促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响 被引量：15

1

作者 戈一峰 王大勇 +7 位作者 蒋超 张艳梅 韩雪峰 卢坤刚 崔英霞 黄宇烽 黄祝 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1138-1142,共5页

目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH... 目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。 展开更多

关键词 GNRH类似物 荧光定量PCR 大鼠睾丸间质细胞 膜联蛋白5 3β-羟类固醇脱氢酶

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人子宫内膜细胞的纯化和培养 被引量：20

2

作者 戈一峰 黄宇烽 +2 位作者 胡毓安 崔英霞 刘琦 《医学研究生学报》 CAS 2005年第6期496-498,i015,共4页

目的:本研究旨在建立一套子宫内膜细胞体外培养和贮存传代的方法,为进一步对其进行抗原组分研究奠定基础。方法:用胶原酶消化和铜网过筛法分离子宫内膜基质细胞和上皮细胞,进行单层培养。结果:子宫内膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白... 目的:本研究旨在建立一套子宫内膜细胞体外培养和贮存传代的方法,为进一步对其进行抗原组分研究奠定基础。方法:用胶原酶消化和铜网过筛法分离子宫内膜基质细胞和上皮细胞,进行单层培养。结果:子宫内膜上皮细胞和基质细胞分别经角蛋白单抗和波形蛋白单抗组化染色为阳性,腺细胞可持续培养4～6周,传代2～3次。结论:子宫内膜腺体细胞培养方法的建立为减少外科来源的子宫内膜抗原建立了基础。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜细胞 培养

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自动化精子分析仪SQA-V与传统手工法精子计数的比较研究 被引量：4

3

作者 戈一峰 汪春晖 +5 位作者 邵永 姚兵 吴丹 夏欣一 商学军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第12期1290-1293,共4页

目的:评估自动化精子质量分析仪SQA-V与传统手工法精子计数之间各主要参数的差异性及其在不育和生育男性精子质量分析中的应用。方法:用SQA-V系统和手工法对15例生育志愿者和53例临床不育患者新鲜精液标本以及乳胶质控珠进行检测,分别... 目的:评估自动化精子质量分析仪SQA-V与传统手工法精子计数之间各主要参数的差异性及其在不育和生育男性精子质量分析中的应用。方法:用SQA-V系统和手工法对15例生育志愿者和53例临床不育患者新鲜精液标本以及乳胶质控珠进行检测,分别将精子密度进行相关性分析及准确度评价。结果:不育组和生育组男性各项指标间存在显著差异,两种分析检测方法精子密度(rc=0.870,P<0.01)具有很好的一致性。结论:与传统手工法精子计数比较,SQA重复性更好,主要参数具有较好的一致性,能够反映临床不同组群患者精液的差异性。 展开更多

关键词 精子质量分析仪 不育 精子质量分析

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子宫内膜异位症患者血清中靶抗体的检测和应用 被引量：1

4

作者 戈一峰 袁海涛 +1 位作者 徐建平 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2002年第1期48-50,共3页

目的 :建立一种ELISA方法 ,以检测子宫内膜异位症患者血清中抗转铁蛋白抗体。　方法 :用转铁蛋白包被的间接ELISA方法检测血清中的抗转铁蛋白抗体。血清标本来自 96例正常体检女性 ,6 4例妊娠妇女 ,72例儿科女童 ,以及 2 4例子宫内膜异... 目的 :建立一种ELISA方法 ,以检测子宫内膜异位症患者血清中抗转铁蛋白抗体。　方法 :用转铁蛋白包被的间接ELISA方法检测血清中的抗转铁蛋白抗体。血清标本来自 96例正常体检女性 ,6 4例妊娠妇女 ,72例儿科女童 ,以及 2 4例子宫内膜异位症患者。　结果 :子宫内膜异位症患者血清中的抗转铁蛋白抗体阳性率远远高于对照组 ,特异性为 99.0 % ,敏感度为 95 .8% ,准确性为 99.2 %。　结论 :子宫内膜异位症患者血清抗转铁蛋白抗体阳性率明显高于对照组 。 展开更多

关键词 抗转铁蛋白抗体 子宫内膜异位症 酶联免疫吸附试验 检测 应用

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精子发生过程中的细胞凋亡

5

作者 戈一峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期254-256,共3页

精子发生过程中的细胞凋亡①戈一峰综述黄宇烽审校（南京军区南京总医院生殖与遗传实验室，南京２１０００２）关键词生殖生精细胞精子发生凋亡凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）一词最早由澳大利亚病理学家Ｊｏｈｎｋｅｒｒ于１９７２年提出... 精子发生过程中的细胞凋亡①戈一峰综述黄宇烽审校（南京军区南京总医院生殖与遗传实验室，南京２１０００２）关键词生殖生精细胞精子发生凋亡凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）一词最早由澳大利亚病理学家Ｊｏｈｎｋｅｒｒ于１９７２年提出，是近年来研究较多的细胞死亡方式，... 展开更多

关键词 生殖 生精细胞 精子发生 细胞凋亡

全文增补中

抗凝剂浓度不同血液的血细胞计数仪分析结果 被引量：23

6

作者 方蓉 黄宇烽 +2 位作者 郑均 蒋宇华 戈一峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期105-106,共2页

关键词 抗凝剂 血细胞分析仪 质量控制 浓度

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高血糖对红细胞平均体积测定的影响 被引量：24

7

作者 林军 李勇 +1 位作者 戈一峰 孟泽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期280-283,共4页

本文着重讨论在高血糖时用ＣｏｕｌｔｅｒＪＴ－ＩＲ血细胞计数仪测定ＭＣＶ引起假性增高情况。用ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝，制备１０个不同葡萄糖浓度的抗凝血，按０．５、２．５、５．０、８．０ｈ四个时间用Ｃｏｕｌｔｅｒ计数仪测ＭＣＶ... 本文着重讨论在高血糖时用ＣｏｕｌｔｅｒＪＴ－ＩＲ血细胞计数仪测定ＭＣＶ引起假性增高情况。用ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝，制备１０个不同葡萄糖浓度的抗凝血，按０．５、２．５、５．０、８．０ｈ四个时间用Ｃｏｕｌｔｅｒ计数仪测ＭＣＶ值，用日立７１５０自动生化分析仪测葡萄糖浓度。结果显示：无论在体内或体外，随着葡萄糖浓度的增高，都将导致ＭＣＶ值假性增高。当血糖浓度在９０ｍｍｏｌ／Ｌ或更高时，ＭＣＶ值呈显著增高趋势。同时检测血常规和生化，结果显示ＭＣＶ随葡萄糖浓度的改变而相应改变，呈正相关。另外，病人血糖浓度虽然不高（正常），而血尿素却较高。 展开更多

关键词 高血糖症 红细胞 血细胞计数仪 平均体积

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45,X,der(Y)t(Y;13)不育男性患者的临床细胞和分子遗传学研究 被引量：9

8

作者 崔英霞 夏欣一 +7 位作者 卢洪涌 潘连军 邵永 姚兵 戈一峰 王国洪 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1168-1171,I0015,共5页

目的:了解核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点。方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型。用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点。... 目的:了解核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点。方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型。用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点。用DNA多态性方法检测位于13q12上的BRCA 2基因拷贝数。对患者的睾丸和皮下结节进行活检。结果:细胞遗传学和FISH证实患者SRY基因和Y染色体着丝粒位于13号染色体上。因此,患者核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13.ish der(Y)(SRY+,DYZ3+,wcp13+)。Y染色体长臂上的AZFa,b,和C区域全部丢失,断裂点位于sY82以下。BRCA2基因的多态性检测无拷贝数的丢失。睾丸活检结果为唯支持细胞综合征。皮下结节病理检查为血管脂肪瘤。结论:患者的男性表型是由于基因组中存在SRY基因。无精子症、睾丸体积小与病理结果一致,是由于Y染色体Yq11.1→Yqter片段丢失所致。但血管脂肪瘤的分子机制仍然不清楚。 展开更多

关键词 45 X男性 Y常/染色体易位 无精子症 SRY基因 血管脂肪瘤 不育男性患者 分子遗传学

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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响 被引量：13

9

作者 陶晓倩 王大勇 +6 位作者 柳海燕 林钗英 韩雪峰 时姗姗 崔英霞 戈一峰 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2010年第4期342-346,共5页

目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标... 目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 间质细胞 睾酮 3β-羟基类固醇脱氢酶

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恐惧应激对雄性大鼠生殖激素的影响 被引量：7

10

作者 侯林 徐会茹 +7 位作者 王晨阳 黄祝 蒋超 黄宇峰 崔英霞 戈一峰 恽时锋 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2007年第9期920-922,930,共4页

目的:观察比较不同恐惧应激状态下,大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)的变化。方法:建立SD大鼠的急性应激、亚急性应激和慢性应激模型,分别在麻醉后心脏取血,酶联免疫分析法测定并比较各实验组及相应对照组大鼠血清FSH... 目的:观察比较不同恐惧应激状态下,大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和睾酮(T)的变化。方法:建立SD大鼠的急性应激、亚急性应激和慢性应激模型,分别在麻醉后心脏取血,酶联免疫分析法测定并比较各实验组及相应对照组大鼠血清FSH、LH和T的含量。结果:急性应激组大鼠血清FSH、LH和T水平略高于对照组大鼠,但无显著差异(P>0.05);亚急性应激组大鼠血清FSH、LH和T水平均低于其对照组,但都无显著差异(P>0.05);慢性应激组大鼠血清FSH、LH和T均低于对照组大鼠,其中LH水平的变化有显著差异(P<0.05);而T水平有极显著差异(P<0.001)。结论:急性应激、亚急性应激和慢性应激能影响大鼠血清FSH、LH和T浓度,尤其慢性应激引起的体内激素的变化最大,提示应激对大鼠生理功能的维持以及生殖保护具有干扰作用。 展开更多

关键词 恐惧 应激 卵泡刺激素 黄体生成素 睾酮

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去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响 被引量：8

11

作者 王晨阳 侯林 +7 位作者 徐会茹 蒋超 黄祝 崔英霞 戈一峰 黄宇烽 恽时锋 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期700-703,788,共5页

目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对... 目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对照组相比,切除颌下腺14 d和28 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5的表达分别升高了27.5%和35.2%,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);切除颌下腺42 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5又恢复到与对照组几乎相同的水平。免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但实验组annexin 5免疫组化显色较深,说明annexin 5的表达升高,这与Western blotting的结果基本一致。结论:颌下腺切除影响大鼠睾丸annexin 5的表达,颌下腺切除早期(14、28 d)颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏,而造成睾丸内annexin 5表达的升高。颌下腺切除后期(42 d),机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到了补偿,对睾丸annexin 5的影响消除,睾丸annexin 5的表达也恢复到正常水平。其内在具体机制尚待进一步阐明。 展开更多

关键词 颌下腺 睾丸 膜联蛋白5 大鼠

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促性腺激素释放激素拮抗剂对In-R1-G9细胞表达胰高血糖素的影响 被引量：6

12

作者 张艳梅 柳海燕 +7 位作者 陶晓倩 时姗姗 卢坤刚 韩雪峰 崔英霞 戈一峰 李晓军 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1136-1139,共4页

目的:促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)能降低小鼠糖尿病的发生率,文中在细胞水平研究GnRHant对In-R1-G9细胞内胰高血糖素(glucagon)表达的调控作用。方法:分别用终浓度为0.1、10、1 000 nmol/L的GnRHant处理培养的In-R1-G9细胞2 h(... 目的:促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)能降低小鼠糖尿病的发生率,文中在细胞水平研究GnRHant对In-R1-G9细胞内胰高血糖素(glucagon)表达的调控作用。方法:分别用终浓度为0.1、10、1 000 nmol/L的GnRHant处理培养的In-R1-G9细胞2 h(对照组用甘露醇处理),通过Western blot和荧光定量PCR技术观察胰高血糖素在蛋白水平及转录水平的变化。结果:与对照组相比,低浓度的GnRHant(0.1 nmol/L)使胰高血糖素在蛋白水平和转录水平的表达均有所降低,但是无统计学意义(P>0.05);而高浓度的GnRHant(10 nmol/L、1 000 nmol/L)能明显地降低胰高血糖素的表达(P<0.05)。结论:一定浓度的GnRHant能降低In-R1-G9细胞内胰高血糖素的表达。 展开更多

关键词 GNRH拮抗剂 In—R1-G9细胞 胰高血糖素

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迟发性脊柱骨骺发育不良家系SEDL基因突变研究 被引量：4

13

作者 夏欣一 崔英霞 +5 位作者 周鑫 钟立柱 戈一峰 姚兵 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2010年第2期123-127,共5页

目的迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X线表现明显的X连锁骨发育不良疾病,主要特征包括不成比例的短躯干型矮身材、大关节发育不良以及胸腰椎椎体扁平。文中鉴定SEDT家系SEDL基因的突变位点,探讨... 目的迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X线表现明显的X连锁骨发育不良疾病,主要特征包括不成比例的短躯干型矮身材、大关节发育不良以及胸腰椎椎体扁平。文中鉴定SEDT家系SEDL基因的突变位点,探讨SEDT发病的分子遗传学机制。方法报告1个4代68人累及8例患者的SEDT大家系,患者均为非匀称性矮身材(短躯干),临床诊断为X连锁SEDT。提取家系所有成员及50例正常对照者血样中白细胞基因组DNA,应用PCR和DNA测序进行SEDL基因突变分析。结果DNA序列分析表明,家系8例患者均为SEDL基因外显子6发生插入突变(c.370-371 ins A,突变数据库检索未见报告,为一全新突变方式),并发现1例无症状患儿携带相同方式突变(症状发生前),6例女性携带者为杂合突变,家系其他成员和正常对照者中均未见该插入突变。结论SEDL基因c.370-371 ins A是一新突变方式,详细的临床与分子遗传学研究丰富了SEDT的基因型-表型谱。SEDL基因突变分析对携带者检测、症状前诊断以及患者和携带者的产前基因诊断具有重要意义。 展开更多

关键词 迟发性脊柱骨骺发育不良 SEDL基因 插入突变

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SEDL基因突变致迟发性脊柱骨骺发育不良机制的初步研究 被引量：3

14

作者 夏欣一 周玉春 +6 位作者 崔英霞 周鑫 魏莉 戈一峰 姚兵 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2010年第8期800-804,共5页

目的迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X线表现明显的X连锁骨发育不良疾病,主要特征包括不成比例的短躯干型矮身材、大关节发育不良以及胸腰椎椎体扁平。文中初步研究SEDL基因突变致SEDT的机制。... 目的迟发性脊柱骨骺发育不良(spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDT)是一种X线表现明显的X连锁骨发育不良疾病,主要特征包括不成比例的短躯干型矮身材、大关节发育不良以及胸腰椎椎体扁平。文中初步研究SEDL基因突变致SEDT的机制。方法将野生型SEDL基因及其突变型(c.370-371insA)重组真核表达质粒分别转染COS-7细胞,通过流式细胞仪检测转染效率,激光共聚焦显微镜下观察重组蛋白表达的亚细胞定位,应用透射电镜观察转染细胞的超微结构。结果野生型和突变型重组质粒的转染效率分别为47.51%和46.39%。野生型重组Sedl-in蛋白主要定位于核周,而突变型Sedlin蛋白则主要分布于细胞核以及部分在胞质表达。超微结构显示转染SEDL突变型重组质粒的细胞溶酶体显著增多。结论SEDL基因c.370-371insA突变导致Sedlin蛋白细胞定位的变化可能是SEDT发病的分子机制。 展开更多

关键词 SEDL基因 重组表达 超微结构 迟发性脊柱骨骺发育不良

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经寡核苷酸微阵列比较基因组杂交技术证实的12号染色体短臂中间缺失的病例报告及文献复习 被引量：2

15

作者 卢洪涌 崔英霞 +8 位作者 经卉 夏欣一 史轶超 杨滨 姚兵 戈一峰 梁泉 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2010年第7期706-709,共4页

目的 12号染色体短臂中间缺失是罕见的。文中报道1例智力低下,身材矮小,界限性高血压和短指趾畸形的女性患儿经寡核苷酸微阵列比较基因组杂交(oligonucleotide array-based comparative genomic hybridization,OaCGH)技术证实位于12号... 目的 12号染色体短臂中间缺失是罕见的。文中报道1例智力低下,身材矮小,界限性高血压和短指趾畸形的女性患儿经寡核苷酸微阵列比较基因组杂交(oligonucleotide array-based comparative genomic hybridization,OaCGH)技术证实位于12号染色体的p12.2—p11.21区域有11.47Mb中间缺失。方法对患儿进行G显带高分辨染色体核型分析,多色荧光原位杂交及寡核苷酸微阵列比较基因组杂交分析。结果高分辨核型疑12p11.2中间缺失,经多色荧光原位杂交检测未发现有易位存在。寡核苷酸微阵列比较基因组杂交技术显示在12p12.2—p11.21有11.47Mb的缺失,确定患儿核型为46,XX,del(12)(p11.21p12.2).arrcgh12p11.21p12.2(PDE3A->BICD1)×1。在该缺失的区域有注释的基因71个。结论患者特有的表型包括智力低下、界限性高血压、身材矮小和短指趾畸形等均是该区域内基因缺失的结果 。 展开更多

关键词 12p中间缺失 界限性高血压 短指畸形 寡核苷酸芯片 比较基因组杂交

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膜联蛋白5刺激大鼠Leydig细胞增殖过程中RhoA、RockⅠ的表达 被引量：1

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作者 靖俊 邵永 +6 位作者 曾嵘 伏海燕 段婷 周经委 梁元姣 姚兵 戈一峰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期676-679,共4页

目的研究RhoA、RockⅠ促进大鼠Leydig细胞增殖的机制,探讨膜联蛋白5调控Leydig细胞增殖的新途径。方法用1 nmol/L膜联蛋白5处理原代培养大鼠Leydig细胞12、24、48 h后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,west... 目的研究RhoA、RockⅠ促进大鼠Leydig细胞增殖的机制,探讨膜联蛋白5调控Leydig细胞增殖的新途径。方法用1 nmol/L膜联蛋白5处理原代培养大鼠Leydig细胞12、24、48 h后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,western blot检测RhoA和RockⅠ的蛋白质表达情况。结果 MTT法结果显示,1 nmol/L膜联蛋白5呈显著的时间依赖的促进Leydig细胞增殖作用,且24 h组细胞增殖能力与对照组差异最为显著(0.251±0.019 vs 0.207±0.009,t=4.380,P<0.01);流式细胞分析发现,1 nmol/L膜联蛋白5作用于Leydig细胞,以作用24 h时对细胞周期的影响最为显著,可使G2+M期比例比对照组升高(12.24±0.84 vs 7.79±1.15,t=5.407),G0/G1期比例下降(67.61±0.37 vs 74.49±0.73,t=-14.64),P均<0.01;western bolt结果表明,膜联蛋白5作用12、24、48 h后Leydig细胞RhoA表达结果分别为1.39±0.29、2.21±0.38、1.46±0.19,与0 h组结果 0.89±0.41比较,均有升高(t=2.028,P<0.05;t=4.736,P<0.01;t=2.550,P<0.05);膜联蛋白5作用24、48 h后Leydig细胞RockⅠ表达结果分别为1.14±0.18、1.03±0.17,与0 h组结果 0.72±0.22比较均升高(t=2.944,P<0.01;t=2.246,P<0.05)。结论 RhoA、RockⅠ可能参与膜联蛋白5促进细胞周期G0/G1进程,最终促进Leydig细胞的增殖。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 RHOA RockⅠ 细胞增殖 LEYDIG细胞

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无性腺症患者合并Y染色体结构重排的临床及细胞分子遗传学分析 被引量：1

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作者 崔英霞 史轶超 +8 位作者 刘琦 夏欣一 卢洪涌 魏丽 姚兵 戈一峰 王国洪 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2010年第1期57-62,共6页

目的无性腺症是罕见的,其分子机制尚不清楚。文中报道1例无性腺症患者合并Y染色体结构重排。方法染色体核型分析结合荧光染色体原位杂交(FISH)和聚合酶链反应-序列标签位点(PCR-STS)以确定患者核型。对SRY和SHOX基因进行序列分析。用反... 目的无性腺症是罕见的,其分子机制尚不清楚。文中报道1例无性腺症患者合并Y染色体结构重排。方法染色体核型分析结合荧光染色体原位杂交(FISH)和聚合酶链反应-序列标签位点(PCR-STS)以确定患者核型。对SRY和SHOX基因进行序列分析。用反转录荧光定量PCR(RT-qPCR)对位于Y染色体长臂的AZFa上USP9Y基因和UTY基因进行表达分析。结果患者核型为46,X,der(Y)(pter→q11.23::pter→p11.31orp11.2:).ishder(Y)(DYZ3+,SRY++,pter++,qter-)。患者Ypter→p11.31或p11.2片段重复,q11.23→qter片段缺失,没有性染色体嵌合和常染色体结构畸变。SRY和SHOX基因测序未发现突变。Y染色体上的USP9Y基因和UTY基因几乎不表达。结论文中1例无性腺症患者合并Y染色体结构重排是首次报道,Y-连锁基因几乎不表达,提示Y染色体可能失活,推测是无性腺症和矮身材的原因。 展开更多

关键词 无性腺症 矮身材 Y染色体重排 SRY基因 SHOX基因

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成骨不全症Ⅳ型家系COL1A1基因突变 被引量：1

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作者 崔英霞 夏欣一 +6 位作者 史轶超 魏丽 卢洪涌 姚兵 戈一峰 李晓军 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期344-346,共3页

目的报告1个常染色体显性遗传的成骨不全症Ⅳ型家系COL1A1基因突变,探讨基因型与表型的关系。方法提取该家系所有患者及正常成员和50个健康人对照血样本的DNA。对先证者COL1A1基因的启动子、51个外显子和外显子/内含子剪接处进行PCR并... 目的报告1个常染色体显性遗传的成骨不全症Ⅳ型家系COL1A1基因突变,探讨基因型与表型的关系。方法提取该家系所有患者及正常成员和50个健康人对照血样本的DNA。对先证者COL1A1基因的启动子、51个外显子和外显子/内含子剪接处进行PCR并对产物测序。对家系的另外4个患者和有血缘关系的健康者及50名健康对照者的第25外显子测序。结果先证者和所有患者COL1A1基因测序均显示第25外显子的7872位置碱基发生杂合突变(g.7872G>A,c.1678G>A,p.G560S),但家系中健康者和无血缘关系的50名健康对照者均无此改变,与临床诊断一致。先证者该基因的其他位置未见突变。结论COL1A1基因G560S突变产生的表型是成骨不全症Ⅳ型。50岁以后有听力减退,这是先前相同突变没有描述过的表型。 展开更多

关键词 成骨不全症Ⅳ型 COL1A1基因 I型牙本质发育不全 进行性听力减退

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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中Ect2表达的影响 被引量：1

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作者 靖俊 戈一峰 +4 位作者 梁元姣 陈声容 伏海燕 伊男 姚兵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期459-462,472,共5页

目的研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中上皮细胞转化序列2癌基因(epithelial cell transfor-ming sequence 2 oncogene,Ect2)表达的影响,探讨annexin 5影响睾丸间质细胞增殖的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,... 目的研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞增殖过程中上皮细胞转化序列2癌基因(epithelial cell transfor-ming sequence 2 oncogene,Ect2)表达的影响,探讨annexin 5影响睾丸间质细胞增殖的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,不同剂量的annexin 5处理后,采用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR检测Ect2的mRNA表达改变,western blot分析睾丸间质细胞中Ect2蛋白质表达变化。结果 MTT法检测结果显示,annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖有明显的促进作用,且在2～3 d呈显著的剂量-时间依赖关系(P<0.01),在第5天细胞增殖作用已明显减弱。流式细胞分析发现,1 nmol/L annexin 5作用48 h时G2/M期细胞减少为24.49%,72 h时减少为16.43%,与对照组比较差异显著(P<0.05)。RT-PCR结果表明,0.1 nmol/L组和1 nmol/L组Ect2 mRNA表达[(0.77±0.06)和(0.85±0.04)]与对照组(0.67±0.06)比较,分别增加了14.9%(P<0.05)和26.9%(P<0.01),而10 nmol/L组Ect2 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。western blot结果表明,1 nmol/L annexin 5作用组的Ect2蛋白质表达比对照组增加了20.9%[(1.50±0.15)vs(1.24±0.07),P<0.05],而0.1 nmol/L组和10 nmol/L组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 annexin 5对大鼠睾丸间质细胞增殖的促进作用是通过促进细胞周期由G2期向M期的转变来实现的。Ect2在基因和蛋白质水平均受annexin 5的影响,提示annexin 5调控睾丸间质细胞增殖可能通过增加Ect2的表达而实现。 展开更多

关键词 膜联蛋白5 上皮细胞转化序列2癌基因 细胞增殖 间质细胞

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牙本质生长不全Ⅱ型家系DSPP基因内含子2的mRNA剪接位点新的缺失突变

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作者 崔英霞 侯燕宁 +7 位作者 王浩洋 夏欣一 卢洪涌 史轶超 姚兵 戈一峰 李晓军 黄宇烽 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期90-93,共4页

目的报告1例牙本质生长不全Ⅱ型家系(dentinogenesis imperfecta typeⅡ,DGIⅡ)牙本质唾液酸焦磷酸蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)内含子2的mRNA剪接位点新的缺失突变。方法在对疾病基因进行连锁分析的基础上,对其候选基因DSPP... 目的报告1例牙本质生长不全Ⅱ型家系(dentinogenesis imperfecta typeⅡ,DGIⅡ)牙本质唾液酸焦磷酸蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)内含子2的mRNA剪接位点新的缺失突变。方法在对疾病基因进行连锁分析的基础上,对其候选基因DSPP的调控序列、前4个外显子、外显子/内含子交界处进行序列分析,对突变的序列进行变性高效液相色譜(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC)证实。结果发现DSPP内含子2的3′端上游第3→25位置上的23个碱基缺失,使该内含子受体的剪接位点由CAG→AAG,可能还使得分支点序列功能消失。该突变是杂合突变,见于家系所有患者中,非患病成员及50名健康人对照均未发现相同突变。结论该突变是家系牙本质生长不全Ⅱ型疾病的分子原因。DSPP内含子2的缺失突变是首次报告。 展开更多

关键词 牙本质生长不全Ⅱ型 牙本质唾液酸焦磷酸蛋白 mRNA剪接突变 分支点 受体点序列

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