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陆地棉栽培品种新陆早1号转基因抗虫植株的获得 被引量：18
1
作者 王伟 朱祯 +5 位作者 邓朝阳 高越峰 徐鸿林 肖桂芳 郭仲琛 李向辉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第5期1-5,共5页
通过根农杆菌介导法成功地将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂（ＣｐＴＩ）基因导入新疆陆地棉栽培品种新陆早１号。棉花幼苗下胚轴经根农杆菌共培养、抗性愈伤组织筛选和胚性愈伤的诱导等阶段获得了胚状体；经ＥＬＩＳＡ检测选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳... 通过根农杆菌介导法成功地将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂（ＣｐＴＩ）基因导入新疆陆地棉栽培品种新陆早１号。棉花幼苗下胚轴经根农杆菌共培养、抗性愈伤组织筛选和胚性愈伤的诱导等阶段获得了胚状体；经ＥＬＩＳＡ检测选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳性的克隆进行分化培养和植株再生；经ＥＬＩＳＡ再度检测，选择Ｎｐｔ－Ⅱ阳性的再生植株进一步培养。当生长至５—６片真叶时，将再生植株直接移栽到温室或进行嫁接。通过ＰＣＲ鉴定和ＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测证明，修饰的ＣｐＴＩ基因已存在于再生植株的基因组内。抗虫测试结果表明，转化棉株对棉铃虫具有较强的抗性。 展开更多
关键词 抗虫基因 基因修饰 陆地棉 根农杆菌 棉花
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基因枪法转化水稻(Oryza sativaL.)获得可育的转抗虫基因水稻再生植株 被引量：16
2
作者 安韩冰 朱祯 +6 位作者 李慧芬 吴茜 周兆澜 徐鸿林 徐军望 安利佳 李向辉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第2期12-16,11,共6页
应用基因枪 ( particlebombardment)转化技术成功地将豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpeatrypsininhibitor,CpTI)基因分别导入三个水稻粳稻栽培品种 (OryzasativaL .,japonica)中花 8、中花 10和中作 32 1的幼胚和胚性愈伤组织中 ,并由此获得了... 应用基因枪 ( particlebombardment)转化技术成功地将豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpeatrypsininhibitor,CpTI)基因分别导入三个水稻粳稻栽培品种 (OryzasativaL .,japonica)中花 8、中花 10和中作 32 1的幼胚和胚性愈伤组织中 ,并由此获得了可育的再生植株 ,抗性植株的筛选频率为 6.1%～ 12 .2 4 %。经PCR、Southernblot分子检测和ELISA检测等证实所获得的潮霉素抗性植株为转基因植株。抗虫性分析结果表明 ,部分转基因水稻植株对玉米螟虫 (Ostrinianubilalis) 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 抗虫基因 转基因水稻 生物检测 基因枪法
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基因枪法转化小麦及转基因植株的获得 被引量：18
3
作者 于晓红 朱祯 +7 位作者 徐鸿林 朱玉 吴茜 高越峰 付志明 肖桂芳 安利佳 李向辉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第2期13-17,共5页
应用基因枪法转化了小麦幼胚、成熟胚及胚性愈伤组织,成功地将携带有豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因以及选择标记潮霉素磷酸转移酶(Hpt)基因的质粒pBCAHpt导入小麦胚性愈伤组织。通过在选择培养基上严格筛选后获得潮霉素抗性(hygr)愈伤组... 应用基因枪法转化了小麦幼胚、成熟胚及胚性愈伤组织,成功地将携带有豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因以及选择标记潮霉素磷酸转移酶(Hpt)基因的质粒pBCAHpt导入小麦胚性愈伤组织。通过在选择培养基上严格筛选后获得潮霉素抗性(hygr)愈伤组织,并进一步分化培养获得完整的小麦再生植株。PCR检测结果显示抗性愈伤组织和再生植株细胞内存在有目的基因序列。 展开更多
关键词 小麦转化 基因枪法 潮霉素抗体 转基因植株
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核基质结合区在转基因烟草中提高报导基因的表达水平 被引量：5
4
作者 李旭刚 朱祯 +2 位作者 徐军望 徐鸿林 肖桂芳 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第9期9-13,共5页
从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidas... 从豌豆基因组中分离了位于质体蓝素 (Plastocyanin)基因下游的核基质结合区(Matrixattachmentregion ,MAR)。为进一步研究此段MAR序列在转基因植物中对外源基因表达水平的影响 ,将MAR序列构建在报导基因 β 葡糖醛酸酶 (β glucuronidase ,GUS)基因和植物选择标记新霉素磷酸转移酶 (Neomycinphosphotransferase ,NPT II)基因的两侧形成T DNA结构。采用叶盘法 ,经农杆菌介导转化烟草。GUS定量检测表明 ,MAR的存在使GUS基因的平均表达水平提高了 2倍。 展开更多
关键词 核基质结合区 转基因植物 β-葡糖醛酸酶 外源基因表达
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棉花转凝集素基因的研究进展 被引量：11
5
作者 李燕娥 朱祯 +4 位作者 上官小霞 徐鸿林 吴霞 李波 张林水 《中国棉花》 北大核心 2004年第6期5-6,共2页
棉花棉铃虫危害的问题已由转化外源 Bt、Cp TI基因解决 ,但蚜虫的危害还有待于新的外源凝集素基因来解决。菊芋凝集素 (H elanthustubero-sus agglutinin,HTA)
关键词 棉花 转凝集素基因 棉铃虫 危害
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雪花莲外源凝集素基因的克隆及其多态性分析 被引量：7
6
作者 朱玉 朱祯 徐鸿林 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第9期36-41,共6页
从雪花莲（Ｇａｌａｎｔｈｕｓｎｉｖａｉｌｓ） 叶片中分离出了长度为４８４ｂｐ 的雪花莲外源凝集素ｃＤＮＡ，包含了完整的雪花莲外源凝集素编码序列。通过限制性酶切图谱及ＤＮＡ序列分析， 从中筛选出５ 种核苷酸且氨基酸序列均有... 从雪花莲（Ｇａｌａｎｔｈｕｓｎｉｖａｉｌｓ） 叶片中分离出了长度为４８４ｂｐ 的雪花莲外源凝集素ｃＤＮＡ，包含了完整的雪花莲外源凝集素编码序列。通过限制性酶切图谱及ＤＮＡ序列分析， 从中筛选出５ 种核苷酸且氨基酸序列均有差别的外源凝集素基因ＧＮＡ１１、ＧＮＡ１２、ＧＮＡ１３、ＧＮＡ１４和ＧＮＡ１５。将这５ 个克隆与６个已报道的序列进行比较， 发现其中ＧＮＡ１４ 与ＧＮＡ１５同源性最高，它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为９８０％ 和９６２％ ， ＬＥＣＧＮＡ１ 与ＧＮＡ１１ 同源性最低， 它们之间核苷酸序列及推导出的氨基酸序列的同源性分别为７７３％ 和６５０％ 。 展开更多
关键词 雪花莲 外源凝集素 多基因家族 RT-PCR DNA序列
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粳稻转基因恢复系的研究 被引量：1
7
作者 李艳萍 牛芝霞 +5 位作者 邹美智 孙海波 周维 牛景 朱祯 徐鸿林 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2005年第5期609-614,645,共7页
利用基因枪转化法将抗除草剂的bar基因和抗二化螟的SCK(修饰后的CpTI)基因导入到优质粳稻恢复系超优一号中。经对转基因植株进行分子检测,表明外源基因已整合到水稻基因组中;经田间除草剂抗性检测和二化螟接种鉴定,表明转基因稳定株系直... 利用基因枪转化法将抗除草剂的bar基因和抗二化螟的SCK(修饰后的CpTI)基因导入到优质粳稻恢复系超优一号中。经对转基因植株进行分子检测,表明外源基因已整合到水稻基因组中;经田间除草剂抗性检测和二化螟接种鉴定,表明转基因稳定株系直到T6仍表现高抗除草剂且没有分离,说明bar基因能稳定遗传并高效表达;转基因恢复系与非转基因恢复系相比,抗虫性有所提高,但提高程度在株系间有差异。经对转基因恢复系所配杂交组合进行除草剂检测和优势测定,表明转基因杂交稻也高抗除草剂,且F1全部正常结实,结实率达80%以上,并具很强的杂种优势,说明亲本抗性基因通过制种已转移到F1中并得到高效表达,同时说明外源基因的导入没有改变原受体的优良性状;经对部分转基因杂交稻进行纯度鉴定,表明秧田喷施除草剂后,本田的不育株率和杂株率明显降低,特别是两系杂交稻效果更明显。 展开更多
关键词 粳稻 转基因恢复系 基因枪转化 除草剂抗性 SCK基因 BAR基因 杂种优势 优质粳稻 两系杂交稻 抗除草剂
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转修饰豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(sck)玉米(Zea mays L.)植株的获得及其抗虫性分析
8
作者 李慧芬 李旭刚 +3 位作者 吴茜 陈蕾 徐鸿林 朱祯 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第10期7-12,共6页
利用基因枪法将修饰的豇豆胰蛋白酶基因 (sck)导入玉米优良自交系E2 8及34 0的胚性愈伤组织中 ,经筛选剂PPT 3次筛选及再生过程 ,获得可育的再生植株。经PCR及Southernblot分子检测 ,证实所获得的再生植株为转基因植株。豇豆胰蛋白酶抑... 利用基因枪法将修饰的豇豆胰蛋白酶基因 (sck)导入玉米优良自交系E2 8及34 0的胚性愈伤组织中 ,经筛选剂PPT 3次筛选及再生过程 ,获得可育的再生植株。经PCR及Southernblot分子检测 ,证实所获得的再生植株为转基因植株。豇豆胰蛋白酶抑制剂抑制活性检测及抗虫结果显示 :外源基因在植物已获表达 ,部分转基因植株具有较强的抗虫活性。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂基因 遗传转化 玉米自交系 抗虫性分析 基因枪 sck 转基因植株
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棉花曲叶病毒外壳蛋白基因启动子的表达方式
9
作者 谢迎秋 朱祯 +1 位作者 吴茜 徐鸿林 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第6期1-4,共4页
通过农杆菌介导的转基因烟草研究表明 ,棉花曲叶病毒 (CLCuV)外壳蛋白基因 (CP)启动子驱动的GUS基因表达活性不仅存在于韧皮部 ,而且出现在叶肉组织和根尖分生组织中 ;基因枪轰击的瞬时表达研究表明 ,AC2激活后的CP启动子在叶肉及叶脉... 通过农杆菌介导的转基因烟草研究表明 ,棉花曲叶病毒 (CLCuV)外壳蛋白基因 (CP)启动子驱动的GUS基因表达活性不仅存在于韧皮部 ,而且出现在叶肉组织和根尖分生组织中 ;基因枪轰击的瞬时表达研究表明 ,AC2激活后的CP启动子在叶肉及叶脉均有表达活性 ,暗示该启动子为近组成型的启动子。 展开更多
关键词 棉花 曲叶病毒 启动子 基因工程 DNA
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转基因抗虫棉晋棉44
10
作者 张林水 朱祯 +3 位作者 吴霞 上官小霞 徐鸿林 李燕娥 《中国棉花》 北大核心 2006年第4期21-21,共1页
关键词 转基因抗虫棉 农作物品种审定委员会 山西省农业科学院 农业转基因生物 棉花研究所 生产应用 发育生物学 中国科学院 生物技术 安全证书
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