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实时荧光定量PCR法检测对虾皮下和造血器官坏死病毒
被引量：
2
1
作者
任聪
陈信忠
+2 位作者
龚艳清
徐菽菲
王寿昆
《中国动物检疫》
CAS
2009年第2期38-41,共4页
应用实时荧光定量PCR最常用的TaqMan探针技术设计了探针和引物,并且用质粒技术构建了含有传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)基因片段的阳性质控品,建立了检测IHHNVV的实时荧光定量PCR方法。对影响PCR的主要因素进行了优化,Mg2+浓度...
应用实时荧光定量PCR最常用的TaqMan探针技术设计了探针和引物,并且用质粒技术构建了含有传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)基因片段的阳性质控品,建立了检测IHHNVV的实时荧光定量PCR方法。对影响PCR的主要因素进行了优化,Mg2+浓度、引物和探针浓度、退火温度等均对扩增效率有明显影响。当Mg2+浓度为3.0-4.5mmol,退火温度为59～60℃时可获得最佳扩增效果。灵敏性试验表明该反应可检测体系中10拷贝的病毒核酸;该体系检测IHHNV具有很高特异性;对临床样品检测结果表明,该方法能快速、准确地检测样品中的IHHNV。
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关键词
传染性皮下及造血器官坏死病毒
TAQMAN探针
实时荧光定量PCR
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职称材料
题名
实时荧光定量PCR法检测对虾皮下和造血器官坏死病毒
被引量：
2
1
作者
任聪
陈信忠
龚艳清
徐菽菲
王寿昆
机构
福建农林大学
厦门出入境检验检疫局
出处
《中国动物检疫》
CAS
2009年第2期38-41,共4页
基金
国家质量监督检验检疫总局项目(2004IK028)资助
文摘
应用实时荧光定量PCR最常用的TaqMan探针技术设计了探针和引物,并且用质粒技术构建了含有传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)基因片段的阳性质控品,建立了检测IHHNVV的实时荧光定量PCR方法。对影响PCR的主要因素进行了优化,Mg2+浓度、引物和探针浓度、退火温度等均对扩增效率有明显影响。当Mg2+浓度为3.0-4.5mmol,退火温度为59～60℃时可获得最佳扩增效果。灵敏性试验表明该反应可检测体系中10拷贝的病毒核酸;该体系检测IHHNV具有很高特异性;对临床样品检测结果表明,该方法能快速、准确地检测样品中的IHHNV。
关键词
传染性皮下及造血器官坏死病毒
TAQMAN探针
实时荧光定量PCR
Keywords
Infectious Hypodermal and Haematopoietic Nerosis
TaqMan probe
Rreal-time fluorescence quantitative PCR
分类号
S941.41 [农业科学—水产养殖]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
实时荧光定量PCR法检测对虾皮下和造血器官坏死病毒
任聪
陈信忠
龚艳清
徐菽菲
王寿昆
《中国动物检疫》
CAS
2009
2
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参考文献
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