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N-末端引入RGD序列的葡激酶突变体表达、纯化及性质研究
被引量：
2
1
作者
狄静芳
贺进田
+2 位作者
徐瑞光
陈希
赵宝华
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期99-104,共6页
为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题，利用PCR介导的定点突变技术，在野生型葡激酶（wt-SAK）N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp（RGD）序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK，另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突...
为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题，利用PCR介导的定点突变技术，在野生型葡激酶（wt-SAK）N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp（RGD）序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK，另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突变体MD4-SAK。将突变体基因分别连接表达载体pBV220，转化大肠杆菌DH5α，经过热激诱导后，突变体均以可溶性形式得到高效表达，表达蛋白占菌体总蛋白的50％以上。破菌上清液通过SP-Sepharose FF、Sephadex G-50和Q-Sepharose FF三步连续的色谱层析纯化得到纤溶活性分别为10．1×10^4AU／mg、11．2×10^4AU／mg，纯度均大于96％的突变体蛋白。进一步研究了突变体的性质，结果表明葡激酶突变体不仅保留了野生型葡激酶的纤溶酶原激活活性，并具有较强的抗血小板聚集活性。同时发现，葡激酶突变体的N-末端序列会影响其N-末端甲硫氨酸的酶切加工。
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关键词
葡激酶
Arg-Gly-Asp(RGD)
抗血小板聚集
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职称材料
深圳独立设计师品牌的现状调查与分析
被引量：
2
2
作者
郑雅舒
王永进
徐瑞光
《服装学报》
CAS
2020年第6期557-561,共5页
从深圳独立设计师角度,采用问卷调查法与深度访谈法,对深圳独立设计师品牌的基本信息、产品、销售渠道、财务、供应链、组织架构、发展“痛点”和未来定位进行调查。得出:深圳独立设计师品牌普遍创立时间短、规模小,销售渠道以批发为主...
从深圳独立设计师角度,采用问卷调查法与深度访谈法,对深圳独立设计师品牌的基本信息、产品、销售渠道、财务、供应链、组织架构、发展“痛点”和未来定位进行调查。得出:深圳独立设计师品牌普遍创立时间短、规模小,销售渠道以批发为主,产品迎合市场,人才和资金需求得不到满足,供应链问题仍未解决。根据品牌现状和未来定位,对品牌自身、政府及相关部门、媒体和消费者4方面提出建议。
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关键词
深圳
独立设计师品牌
品牌现状
品牌调研
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职称材料
题名
N-末端引入RGD序列的葡激酶突变体表达、纯化及性质研究
被引量：
2
1
作者
狄静芳
贺进田
徐瑞光
陈希
赵宝华
机构
河北师范大学生命科学学院
出处
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期99-104,共6页
基金
河北师范大学应用开发(L2005K04)资助项目
文摘
为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题，利用PCR介导的定点突变技术，在野生型葡激酶（wt-SAK）N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp（RGD）序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK，另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突变体MD4-SAK。将突变体基因分别连接表达载体pBV220，转化大肠杆菌DH5α，经过热激诱导后，突变体均以可溶性形式得到高效表达，表达蛋白占菌体总蛋白的50％以上。破菌上清液通过SP-Sepharose FF、Sephadex G-50和Q-Sepharose FF三步连续的色谱层析纯化得到纤溶活性分别为10．1×10^4AU／mg、11．2×10^4AU／mg，纯度均大于96％的突变体蛋白。进一步研究了突变体的性质，结果表明葡激酶突变体不仅保留了野生型葡激酶的纤溶酶原激活活性，并具有较强的抗血小板聚集活性。同时发现，葡激酶突变体的N-末端序列会影响其N-末端甲硫氨酸的酶切加工。
关键词
葡激酶
Arg-Gly-Asp(RGD)
抗血小板聚集
Keywords
staphylokinase, Arg-Gly-Asp （RGD）, anfi-platelet aggregation
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
深圳独立设计师品牌的现状调查与分析
被引量：
2
2
作者
郑雅舒
王永进
徐瑞光
机构
北京服装学院服装艺术与工程学院
出处
《服装学报》
CAS
2020年第6期557-561,共5页
基金
教育部第二批新工科研究与实践项目(E-GKRWJC20202901)
北京服装学院科研重大项目(2020A/-28)。
文摘
从深圳独立设计师角度,采用问卷调查法与深度访谈法,对深圳独立设计师品牌的基本信息、产品、销售渠道、财务、供应链、组织架构、发展“痛点”和未来定位进行调查。得出:深圳独立设计师品牌普遍创立时间短、规模小,销售渠道以批发为主,产品迎合市场,人才和资金需求得不到满足,供应链问题仍未解决。根据品牌现状和未来定位,对品牌自身、政府及相关部门、媒体和消费者4方面提出建议。
关键词
深圳
独立设计师品牌
品牌现状
品牌调研
Keywords
Shenzhen
independent designer brands
brand status
brand investigation
分类号
F426.86 [经济管理—产业经济]
F273.2 [经济管理—企业管理]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
N-末端引入RGD序列的葡激酶突变体表达、纯化及性质研究
狄静芳
贺进田
徐瑞光
陈希
赵宝华
《高技术通讯》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
在线阅读
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职称材料
2
深圳独立设计师品牌的现状调查与分析
郑雅舒
王永进
徐瑞光
《服装学报》
CAS
2020
2
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