支持细胞也可作为生殖毒理学等新兴热点领域的细胞模型,为评估和研究环境因素对雄性生殖的影响提供便利。因此,作者系统地归纳、总结了目前关于动物支持细胞生物功能的研究及常用的体外分离纯化、培养及鉴定方法,以期为利用动物支持细胞开展雄性生殖领域的研究提供参考。; 关键词支持细胞功能分离纯化体外培养鉴定; Keywords Sertoli cells function isolation and purification in vitro culture identification; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名蒙古马胎儿成纤维细胞永生化细胞体系建立的研究被引量：1: 4; 作者田书岳神英超王希生王敏伊敏娜才文道力玛陶力赵毕力格芒来格日乐其木格; 机构内蒙古农业大学动物科学学院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期46-57,共12页; 基金国家基金2019年联合基金(31961143025) 内蒙古自治区2021年度科技重大专项(2021ZD0018) +1 种基金内蒙古重大基金(2019ZD03) 国家自然基金项目(31960657)。; 文摘【目的】试验旨在建立永生化蒙古马胎儿成纤维细胞(equine fetal fibroblasts,EFFs)系,为马繁殖与发育生物学研究提供参考。【方法】采用1 mg/mL胶原酶Ⅳ消化分离原代EFFs,利用表达人端粒酶逆转录亚基(hTERT)和潮霉素B抗性的pLV-hTERT-IRES-hygro慢病毒感染EFFs,经潮霉素B筛选得到阳性细胞hTERT-EFFs,以第3代EFFs为对照,采用实时荧光定量PCR检测hTERT mRNA的表达水平,CCK-8法绘制生长曲线检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况。使用DNAMAN软件比对分析人、马、小鼠、牛、绵羊、猪多物种TERT核苷酸、蛋白和端粒酶RNA组分(TERC)序列相似性。【结果】原代EFFs在实验室培养体系下可传至17代,但第17代细胞发生了衰老。hTERT基因可成功转入EFFs,并至少稳定表达20代。然而hTERT-EFFs增殖能力显著低于EFFs(P<0.05),hTERT-EFFs凋亡早期细胞率显著高于EFFs(P<0.05)。细胞衰老检测结果表明,hTERT-EFFsβ-半乳糖苷酶染色呈阳性。序列相似性比对结果显示,马TERT与hTERT mRNA保守性较高,相似性为73.2%;马TERT与hTERT蛋白保守性较其他物种高,相似性为76.3%,表明马TERT与hTERT在结构和功能上是高度相似;马TERC与人TERC相似性较高,在进化树上位于同一分支,但马TERC与TERT的结合及与端粒酶活性相关的关键核苷酸中存在突变。【结论】单独过表达hTERT可以延长EFFs体外传代次数不超过30代,但仍不足以使蒙古马EFFs细胞高质量永生化,这可能与hTERT与eTERC不相容有关。; 关键词蒙古马马胎儿成纤维细胞(EFFs) 永生化人端粒酶逆转录亚基(hTERT) 细胞增殖; Keywords Mongolian horse equine fetal fibroblasts(EFFs) immortalization human telomerase reverse transcriptase(hTERT) cell proliferation; 分类号 S821 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马卵巢石蜡切片制作体系的优化被引量：1: 5; 作者陶力神英超阿鲁斯伊敏娜才文道力玛王希生田书岳芒来格日乐其木格; 机构内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区马属动物遗传育种与繁殖重点实验室/农业农村部马属动物遗传育种与繁殖科学观测实验站/内蒙古农业大学马属动物研究中心; 出处《黑龙江动物繁殖》 2021年第6期4-9,共6页; 基金内蒙古科技计划项目(209GG242) 内蒙古农业大学动物科学学院标志性成果专项资金项目(BZCG202112)。; 文摘为了建立和优化马卵巢石蜡切片制作体系,为完善马属动物繁殖理论知识奠定基础,试验以2~3岁蒙古马为研究对象,选择6匹健康母马卵巢组织,对比了不同固定方法、组织脱水方法、浸蜡方法及苏木精-伊红(Hematoxylin and Eosin,H.E.)染色体系对石蜡切片制作效果的影响。结果表明:大于0.5 cm卵巢组织片段、经过3种固定液均达不到有效支持后期石蜡切片制作的条件;马卵巢石蜡切片制作需组织片段小于0.5 cm并采用Bouin固定液进行75%酒精浸泡24 h→85%酒精浸泡1 h→95%浸泡酒精2 h→100%酒精2 h脱水;二甲苯透明剂中放置10 min×2次;纯蜡与二甲苯按1∶1比例混合并浸蜡40 min→纯蜡Ⅰ40 min→纯蜡Ⅱ0.05 Mpa真空浸蜡40 min条件,以此为制作马卵巢组织石蜡切片的最佳体系。; 关键词马卵巢切片制作石蜡切片 H.E.染色; Keywords horse ovary section preparation paraffin section H.E.staining; 分类号 S821.1 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	马属动物克隆技术:从实验室到产业应用	刘琦任宏温鑫才文道力玛伊敏娜赵比力格斯琴何千倩格日乐其木格	《黑龙江动物繁殖》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马脐静脉内皮细胞分离培养及其功能验证	赵比力格温鑫伊敏娜才文道力玛神英超斯琴照伦其其格任宏芒来格日乐其木格	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2024	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	睾丸支持细胞的功能、分离纯化及鉴定研究进展	伊敏娜才文道力玛陶力王希生神英超杜明任宏芒来格日乐其木格	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2021	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	蒙古马胎儿成纤维细胞永生化细胞体系建立的研究	田书岳神英超王希生王敏伊敏娜才文道力玛陶力赵毕力格芒来格日乐其木格	《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	马卵巢石蜡切片制作体系的优化	陶力神英超阿鲁斯伊敏娜才文道力玛王希生田书岳芒来格日乐其木格	《黑龙江动物繁殖》	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料