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华支睾吸虫成虫全长基因表达文库的构建和基因表达谱的建立 被引量：20
1
作者 徐劲 胡旭初 +4 位作者 应康 吴忠道 陈守义 谢毅 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期383-386,393,共5页
目的　获得尽可能多的华支睾吸虫UNIGENE及全长基因 ,建立成虫基因表达谱 ,为华支睾吸虫发育过程中基因表达的规律和功能基因组学研究奠定基础。方法　构建 pBluescriptⅡSK全长cDNA质粒文库 ,先对 5’端进行随机EST大量测序 ,生物信息... 目的　获得尽可能多的华支睾吸虫UNIGENE及全长基因 ,建立成虫基因表达谱 ,为华支睾吸虫发育过程中基因表达的规律和功能基因组学研究奠定基础。方法　构建 pBluescriptⅡSK全长cDNA质粒文库 ,先对 5’端进行随机EST大量测序 ,生物信息分析后归并UNIGENE ,并对归并的结果进行了 3’端的序列测定 ,根据 3’端测序结果 ,再次进行UNI GENE归并 ,对能够拼接上的克隆进行了序列拼接。对预测为完整基因且未测通的序列 ,进行了引物设计 ,walking反应测序 ,将得到的UNIGENE用点样法制备基因芯片。结果　获得 5’端有效EST序列 4 0 6 6个 ,测序结果UNIGENE分析 ,归并获得1775个UNIGENE ,5’端预测的全长基因为 377个。共获得测通的cDNA序列 2 77个 ,其中全长基因 198个。目前制备的华支睾成虫基因表达谱芯片含有 1775个基因。结论　所构建的华支睾吸虫成虫全长cDNA文库质量较好 ,采用的技术路线获取全长基因建立基因表达谱的效率较高。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 基因表达谱 生物信息学
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Fenton试剂降解选矿废水中残余黄药 被引量：16
2
作者 徐劲 孙水裕 +1 位作者 张萍 蔡河山 《化工环保》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期125-127,共3页
采用Fenton试剂处理选矿废水中残余的黄药,分别考察了氧化时间、反应初始pH、Fe2+浓度及H2O2用量对黄药降解效果的影响;用正交实验确定了4个因素的最佳条件。结果表明,反应初始pH和H2O2用量是影响黄药去除效果的主要因素。氧化时间为60... 采用Fenton试剂处理选矿废水中残余的黄药,分别考察了氧化时间、反应初始pH、Fe2+浓度及H2O2用量对黄药降解效果的影响;用正交实验确定了4个因素的最佳条件。结果表明,反应初始pH和H2O2用量是影响黄药去除效果的主要因素。氧化时间为60min、反应初始pH为4、Fe2+质量浓度为20mg/L、H2O2质量浓度为20mg/L、黄药质量浓度为125mg/L时,黄药的去除率达到99.5%,COD去除率为87.5%。 展开更多
关键词 FENTON试剂 选矿废水 黄药
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Fenton试剂处理选矿废水的实验研究 被引量：8
3
作者 徐劲 孙水裕 +1 位作者 蔡河山 张萍 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期9-11,共3页
研究了用Fenton试剂处理某选矿废水中残余的黄药,分别考查了氧化时间、反应初始pH值、Fe2+浓度及H2O2用量对黄药降解效果的影响,用正交试验确定了四个因素的最好条件。结果表明:初始pH值和H2O2用量是影响去除效果的主要因素;氧化时间为6... 研究了用Fenton试剂处理某选矿废水中残余的黄药,分别考查了氧化时间、反应初始pH值、Fe2+浓度及H2O2用量对黄药降解效果的影响,用正交试验确定了四个因素的最好条件。结果表明:初始pH值和H2O2用量是影响去除效果的主要因素;氧化时间为60min,反应初始pH=4,[Fe2+]=20mg/L,[H2O2]=20mg/L,黄药的浓度为125mg/L时,黄药的去除率达到99.5%。 展开更多
关键词 选矿废水 黄药 FENTON 正交
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华支睾吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的功能鉴定 被引量：5
4
作者 徐劲 郑南才 +4 位作者 吴忠道 陈守义 胡旭初 应康 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第10期863-866,共4页
目的克隆肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因并在大肠杆菌内表达,同时对表达的重组蛋白进行初步的功能分析,为进一步的研究和药物筛选打下基础。方法通过大规模测序从肝吸虫cDNA文库中确定肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因,采用PCR方法扩增出目... 目的克隆肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因并在大肠杆菌内表达,同时对表达的重组蛋白进行初步的功能分析,为进一步的研究和药物筛选打下基础。方法通过大规模测序从肝吸虫cDNA文库中确定肝吸虫线粒体苹果酸脱氢酶基因,采用PCR方法扩增出目的片段,与表达质粒pGEX-4T-1连接构建重组质粒,IPTG诱导表达;研究重组蛋白的理化性质及酶动力学特征,并寻找可能的抑制剂。结果成功表达出约64 kDa的重组蛋白,凝血酶切后为36 kDa蛋白,其酶活性为63.6U/mg。1.14 mM 4,4′-二甲氨基联苯甲醇处理30 min酶活性下降了60%;吡喹酮、灭滴灵和阿苯哒唑对酶活性无抑制作用;而5’-单磷酸腺苷对重组酶有竞争性抑制作用,其Ki为0.49。结论成功地表达了目的蛋白,为药物筛选提供了一个易于获得的候选蛋白分子。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 线粒体苹果酸脱氢酶 异源表达 酶动力学参数 抑制
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应用胶体金免疫层析法快速检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原研究 被引量：7
5
作者 徐劲 陆家海 +1 位作者 方建民 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期26-27,共2页
目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克... 目的建立一种简易快速、适用于基层的胶体金免疫层析法 (ICT)用于检测恶性疟原虫中HRPⅡ抗原 ,判定是否现症感染。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记HRPⅡ单克隆抗体 ,制成免疫测试条。血中HRPⅡ抗原与测试条上金标记单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸纤维素膜移动 ,与膜上的固相特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线。结果 ICT测试条只与HRPⅡ抗原有特异性反应 ,与间日疟无交叉反应。与显微镜检比较特异性为 10 0 %。用该法检测体外培养的恶性疟原虫HRPⅡ抗原 ,其灵敏度在体外培养实验中 ,当红细胞感染虫体为 1%时使用 5 μl血稀释 10 0倍仍能检测出来。该法检测 30份用病原学确诊的恶性疟原虫和 2 0份间日疟标本 ,检出率为 10 0 % ,与间日疟无交叉反应。结论 ICT检测血中恶性疟原虫中HRPⅡ抗原特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 HRPⅡ抗原 胶体金免疫层析法
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恶性疟原虫疫苗研究Ⅳ──恶性疟原虫保护性抗原复合基因(PfCMR)的克隆与高效表达 被引量：2
6
作者 徐劲 余新炳 +3 位作者 罗树红 吴小舟 方建民 谢毅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第1期17-20,共4页
将恶性疟原虫保护性抗原复合基因（PfCMR）与表达质粒pWR450—1分别经BamHI、EcoRI双酶切后回收、纯化和重组并转化大肠杆菌JM109，再经含氨苄青霉素LB培基初筛后，挑白色菌落扩增，用PCR复筛和双酶切鉴定，阳性克隆子pWR450—1—B14用I... 将恶性疟原虫保护性抗原复合基因（PfCMR）与表达质粒pWR450—1分别经BamHI、EcoRI双酶切后回收、纯化和重组并转化大肠杆菌JM109，再经含氨苄青霉素LB培基初筛后，挑白色菌落扩增，用PCR复筛和双酶切鉴定，阳性克隆子pWR450—1—B14用IPTG诱导，在JM109中表达。表达产物经SDS—PAGE分析，在65kDa处出现较宽的蛋白条带。用SOS显色法证实此表达蛋白具有β-半乳糖苷酶活性。表达的融合蛋白与抗恶性疟原虫多克隆免疫血清特异结合．其滴度高达1：3200；Westernblot分析显示，表达蛋白能与特异性抗体产生较强的免疫反应。上述结果提示表达的融合蛋白具有生物学和免疫学活性。 展开更多
关键词 疟原虫 保护性抗原 复合基因 疟疾疫苗
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动态心电图与心肌酶谱监测甲基强的松龙冲击疗法治疗神经免疫性疾病的安全性评估 被引量：1
7
作者 徐劲 齐治平 +3 位作者 张永葆 张弛 祝善尧 马慧 《实用医学杂志》 CAS 2004年第10期1131-1132,共2页
目的 :评估甲基强的松龙冲击疗法治疗神经免疫性疾病的安全性。方法 :利用动态心电图及心肌酶监测甲基强的松龙冲击治疗神经免疫性疾病前与治疗中心率变异性改变、2 4h平均心率室性心律失常的发生及心肌酶的浓度变化。结果 :15例神经免... 目的 :评估甲基强的松龙冲击疗法治疗神经免疫性疾病的安全性。方法 :利用动态心电图及心肌酶监测甲基强的松龙冲击治疗神经免疫性疾病前与治疗中心率变异性改变、2 4h平均心率室性心律失常的发生及心肌酶的浓度变化。结果 :15例神经免疫性疾病的患者在甲基强的松龙冲击治疗中与治疗前的心率变异SDNN、rMS DD、PNN5 0指标经统计分析差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,2 4h平均心率经统计分析差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。室性心律失常统计分析差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论 :甲基强的松龙冲击疗法 (缓慢静脉给药 )同时配合补钾治疗是相对安全的。 展开更多
关键词 神经免疫性疾病 冲击治疗 甲基强的松龙冲击疗法 动态心电图 监测 心肌酶谱 室性心律失常 结论 意义 差异
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加巴喷丁联合泼尼松对带状疱疹后神经痛患者免疫功能、β-内啡肽及细胞因子水平的影响 被引量：7
8
作者 徐劲 张召力 罗卫 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2017年第5期168-172,共5页
目的探讨加巴喷丁联合泼尼松对带状疱疹后神经痛患者免疫功能、β-内啡肽及细胞因子水平的影响。方法选取空军总医院2015年3月至2016年3月收治的带状疱疹后神经痛患者95例为研究对象。依据随机数表法将入选患者分为观察组(48例)与对照组... 目的探讨加巴喷丁联合泼尼松对带状疱疹后神经痛患者免疫功能、β-内啡肽及细胞因子水平的影响。方法选取空军总医院2015年3月至2016年3月收治的带状疱疹后神经痛患者95例为研究对象。依据随机数表法将入选患者分为观察组(48例)与对照组(47例)。对照组患者给予泼尼松治疗,观察组患者在对照组治疗基础上联合加巴喷丁治疗。两组患者疗程均为2周。比较两组患者疗效,治疗前后免疫功能、β-内啡肽、细胞因子、视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分变化及不良反应发生情况。结果观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者CD3^+、CD4^+水平及CD4^+/CD8^+较治疗前显著升高(P<0.05),CD8^+水平较治疗前显著下降(P<0.05);观察组患者CD3^+、CD4^+水平及CD4^+/CD8^+均显著高于对照组(P<0.05),CD8^+水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者血浆β-内啡肽水平较治疗前均显著升高(P<0.05),观察组患者血浆β-内啡肽水平显著高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平较治疗前显著降低(P<0.05),白介素-2(interleukin-2,IL-2)水平较治疗前显著升高(P<0.05);观察组患者血清TNF-α水平低于对照组(P<0.05),IL-2水平高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者VAS评分较治疗前均显著降低(P<0.05),观察组患者VAS评分低于对照组(P<0.05)。两组患者心电图、血常规、尿常规、肝肾功能均未见异常,且未见严重药物不良反应。结论加巴喷丁联合泼尼松治疗带状疱疹后神经痛疗效显著,其作用可能与改善患者免疫功能、减轻炎性反应、增加β-内啡肽水平有关,且安全性良好,值得临床进一步关注。 展开更多
关键词 加巴喷丁 泼尼松 带状疱疹后神经痛 免疫功能 Β-内啡肽 细胞因子
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行业信用风险限额测算的方法与实证 被引量：3
9
作者 徐劲 《统计与决策》 CSSCI 北大核心 2013年第22期144-147,共4页
测算行业信用风险限额可以运用运筹学中的非线性规划方法分两步进行,先通过建立目标函数为贷款风险调整后的资本收益率最大,约束条件为行业贷款加权增长率等于全行目标增长率的非线性规划模型,得到行业信用风险限额的初步测算结果,再借... 测算行业信用风险限额可以运用运筹学中的非线性规划方法分两步进行,先通过建立目标函数为贷款风险调整后的资本收益率最大,约束条件为行业贷款加权增长率等于全行目标增长率的非线性规划模型,得到行业信用风险限额的初步测算结果,再借助于建立目标函数为组合贷款总体风险最小,约束条件为组合贷款收益率不小于预期收益率的非线性规划模型,对初步测算结果进行修正,得到行业信用风险限额的最终测算结果。 展开更多
关键词 商业银行 内部评级 信用风险限额 风险管理
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小企业金融脆弱性及应对策略研究 被引量：3
10
作者 徐劲 《西南金融》 北大核心 2013年第5期47-51,共5页
银行体系脆弱性具有内生性,是由银行业本身低杠杆率、期限错配、信息不对称、经营的顺周期性等特点决定的。作为商业银行业务的一个重要分支,小企业金融同样具有脆弱性,且严重程度更甚。通过银行体系脆弱性测度方法的分析研究,可以找出... 银行体系脆弱性具有内生性,是由银行业本身低杠杆率、期限错配、信息不对称、经营的顺周期性等特点决定的。作为商业银行业务的一个重要分支,小企业金融同样具有脆弱性,且严重程度更甚。通过银行体系脆弱性测度方法的分析研究,可以找出应对小企业金融脆弱性的策略,即推进内部评级法,实施行业信用风险限额管理,保持信贷规模的适度扩张,提高小企业金融的收益水平,实行逆周期动态计提拨备,实现小企业金融持续稳定发展。 展开更多
关键词 商业银行 小企业金融 脆弱性
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一种同步卫星授时方法的再探讨 被引量：1
11
作者 徐劲 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期165-171,共7页
通过对原有测轨和预报方案的改善，对共视时差法时刻比对的进一步研究．实验结果表明：采用现在的测轨和预报方案，时刻比对的事后处理精度与以前相当，优于1μs，但预报精度比以前有了较大提高，对卫星轨道预报1星期，相应的时刻比对... 通过对原有测轨和预报方案的改善，对共视时差法时刻比对的进一步研究．实验结果表明：采用现在的测轨和预报方案，时刻比对的事后处理精度与以前相当，优于1μs，但预报精度比以前有了较大提高，对卫星轨道预报1星期，相应的时刻比对精度也基本可保持在1μs以内． 展开更多
关键词 同步卫星 轨道确定 时刻比对 预报 共视时差法
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恶性疟原虫HT1基因荧光真核表达载体的构建及细胞内表达
12
作者 徐劲 余新炳 +1 位作者 叶苓 陆家海 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期66-68,共3页
目的　体外扩增恶性疟原虫海南分离株的已糖转运体基因 (pfHT1) ,构建恶性疟原虫HT1基因真核融合表达载体并检测其表达情况 ,为用于DNA免疫作准备。方法　特定PCR引物的设计 ,扩增 ,基因组DNA提取 ,连接 ,鉴定 ,细胞培养 ,脂质体转染 ,... 目的　体外扩增恶性疟原虫海南分离株的已糖转运体基因 (pfHT1) ,构建恶性疟原虫HT1基因真核融合表达载体并检测其表达情况 ,为用于DNA免疫作准备。方法　特定PCR引物的设计 ,扩增 ,基因组DNA提取 ,连接 ,鉴定 ,细胞培养 ,脂质体转染 ,荧光显微镜观察。结果　从恶性疟原虫海南分离株基因组DNA中扩增特异的编码 pfHT1的基因序列 ,片断大小为 15 16bp ,经酶切鉴定证实成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,将其转染体外培养的细胞后 ,可见融合蛋白表达产生的明亮的绿色荧光。结论　成功构建 pEGFP -HT1融合表达质粒 ,并实现在细胞内的表达。为进行动物体内的DNA免疫打下了基础。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 DNA疫苗 基因转染 恶性疟原虫 已糖转运体 基因表达 真核表达载体
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基于随机过程跨越理论的钢轨动力可靠性分析与比较
13
作者 徐劲 谢伟平 蒋沧如 《工程设计学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期226-230,共5页
采用模态分析方法建立车辆-轨道垂向耦合动力计算模型,使用W ilson-θ数值积分方法,得到钢轨在列车荷载作用下的随机振动响应.基于随机过程跨越理论,得到在不同的跨越假设以及极值分布条件下钢轨的动力响应可靠度,并与数值模拟法计算的... 采用模态分析方法建立车辆-轨道垂向耦合动力计算模型,使用W ilson-θ数值积分方法,得到钢轨在列车荷载作用下的随机振动响应.基于随机过程跨越理论,得到在不同的跨越假设以及极值分布条件下钢轨的动力响应可靠度,并与数值模拟法计算的结果进行比较.结果表明:对于低跨越界限,极值I型分布方法的计算结果与精确值最为接近;而对于高界限,高斯分布法效果最好. 展开更多
关键词 随机过程 跨越理论 动力可靠性
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CCD等高仪测定太阳直径的模拟计算及其精度分析
14
作者 徐劲 徐家岩 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期214-220,共7页
本文根据用光电等高仪测定太阳直径的基本原理，给出了用ＣＣＤ作探测器测定太阳直径的处理方法，并用模拟方法对不同的ｓｅｅｉｎｇ值产生了几组太阳曝光的ＣＣＤ底片．通过对这些ＣＣＤ底片的数字图象的处理和计算，对太阳直径的测定... 本文根据用光电等高仪测定太阳直径的基本原理，给出了用ＣＣＤ作探测器测定太阳直径的处理方法，并用模拟方法对不同的ｓｅｅｉｎｇ值产生了几组太阳曝光的ＣＣＤ底片．通过对这些ＣＣＤ底片的数字图象的处理和计算，对太阳直径的测定精度进行了估计和分析．计算分析表明，不论对单像还是双像方案，ＣＣＤ等高仪都能以好于０．″０５的精度测定太阳的直径． 展开更多
关键词 CCD等高仪 太阳直径 模拟计算
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Adams--Cowel方法的扩充及其在人卫中的应用
15
作者 徐劲 《宇航学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第1期111-115,共5页
本文将现有的Ａｄａｍｓ－Ｃｏｗｅｌ方法由求初值问题扩展到求一类边值问题，并将之应用于对同步卫星的轨道测定和预报。
关键词 数值方法 边值问题 人造卫星 动力学
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单体银行视角小企业金融脆弱性测度研究
16
作者 徐劲 《首都经济贸易大学学报》 北大核心 2013年第5期29-38,共10页
由内生特点决定的银行体系脆弱性会阻碍市场机制的高效运行和宏观经济政策的有效传导,引发金融危机。作为银行业务的重要分支,小企业金融的脆弱性较银行体系更甚。单体银行脆弱性的测度与银行的资产收益率、不良贷款率、杠杆率和RAROC... 由内生特点决定的银行体系脆弱性会阻碍市场机制的高效运行和宏观经济政策的有效传导,引发金融危机。作为银行业务的重要分支,小企业金融的脆弱性较银行体系更甚。单体银行脆弱性的测度与银行的资产收益率、不良贷款率、杠杆率和RAROC等指标相关。通过因子分析法对某银行小企业金融实际数据的分析,验证了单体银行脆弱性测度同样适用于小企业金融。据此可以找出小企业金融脆弱性的相关因素,并分析出有效应对小企业金融脆弱性的路径和策略,即保持合理的小企业金融发展速度,加快实施内部评级法,丰富小企业金融服务内涵和建立逆周期计提拔备机制。 展开更多
关键词 商业银行 小企业金融 脆弱性 测度
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从非正规金融视角看小企业金融的发展策略
17
作者 徐劲 《农村金融研究》 2013年第11期51-55,共5页
非正规金融是小企业金融的补充和替代。我国非正规金融因金融抑制而存在,因信息不对称而发展,但并未因金融管制的逐步放开而萎缩和消失,反而促成了非正规金融与小企业金融之间的竞争局面,两者之间的市场份额呈动态平衡之势。从非正规金... 非正规金融是小企业金融的补充和替代。我国非正规金融因金融抑制而存在,因信息不对称而发展,但并未因金融管制的逐步放开而萎缩和消失,反而促成了非正规金融与小企业金融之间的竞争局面,两者之间的市场份额呈动态平衡之势。从非正规金融的视角看,小企业金融在包含交易成本和借贷利息在内的综合融资成本上并无优势,小企业金融要争取市场主动,实现持续发展,发挥小企业融资的主渠道作用,必须打破平衡,通过降低交易成本和控制借贷利率的发展策略,形成综合融资成本的比较优势。 展开更多
关键词 企业金融 金融视角 非正规金融 市场份额 融资成本 交易成本 借贷利率 信息不对称
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猪带绦虫乳酸脱氢酶基因的序列分析、克隆表达和免疫学分析 被引量：10
18
作者 杜武英 黄江 +4 位作者 胡旭初 余新柄 徐劲 廖兴江 戴佳琳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期246-251,共6页
目的利用生物信息学方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中识别乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A),分析和预测其编码蛋白的结构和功能,并对其进行克隆表达和免疫学特性研究。方法利用NCBI和ExPASy中有关基因、蛋白的序列和结构信息分... 目的利用生物信息学方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中识别乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDH-A),分析和预测其编码蛋白的结构和功能,并对其进行克隆表达和免疫学特性研究。方法利用NCBI和ExPASy中有关基因、蛋白的序列和结构信息分析工具,结合其它生物信息学分析软件包,从猪带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别乳酸脱氢酶A(TsLDH-A)的基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白的结构与功能;并将TsLDH-A克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL-21/DE3中诱导表达,表达产物经纯化后用蛋白印迹(Western Blotting)进行免疫学分析。结果该基因全长1 332bp,编码331个氨基酸。其氨基酸序列与其它物种LDH-A氨基酸序列一致性可达54%,具有乳酸脱氢酶保守结构域。其编码的蛋白理论分子量为3 5461.1Da,有3个跨膜区和多个磷酸化位点,蛋白的理化性质较稳定。预测有4个主要的B细胞抗原表位,L-乳酸脱氢酶活化位点之一的His192包含于表位190-199aa中。酶催化位点的3个关键氨基酸在空间结构上相互靠近。PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-TsLDH-A构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠杆菌BL-21/DE3中获得表达,经亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白能被TsLDH-A重组蛋白免疫的SD大鼠血清、感染了猪带绦虫的病人血清及猪血清识别,表明其具有较好的免疫原性和免疫反应性。结论应用生物信息方法从猪带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了TsLDH-A的全长序列并预测得到其编码蛋白的结构与功能方面的信息,该基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达。 展开更多
关键词 猪带绦虫 乳酸脱氢酶A 序列分析 克隆表达 免疫学特性
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猪带绦虫成虫cDNA质粒文库的构建及EST测序 被引量：14
19
作者 黄江 胡旭初 +4 位作者 徐劲 余新炳 包怀恩 郎书源 廖兴江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1126-1128,共3页
目的构建猪带绦虫(Taeniasolium)成虫全长cDNA表达文库,为获取猪带绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取猪带绦虫成虫mRNA,构建pBluescriptIISK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;... 目的构建猪带绦虫(Taeniasolium)成虫全长cDNA表达文库,为获取猪带绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取猪带绦虫成虫mRNA,构建pBluescriptIISK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建文库的质量。随机挑选质粒文库转化的阳性重组克隆,进行较大规模的5’端测序,归并unigene。结果文库库容达到1×106pfu/ml,插入片段的大小主要在1000bp以上。获得有效EST序列2000条,归并为1171条unigene。结论已成功获得一高质量的猪带绦虫成虫全长cD-NA表达文库,并获得了较丰富的成虫表达基因数据。 展开更多
关键词 猪带绦虫成虫 全长cDNA质粒文库 表达序列标签(EST)
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燃煤电厂SCR烟气脱硝系统拦截滤网磨损与流动阻力实验研究 被引量：10
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作者 陈鸿伟 罗敏 +2 位作者 李岩 王远鑫 徐劲 《热力发电》 CAS 北大核心 2017年第3期70-76,共7页
烟气拦截滤网对飞灰的耐磨蚀性能和引起的流动压降损失会影响拦截滤网系统稳定安全运行,进而影响选择性催化还原(SCR)烟气脱硝系统催化剂床层的安全运行。为了解飞灰质量浓度对拦截滤网冲蚀磨损影响及流动阻力特性规律,搭建冷态模拟实验... 烟气拦截滤网对飞灰的耐磨蚀性能和引起的流动压降损失会影响拦截滤网系统稳定安全运行,进而影响选择性催化还原(SCR)烟气脱硝系统催化剂床层的安全运行。为了解飞灰质量浓度对拦截滤网冲蚀磨损影响及流动阻力特性规律,搭建冷态模拟实验台,对材质为316、316L、2Cr13 3种不锈钢滤网在不同飞灰质量浓度下的磨损性能进行了实验研究,采用一元线性回归,拟合得到不同材质滤网磨损速率与飞灰质量浓度的经验关联式;同时测定了2种不同脊角316L滤网在不同飞灰质量浓度及流速下的流动阻力压降。结果表明:拟合关联式中,3种滤网的浓度系数均在1.006 7~1.116 9;实验条件下,2Cr13滤网的耐磨损性能最佳,316滤网次之,316L滤网最差;滤网流动阻力压降随时间的延长而趋于平衡;流速一定时,随着飞灰质量浓度的增大,平衡所需时间有所缩短;在相同条件下,脊角为90°滤网布置方式的流动性能优于60°的滤网布置方式。研究结果可为工程中SCR脱硝系统拦截滤网的设计、选型提供研究基础和理论参考。 展开更多
关键词 烟气脱硝 SCR 滤网 磨损性能 阻力特性 流动阻力压降 脊角 浓度系数
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