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食品中金黄色葡萄球菌多重PCR检测方法的研究被引量：29: 1; 作者徐晓可吴清平 +2 位作者张菊梅周艳红杨小鹃《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期84-89,共6页; 以耐热核酸酶基因nuc、纤维蛋白原结合蛋白基因clfA和SmaI限制性酶切片段特异序列为靶基因,设计筛选引物,建立并优化了检测金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus,SA)的多重PCR体系。采用10株SA和46株非SA验证了该多重PCR具有很好的特异... 展开更多; 关键词金黄色葡萄球菌多重PCR 食品; 在线阅读下载PDF 职称材料

水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究被引量：9: 2; 作者徐晓可吴清平 +2 位作者张菊梅杨小鹃周艳红《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第3期90-93,共4页; 建立快速检测水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahae-molyticus)的二重PCR方法。以副溶血性弧菌特异性基因tlh和toxR为靶基因,选择2对引物,对5株副溶血性弧菌和40株非副溶血性弧菌进行特异性检测;梯度稀释副溶血性弧菌基因组DNA,以不同... 展开更多; 关键词副溶血性弧菌二重PCR 水产品; 在线阅读下载PDF 职称材料

阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：2: 3; 作者徐晓可吴清平 +3 位作者张淑红张菊梅李程思郭伟鹏《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期198-201,共4页; 以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的基因组DNA为模板通过PCR扩增出α-葡萄糖苷酶基因malA,将其克隆入表达载体PET22b(+),构建重组表达质粒pET22b-malA。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),进行优化表达。采用尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融... 展开更多; 关键词阪崎肠杆菌 Α-葡萄糖苷酶克隆原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

LAMP法在阪崎肠杆菌快速检测中的应用被引量：14: 4; 作者张淑红吴清平 +2 位作者徐晓可张菊梅郭伟鹏《食品与机械》 CSCD 北大核心 2011年第5期111-114,共4页; 针对阪崎肠杆菌的ompA基因设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立一种快速检测阪崎肠杆菌的DNA环介导恒温扩增法(LAMP)。通过对2株阪崎肠杆菌标准菌株、24株阪崎肠杆菌分离株和18株非阪崎肠杆菌测试,结果表明此方法具有很高的... 展开更多; 关键词阪崎肠杆菌 ompA基因环介导恒温扩增方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

两种大肠杆菌显色培养基检测效果的比较被引量：6: 5; 作者张淑红郑扬云 +3 位作者吴清平徐晓可张菊梅郭伟鹏《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2012年第10期130-133,共4页; 2011年7月~9月,随机采集广州市区100份食品样品,包括肉制品、速冻食品、乳制品、水产品、果蔬、熟食和食用菌等,参考国标GB/T4789.6-2003方法结合显色培养基对食品中的大肠杆菌进行检验,比较环凯显色培养基HKM和科玛嘉显色培养基CHROMag... 展开更多; 关键词大肠杆菌显色培养基检测效果比较; 在线阅读下载PDF 职称材料

兴趣生活实践——小学数学课堂导入观感: 6; 作者徐晓可《教师》 2011年第11期40-40,共1页; 案例一：圆的认识的课堂导入（陈老师）师：我们先一起做一个游戏。（老师示范表演：一段细绳，一端系着小球，另一端用手拽着甩小球。）; 关键词课堂导入小学数学生活观感实践老师小球游戏; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名食品中金黄色葡萄球菌多重PCR检测方法的研究被引量：29: 1; 作者徐晓可吴清平张菊梅周艳红杨小鹃; 机构广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期84-89,共6页; 基金科技型中小企业技术创新基金(09C26214402098) 广东省计划项目(2007B030601003); 文摘以耐热核酸酶基因nuc、纤维蛋白原结合蛋白基因clfA和SmaI限制性酶切片段特异序列为靶基因,设计筛选引物,建立并优化了检测金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus,SA)的多重PCR体系。采用10株SA和46株非SA验证了该多重PCR具有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到1.197 3 ng。人工污染样品,当起始污染量为1.2个/g时,37℃增菌培养6 h即可检出。一共检测了43份样品,检出3份阳性样品,其中有2份阳性样品与传统方法一致,另外一份阳性样品用测序验证。作者建立的多重PCR方法可特异、快速地实现对SA的检测。; 关键词金黄色葡萄球菌多重PCR 食品; Keywords Staphylococus aureus, multiplex PCR, foods; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究被引量：9: 2; 作者徐晓可吴清平张菊梅杨小鹃周艳红; 机构广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室; 出处《食品与机械》 CSCD 北大核心 2008年第3期90-93,共4页; 基金广东省粤港关键领域重点突破项目(项目编号:2006A25005001) 农业科技成果转化资金项目(项目编号:2007GB2E000236); 文摘建立快速检测水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahae-molyticus)的二重PCR方法。以副溶血性弧菌特异性基因tlh和toxR为靶基因,选择2对引物,对5株副溶血性弧菌和40株非副溶血性弧菌进行特异性检测;梯度稀释副溶血性弧菌基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增;在鱼肉样品中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增;应用该方法对实际样品进行检测。以tlh和toxR为靶基因的两对引物对副溶血性弧菌的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到28.76pg;人工污染样品,当起始污染量为1CFU/mL时,37℃增菌培养10h即可检出。本试验一共检测了21份水产品样品,有14份检出了副溶血性弧菌。; 关键词副溶血性弧菌二重PCR 水产品; Keywords Vibrio parahaemolyticus Dulplex PCR Aquatic product; 分类号 R155.3 [医药卫生—营养与食品卫生学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：2: 3; 作者徐晓可吴清平张淑红张菊梅李程思郭伟鹏; 机构广东省菌种保藏与应用重点实验室; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期198-201,共4页; 基金广东省中国科学院全面战略合作项目(2010B090301037) 广东省科技计划项目(No.2010B020316003); 文摘以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的基因组DNA为模板通过PCR扩增出α-葡萄糖苷酶基因malA,将其克隆入表达载体PET22b(+),构建重组表达质粒pET22b-malA。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),进行优化表达。采用尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。通过ELISA测定效价,并通过免疫荧光法鉴定与菌体表面结合能力。结果表明克隆的目的基因全长1677bp,与Genebank的malA比较具有100%的同源性。带His标签的融合蛋白以包涵体形式表达,其最优化的表达条件是37℃下用0.8mmol/L IPTG诱导5h。ELISA测定效价为5×105;免疫荧光法鉴定表明多克隆抗体能与阪崎肠杆菌表面结合。本实验为阪崎肠杆菌的免疫磁珠检测奠定了基础。; 关键词阪崎肠杆菌 Α-葡萄糖苷酶克隆原核表达多克隆抗体; Keywords Enterobacter sakazakii α-glucosidase cloning prokaryotic expression polyclonal antibody; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名LAMP法在阪崎肠杆菌快速检测中的应用被引量：14: 4; 作者张淑红吴清平徐晓可张菊梅郭伟鹏; 机构广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室广东省微生物研究所; 出处《食品与机械》 CSCD 北大核心 2011年第5期111-114,共4页; 基金广东省科技计划项目(编号:2008A040101001 2009B040500001) 广东省科学院青年科学研究基金项目(编号:qnjj20099); 文摘针对阪崎肠杆菌的ompA基因设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立一种快速检测阪崎肠杆菌的DNA环介导恒温扩增法(LAMP)。通过对2株阪崎肠杆菌标准菌株、24株阪崎肠杆菌分离株和18株非阪崎肠杆菌测试,结果表明此方法具有很高的特异性;对其灵敏度进行检验,发现该方法的最低检测限可以达到8CFU/mL,具有较好的敏感性。在1份实验室能力验证盲样和26份实际奶粉样品中应用发现,该方法与传统生化方法结果吻合,具有较好的可靠性。; 关键词阪崎肠杆菌 ompA基因环介导恒温扩增方法; Keywords Enterobacter sakazakii ompAgene loop mediated isothermal amplification; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名两种大肠杆菌显色培养基检测效果的比较被引量：6: 5; 作者张淑红郑扬云吴清平徐晓可张菊梅郭伟鹏; 机构广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地; 出处《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2012年第10期130-133,共4页; 基金粤港关键领域重点突破项目(2010A020104001) 广东省教育部产学研结合项目(2008B090500214); 文摘 2011年7月~9月,随机采集广州市区100份食品样品,包括肉制品、速冻食品、乳制品、水产品、果蔬、熟食和食用菌等,参考国标GB/T4789.6-2003方法结合显色培养基对食品中的大肠杆菌进行检验,比较环凯显色培养基HKM和科玛嘉显色培养基CHROMagar E的检测效果,为显色培养基的优化和调整提供基础资料。结果表明,大肠杆菌在两种显色培养基上都呈现直径1 mm^2 mm、边缘整齐的蓝绿色菌落。100份食品样品中,HKM检出阳性样品66份,检出率66%,CHROMagar E检出阳性样品65份,检出率为65%,采用X2检验对二者的检出率进行比较,结果无显著性差异(P=0.882>0.05),两种培养基的检测效果相当。另外,检验中从HKM和CHROMagar E上分别分离出4株和5株假阳性菌株,表明二者都存在一定的假阳性。尽管两种显色平板都有一定缺陷,但都可用于食品中大肠杆菌的快速分离和鉴定。; 关键词大肠杆菌显色培养基检测效果比较; Keywords Escherichia coli chromogenic media application effect comparison; 分类号 R446.5 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兴趣生活实践——小学数学课堂导入观感: 6; 作者徐晓可; 机构浙江省永嘉县应坑学校; 出处《教师》 2011年第11期40-40,共1页; 文摘案例一：圆的认识的课堂导入（陈老师）师：我们先一起做一个游戏。（老师示范表演：一段细绳，一端系着小球，另一端用手拽着甩小球。）; 关键词课堂导入小学数学生活观感实践老师小球游戏; 分类号 G633.3 [文化科学—教育学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	食品中金黄色葡萄球菌多重PCR检测方法的研究	徐晓可吴清平张菊梅周艳红杨小鹃	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	29	在线阅读下载PDF 职称材料
2	水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究	徐晓可吴清平张菊梅杨小鹃周艳红	《食品与机械》 CSCD 北大核心	2008	9	在线阅读下载PDF 职称材料
3	阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶的原核表达及其多克隆抗体制备	徐晓可吴清平张淑红张菊梅李程思郭伟鹏	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	LAMP法在阪崎肠杆菌快速检测中的应用	张淑红吴清平徐晓可张菊梅郭伟鹏	《食品与机械》 CSCD 北大核心	2011	14	在线阅读下载PDF 职称材料
5	两种大肠杆菌显色培养基检测效果的比较	张淑红郑扬云吴清平徐晓可张菊梅郭伟鹏	《食品研究与开发》 CAS 北大核心	2012	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	兴趣生活实践——小学数学课堂导入观感	徐晓可	《教师》	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料