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新的人内源性逆转录病毒NP9基因的分子克隆与病毒蛋白表达
被引量:
1
1
作者
任跃忠
戴巧定
徐荣臻
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2005年第4期361-364,371,共5页
目的:研究新近发现的人内源性逆转录病毒NP9基因与自身免疫性疾病的相关性及其可能的作用机制,构建该基因的蛋白表达系统。方法:提取自身免疫性疾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的总RNA,利用RT-PCR技术,扩增NP9基因,然后将该片段进行T-...
目的:研究新近发现的人内源性逆转录病毒NP9基因与自身免疫性疾病的相关性及其可能的作用机制,构建该基因的蛋白表达系统。方法:提取自身免疫性疾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的总RNA,利用RT-PCR技术,扩增NP9基因,然后将该片段进行T-A克隆并测序鉴定,纯化回收后亚克隆于原核表达载体pQE30中,然后提取质粒,酶切鉴定;最后经IPTG诱导,原核表达重组子在M15宿主菌进行表达,并进行SDS-PAGE与Western印迹分析与鉴定。结果:应用RT-PCR技术,从系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的总RNA中扩增到一条大小约为250bp的片段,经T-A克隆与测序鉴定,证实此片段为NP9基因,具有一个完整的开放阅读框架;将pQE30-NP9重组子转化入宿主菌,用IPTG诱导菌体表达NP9重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western印迹技术鉴定证实:在相对分子量约9kD处见明显的病毒特异性的高表达条带。结论:已成功克隆了新的人内源性逆转录病毒NP9基因,并经IPTG诱导,在M15宿主菌中表达了相应的病毒蛋白,为进一步研究该逆转录病毒与自身免疫性疾病的相关性奠定基础。
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关键词
内源性逆转录病毒
基因
病毒
病毒NP9基因
克隆
分子
病毒蛋白表达
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职称材料
原发性干燥综合征的系统性损害浅析
被引量:
1
2
作者
康海英
戴巧定
宋欣伟
《实用中医内科杂志》
2006年第4期351-353,共3页
关键词
干燥综合征
系统性损害
分析
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职称材料
类风关Ⅰ号对佐剂性关节炎大鼠SP影响的实验研究
3
作者
康海英
宋欣伟
+1 位作者
张彦
戴巧定
《实用中医内科杂志》
2010年第8期15-17,共3页
[目的]以雷公藤多甙作为阳性药物对照组,观察中药类风关1号对佐剂型关节炎(AA)大鼠SP的影响。[方法]大鼠右侧后肢足跖部皮内注射完全弗氏佐剂诱导出从大鼠模型,经类风关Ⅰ号、雷公藤多甙治疗30天后,放射免疫法测定大鼠脊髓后角、血浆、...
[目的]以雷公藤多甙作为阳性药物对照组,观察中药类风关1号对佐剂型关节炎(AA)大鼠SP的影响。[方法]大鼠右侧后肢足跖部皮内注射完全弗氏佐剂诱导出从大鼠模型,经类风关Ⅰ号、雷公藤多甙治疗30天后,放射免疫法测定大鼠脊髓后角、血浆、膝关节滑膜中的SP含量。[结果]与雷公藤多甙比较,类风关Ⅰ号降低大鼠脊髓后角SP含量幅度较明显(P<0.05)。[结论]类风关Ⅰ号可能通过影响SP的合成和释放而治疗RA。
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关键词
类风湿关节炎
P物质
中医药疗法
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职称材料
题名
新的人内源性逆转录病毒NP9基因的分子克隆与病毒蛋白表达
被引量:
1
1
作者
任跃忠
戴巧定
徐荣臻
机构
浙江大学医学院附属第二医院
浙江省中医院
出处
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2005年第4期361-364,371,共5页
文摘
目的:研究新近发现的人内源性逆转录病毒NP9基因与自身免疫性疾病的相关性及其可能的作用机制,构建该基因的蛋白表达系统。方法:提取自身免疫性疾病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的总RNA,利用RT-PCR技术,扩增NP9基因,然后将该片段进行T-A克隆并测序鉴定,纯化回收后亚克隆于原核表达载体pQE30中,然后提取质粒,酶切鉴定;最后经IPTG诱导,原核表达重组子在M15宿主菌进行表达,并进行SDS-PAGE与Western印迹分析与鉴定。结果:应用RT-PCR技术,从系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的总RNA中扩增到一条大小约为250bp的片段,经T-A克隆与测序鉴定,证实此片段为NP9基因,具有一个完整的开放阅读框架;将pQE30-NP9重组子转化入宿主菌,用IPTG诱导菌体表达NP9重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western印迹技术鉴定证实:在相对分子量约9kD处见明显的病毒特异性的高表达条带。结论:已成功克隆了新的人内源性逆转录病毒NP9基因,并经IPTG诱导,在M15宿主菌中表达了相应的病毒蛋白,为进一步研究该逆转录病毒与自身免疫性疾病的相关性奠定基础。
关键词
内源性逆转录病毒
基因
病毒
病毒NP9基因
克隆
分子
病毒蛋白表达
Keywords
Endogenous retroviruses
Genes, viral
Retroviral NP9 gene
Cloning, molecular
Viral protein expression
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
原发性干燥综合征的系统性损害浅析
被引量:
1
2
作者
康海英
戴巧定
宋欣伟
机构
浙江中医药大学
浙江省中医院
出处
《实用中医内科杂志》
2006年第4期351-353,共3页
关键词
干燥综合征
系统性损害
分析
分类号
R593.2 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
类风关Ⅰ号对佐剂性关节炎大鼠SP影响的实验研究
3
作者
康海英
宋欣伟
张彦
戴巧定
机构
浙江省杭州市余杭区第五人民医院
出处
《实用中医内科杂志》
2010年第8期15-17,共3页
文摘
[目的]以雷公藤多甙作为阳性药物对照组,观察中药类风关1号对佐剂型关节炎(AA)大鼠SP的影响。[方法]大鼠右侧后肢足跖部皮内注射完全弗氏佐剂诱导出从大鼠模型,经类风关Ⅰ号、雷公藤多甙治疗30天后,放射免疫法测定大鼠脊髓后角、血浆、膝关节滑膜中的SP含量。[结果]与雷公藤多甙比较,类风关Ⅰ号降低大鼠脊髓后角SP含量幅度较明显(P<0.05)。[结论]类风关Ⅰ号可能通过影响SP的合成和释放而治疗RA。
关键词
类风湿关节炎
P物质
中医药疗法
Keywords
Rheumatoid arthritis
Psubstance
traditional Chinese medicine theropy
分类号
R285.6 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新的人内源性逆转录病毒NP9基因的分子克隆与病毒蛋白表达
任跃忠
戴巧定
徐荣臻
《浙江大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
2005
1
在线阅读
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职称材料
2
原发性干燥综合征的系统性损害浅析
康海英
戴巧定
宋欣伟
《实用中医内科杂志》
2006
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
类风关Ⅰ号对佐剂性关节炎大鼠SP影响的实验研究
康海英
宋欣伟
张彦
戴巧定
《实用中医内科杂志》
2010
0
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职称材料
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