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TGFβ2和PPP3CA基因在黔北麻羊性腺轴组织表达及对卵巢颗粒细胞的调控研究被引量：7: 1; 作者敖叶陈祥 +6 位作者周志楠骆金红韦仕南张艳惠茂茂吴雨杨沛方《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2699-2709,共11页; 旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TGFβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制。本研究以单、多羔黔北麻羊母羊为试验对象。通过RT-qPCR技术检测TGFβ2与PPP3CA基因在单、多... 展开更多; 关键词黔北麻羊 TGFβ2基因 PPP3CA基因卵巢颗粒细胞差异表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

CTSD对黔北麻羊卵泡颗粒细胞的调控机制及功能分析被引量：4: 2; 作者周志楠陈祥 +4 位作者张艳杨沛方惠茂茂唐文洪磊《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1278-1292,共15页; 旨在分析组织蛋白酶D(cathepsin D,CTSD)对黔北麻羊卵泡颗粒细胞的调控机制并初步探究其对产羔性状的影响机理。本研究以36周龄、健康、多胎黔北麻羊母羊(n=5)为研究对象,屠宰后采集卵巢组织分离培养卵泡颗粒细胞,构建真核表达载体pEGFP... 展开更多; 关键词 CTSD 黔北麻羊颗粒细胞调控机制产羔性状; 在线阅读下载PDF 职称材料

N-乙酰半胱氨酸对山羊子宫内膜基质细胞增殖及相关基因表达的影响被引量：3: 3; 作者杨沛方陈祥 +3 位作者周志楠唐文张艳惠茂茂《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期141-150,共10页; 旨在探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对山羊子宫内膜基质细胞(goat endometrial stromal cells,gESCs)的影响。本研究以山羊子宫内膜基质细胞为对象,体外培养基中添加浓度梯度分别为100、200、400μmol·L^(-1)的NAC,... 展开更多; 关键词 N-乙酰半胱氨酸 gESCs 细胞增殖基因表达繁殖性能; 在线阅读下载PDF 职称材料

MMP15、PICK1基因在山羊睾丸中的表达研究被引量：1: 4; 作者汪艳妃张艳 +1 位作者惠茂茂陈祥《山地农业生物学报》 2023年第4期18-25,共8页; MMP15、PICK1基因均是哺乳动物性腺组织中影响性腺生理功能正常发挥的重要影响因子,但它们在黔北麻羊睾丸组织中的表达规律尚不明晰。为研究黔北麻羊不同月龄的睾丸中MMP15、PICK1基因的表达情况,本试验以黔北麻羊为研究对象,通过qRT-PC... 展开更多; 关键词黔北麻羊 MMP15 PICK1 相对表达量睾丸; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TGFβ2和PPP3CA基因在黔北麻羊性腺轴组织表达及对卵巢颗粒细胞的调控研究被引量：7: 1; 作者敖叶陈祥周志楠骆金红韦仕南张艳惠茂茂吴雨杨沛方; 机构贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院贵州省草业研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2699-2709,共11页; 基金国家自然科学基金(31760652) 国家重点研发计划项目(2017YFD0501900) 贵州省优秀青年科技人才项目([2017]5624)。; 文摘旨在对转录组测序中单羔组对多羔组TGFβ2和PPP3CA基因的上、下调结果进行验证,并探究黔北麻羊TGFβ2和PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞的调控机制。本研究以单、多羔黔北麻羊母羊为试验对象。通过RT-qPCR技术检测TGFβ2与PPP3CA基因在单、多羔黔北麻羊性腺轴中的表达水平;构建目的基因真核表达载体。培养黔北麻羊卵巢颗粒细胞,并利用脂质体转染法将pEGFP-N3-TGFβ2、pEGFP-N3-PPP3CA重组质粒导入卵巢颗粒细胞,检测培养基中雌二醇(E2)、孕酮(P4)的浓度。利用CCK-8和Annexin V-FITC法检测TGFβ2、PPP3CA基因对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响。随后,利用RT-qPCR从细胞水平检测超表达TGFβ2、PPP3CA基因对TGFβ2、PPP3CA、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因表达的影响。RT-qPCR结果表明,TGFβ2与PPP3CA基因在被检测的组织中均有表达,且在单羔组中的表达量普遍高于多羔组;免疫荧光法证实,所培养的细胞为黔北麻羊卵巢颗粒细胞;TGFβ2与PPP3CA基因真核表达质粒导入细胞后,在极显著提高TGFβ2与PPP3CA基因表达的同时,能够极显著地抑制卵巢颗粒细胞中FSHR、GnRHR、BMP4、TIMP3基因的表达(P<0.01)。细胞增殖与凋亡结果显示,TGFβ2与PPP3CA基因能够促进颗粒细胞凋亡,抑制其增殖。酶联免疫吸附试验结果表明,TGFβ2与PPP3CA基因能够显著促进E2的分泌,但对P4的分泌无显著影响。本研究成功构建了TGFβ2、PPP3CA基因真核表达载体,荧光定量结果表明,超表达TGFβ2、PPP3CA基因抑制了繁殖相关基因的表达,提示TGFβ2、PPP3CA基因对山羊繁殖相关基因表达有一定的影响。为进一步研究TGFβ2、PPP3CA基因对黔北麻羊繁殖力的影响提供基础数据。; 关键词黔北麻羊 TGFβ2基因 PPP3CA基因卵巢颗粒细胞差异表达; Keywords Qianbei Ma goats TGFβ2 gene PPP3CA gene ovarian granulosa cells differential expression; 分类号 S827.2 [农业科学—畜牧学] S827.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CTSD对黔北麻羊卵泡颗粒细胞的调控机制及功能分析被引量：4: 2; 作者周志楠陈祥张艳杨沛方惠茂茂唐文洪磊; 机构贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1278-1292,共15页; 基金国家自然科学基金(31760652) 贵州省科技重大专项(黔科合重大专项字[2016]3002号)。; 文摘旨在分析组织蛋白酶D(cathepsin D,CTSD)对黔北麻羊卵泡颗粒细胞的调控机制并初步探究其对产羔性状的影响机理。本研究以36周龄、健康、多胎黔北麻羊母羊(n=5)为研究对象,屠宰后采集卵巢组织分离培养卵泡颗粒细胞,构建真核表达载体pEGFP-N3-CTSD,将其导入细胞后在转录与翻译水平验证真核表达效率;通过CCK-8法检测在不同时间段内重组质粒对颗粒细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测重组质粒对颗粒细胞凋亡及周期的影响;随后使用RT-qPCR法在细胞水平检测重组质粒对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3,细胞周期相关因子Cyclin A1、Cyclin D2、Cyclin E mRNA表达水平的影响,最后,以多胎性状候选基因BMPR-IB、FSHR、INHA为功能基因,在转录与翻译水平上验证重组质粒对其mRNA与蛋白表达的影响。双酶切及测序结果证实,黔北麻羊CTSD基因真核表达载体pEGFP-N3-CTSD构建成功,且在转录与翻译水平极显著上调CTSD在颗粒细胞中的表达(P<0.01);细胞增殖检测结果表明,颗粒细胞中上调CTSD后能够抑制细胞的增殖,其中在12、24、48、72 h对细胞增殖的抑制效率达到极显著(P<0.01);细胞凋亡检测结果表明,CTSD的过表达能够极显著促进颗粒细胞的凋亡(P<0.01),且能够显著下调细胞抗凋亡基因Bcl-2的表达(P<0.05),极显著上调细胞促凋亡相关基因Bax、Caspase-3的表达(P<0.01);此外,细胞周期检测发现,pEGFP-N3-CTSD在转染后能够极显著上调G0/G1期与G2/M期的细胞数量(P<0.01),极显著下调S期细胞数量(P<0.01),同时能够极显著提高细胞周期相关因子Cyclin A1的表达(P<0.01),极显著降低Cyclin D2的表达(P<0.01)。RT-qPCR及Western blot检测结果表明,在颗粒细胞中上调CTSD后,能够极显著的下调多胎性状候选基因与蛋白BMPR-IB、FSHR、INHA在转录和翻译水平中的表达(P<0.01)。本研究发现,CTSD的高表达能抑制细胞的增殖,促进细胞凋亡,改变颗粒细胞的周期进程;还能改变细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3与细胞周期相关因子Cyclin A1、Cyclin D2、Cyclin E的表达;同时也能够极显著降低颗粒细胞中多胎性状候选基因与蛋白BMPR-IB、FSHR、INHA的表达量(P<0.01)。这提示,CTSD可能通过改变细胞水平相关因子的表达量来调控颗粒细胞的生物学行为以及影响山羊多胎性状候选基因的表达进而间接的成为影响山羊产羔性状的重要因子,本研究为进一步探明CTSD对山羊产羔性状调控机理及对颗粒细胞的影响机制奠定基础。; 关键词 CTSD 黔北麻羊颗粒细胞调控机制产羔性状; Keywords CTSD Qianbei Ma goat granulosa cell regulation mechanism litter size traits; 分类号 S827.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名N-乙酰半胱氨酸对山羊子宫内膜基质细胞增殖及相关基因表达的影响被引量：3: 3; 作者杨沛方陈祥周志楠唐文张艳惠茂茂; 机构贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州大学动物科学学院; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期141-150,共10页; 基金国家自然科学基金(32060753) 国家重点研发计划项目(2017YFD0501904) +1 种基金贵州省肉羊产业技术体系项目(GZRYTX2019-01)。; 文摘旨在探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对山羊子宫内膜基质细胞(goat endometrial stromal cells,gESCs)的影响。本研究以山羊子宫内膜基质细胞为对象,体外培养基中添加浓度梯度分别为100、200、400μmol·L^(-1)的NAC,将0μmol·L^(-1)NAC视为空白组,运用CCK-8法筛选NAC的最适浓度并判断其对细胞的增殖情况,随后通过DCFH-DA探针、RT-qPCR分别检测最适浓度NAC对细胞内活性氧含量、细胞周期、增殖相关因子及山羊繁殖性能相关基因TGF-β1、TGF-β3 mRNA表达水平的影响。结果表明:200μmol·L^(-1)NAC浓度较其它梯度对山羊子宫内膜基质细胞增殖的影响更为显著,此外,200μmol·L^(-1)NAC较空白组降低了细胞ROS的含量(P<0.01),从而延缓细胞的衰老。RT-qPCR结果显示:200μmol·L^(-1)NAC添加能极显著提高细胞周期及增殖相关因子CyclinA1、CyclinE、PCNA mRNA的表达水平(P<0.01),降低细胞周期因子CyclinD2的mRNA表达量(P<0.01);并极显著降低转化生长因子家族TGF-β1基因(P<0.01)、显著降低TGF-β3基因(P<0.05)的mRNA表达水平。故本研究推测200μmol·L^(-1)NAC可能通过调控细胞中CyclinA1、CyclinE、PCNA、CyclinD2的表达水平来促进细胞的增殖并通过调控转化生长家族因子TGF-β1、TGF-β3的表达水平影响山羊的繁殖性状,为进一步研究NAC对山羊繁殖性状的影响机理提供理论基础。; 关键词 N-乙酰半胱氨酸 gESCs 细胞增殖基因表达繁殖性能; Keywords N-acetylcysteine gESCs cell proliferation gene expression reproductive performance; 分类号 S827.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名MMP15、PICK1基因在山羊睾丸中的表达研究被引量：1: 4; 作者汪艳妃张艳惠茂茂陈祥; 机构贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室/动物科学学院; 出处《山地农业生物学报》 2023年第4期18-25,共8页; 基金国家重点研发计划项目(2021YFD1200403) 国家自然科学基金项目(32060753) 贵州省科技支撑计划项目(黔科合支撑[2021]一般151)。; 文摘 MMP15、PICK1基因均是哺乳动物性腺组织中影响性腺生理功能正常发挥的重要影响因子,但它们在黔北麻羊睾丸组织中的表达规律尚不明晰。为研究黔北麻羊不同月龄的睾丸中MMP15、PICK1基因的表达情况,本试验以黔北麻羊为研究对象,通过qRT-PCR技术分别检测MMP15与PICK1基因在1、3、6、9、12月龄的黔北麻羊睾丸中的表达水平并建立基因表达的标准曲线。结果显示:MMP15、PICK1基因在黔北麻羊不同月龄睾丸组织中均有表达;MMP15基因在黔北麻羊不同月龄睾丸中的表达量从高到低排列为:12月龄>1月龄>9月龄>3月龄>6月龄;12月龄与1月龄的表达差异不显著(P>0.05),二者表达量均极显著高于3月龄、6月龄、9月龄(P<0.01);9月龄表达显著高于3月龄(P<0.05),极显著高于6月龄(P<0.01);3月龄表达极显著高于6月龄(P<0.01)。PICK1基因在黔北麻羊不同月龄睾丸中的表达量从高到低排列分别是:3月龄>6月龄>12月龄>9月龄>1月龄;3、6月龄其表达量极显著高于9、12月龄(P<0.01);1月龄与其他几个月龄相比,其表达量均极显著低于其他月龄(P<0.01)。结合黔北麻羊的生理机能发育情况,黔北麻羊在6月龄时已经基本达到性成熟,所以此时睾丸内细胞活动增强,睾丸机能活跃。本次试验结果表明,黔北麻羊睾丸生精功能的正常发挥或与MMP15及PICK1基因的表达量有关。; 关键词黔北麻羊 MMP15 PICK1 相对表达量睾丸; Keywords Qianbei Ma sheep MMP15 PICK1 relative expression level the testis; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	TGFβ2和PPP3CA基因在黔北麻羊性腺轴组织表达及对卵巢颗粒细胞的调控研究	敖叶陈祥周志楠骆金红韦仕南张艳惠茂茂吴雨杨沛方	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	CTSD对黔北麻羊卵泡颗粒细胞的调控机制及功能分析	周志楠陈祥张艳杨沛方惠茂茂唐文洪磊	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	N-乙酰半胱氨酸对山羊子宫内膜基质细胞增殖及相关基因表达的影响	杨沛方陈祥周志楠唐文张艳惠茂茂	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2022	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	MMP15、PICK1基因在山羊睾丸中的表达研究	汪艳妃张艳惠茂茂陈祥	《山地农业生物学报》	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料