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朱砂叶螨硒代谢通路基因筛选及硒磷酸合成酶TcSPS1的原核表达和特性分析
1
作者
张梦宇
戚翠翠
+1 位作者
胡佳
徐志峰
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期566-573,共8页
【目的】本研究旨在筛选朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus硒代谢通路的关键基因,探究其在朱砂叶螨硒代谢中的功能。【方法】使用基因克隆技术对8条朱砂叶螨硒代谢通路基因进行克隆;利用qPCR技术检测这些基因在不同浓度(0,5,20和50μmol...
【目的】本研究旨在筛选朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus硒代谢通路的关键基因,探究其在朱砂叶螨硒代谢中的功能。【方法】使用基因克隆技术对8条朱砂叶螨硒代谢通路基因进行克隆;利用qPCR技术检测这些基因在不同浓度(0,5,20和50μmol/L)亚硒酸钠(Na_(2)SeO_(3))处理的豇豆苗上饲养3 d的朱砂叶螨品系(短期硒饲养品系)雌成虫间以及朱砂叶螨普通品系(豇豆苗饲养)和长期硒饲养品系(20μmol/L Na_(2)SeO_(3)处理的豇豆苗饲养超1年)雌成虫间的表达量差异,并分析它们对硒诱导的表达响应;原核表达差异表达基因TcSPS1,并测定获得的重组蛋白生化特性。【结果】成功克隆了朱砂叶螨硒代谢通路的8条基因TcTxnrd1,TcTxnrd2,TcSPS1,TcSPS2,TcSPS2-1,TcSPS2-2,TcSG和TcPSTK。qPCR结果表明TcSPS1和TcTxnrd2在短期硒饲养和长期硒饲养朱砂叶螨品系中均上调表达,且TcSPS1的表达量变化与硒浓度变化密切相关。原核表达系统成功获得TcSPS1可溶性重组蛋白,测得其重组蛋白比活力为2.366±0.046 nmol/mg pro·min,Km和Vmax值分别为10.054±0.062μmol/L和29.633±1.777 nmol/mg pro·min。【结论】通过硒代谢通路基因分析,初步解释了朱砂叶螨对硒的适应的分子机制,并证明了上调表达的TcSPS1基因在朱砂叶螨产生对硒的适应中起着重要的功能。
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关键词
朱砂叶螨
硒
硒代谢通路
硒磷酸合成酶
差异表达基因
原核表达
酶活性
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职称材料
题名
朱砂叶螨硒代谢通路基因筛选及硒磷酸合成酶TcSPS1的原核表达和特性分析
1
作者
张梦宇
戚翠翠
胡佳
徐志峰
机构
西南大学植物保护学院
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第5期566-573,共8页
基金
国家重点研发计划(2016YFD0200505-2,2017YFD0202002-7)
国家自然科学基金项目(31972297,31801759)。
文摘
【目的】本研究旨在筛选朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus硒代谢通路的关键基因,探究其在朱砂叶螨硒代谢中的功能。【方法】使用基因克隆技术对8条朱砂叶螨硒代谢通路基因进行克隆;利用qPCR技术检测这些基因在不同浓度(0,5,20和50μmol/L)亚硒酸钠(Na_(2)SeO_(3))处理的豇豆苗上饲养3 d的朱砂叶螨品系(短期硒饲养品系)雌成虫间以及朱砂叶螨普通品系(豇豆苗饲养)和长期硒饲养品系(20μmol/L Na_(2)SeO_(3)处理的豇豆苗饲养超1年)雌成虫间的表达量差异,并分析它们对硒诱导的表达响应;原核表达差异表达基因TcSPS1,并测定获得的重组蛋白生化特性。【结果】成功克隆了朱砂叶螨硒代谢通路的8条基因TcTxnrd1,TcTxnrd2,TcSPS1,TcSPS2,TcSPS2-1,TcSPS2-2,TcSG和TcPSTK。qPCR结果表明TcSPS1和TcTxnrd2在短期硒饲养和长期硒饲养朱砂叶螨品系中均上调表达,且TcSPS1的表达量变化与硒浓度变化密切相关。原核表达系统成功获得TcSPS1可溶性重组蛋白,测得其重组蛋白比活力为2.366±0.046 nmol/mg pro·min,Km和Vmax值分别为10.054±0.062μmol/L和29.633±1.777 nmol/mg pro·min。【结论】通过硒代谢通路基因分析,初步解释了朱砂叶螨对硒的适应的分子机制,并证明了上调表达的TcSPS1基因在朱砂叶螨产生对硒的适应中起着重要的功能。
关键词
朱砂叶螨
硒
硒代谢通路
硒磷酸合成酶
差异表达基因
原核表达
酶活性
Keywords
Tetranychus cinnabarinus
selenium
selenium metabolism pathway
selenophosphate synthetase
differentially expressed gene
prokaryotic expression
enzyme activity
分类号
S433.7 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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1
朱砂叶螨硒代谢通路基因筛选及硒磷酸合成酶TcSPS1的原核表达和特性分析
张梦宇
戚翠翠
胡佳
徐志峰
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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