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犬副流感病毒N蛋白的真核表达及多克隆抗体制备
1
作者 刘敏 程淮 +3 位作者 郑珍珍 张梦思 张贺伟 任静强 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2287-2294,共8页
【目的】通过真核表达系统表达犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus,CPIV)N蛋白,并制备N蛋白多克隆抗体,为后续CPIV N蛋白的鉴定及病毒在生命周期过程中的功能研究提供基础。【方法】构建CPIV N蛋白真核表达质粒pCAGGS-N,经PCR和We... 【目的】通过真核表达系统表达犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus,CPIV)N蛋白,并制备N蛋白多克隆抗体,为后续CPIV N蛋白的鉴定及病毒在生命周期过程中的功能研究提供基础。【方法】构建CPIV N蛋白真核表达质粒pCAGGS-N,经PCR和Western blotting验证质粒功能后,免疫小鼠,制备CPIV N蛋白多克隆抗体;ELISA法测定抗体效价达到理想效价后,终止免疫;通过Western blotting、间接免疫荧光试验对抗体进行鉴定和分析,并测定多克隆抗体的中和活性。【结果】酶切连接、测序验证结果显示,成功构建了CPIV N蛋白真核表达重组质粒pCAGGS-N,且该质粒可在真核细胞中正常转录和翻译;通过DNA免疫成功制备了小鼠抗CPIV N蛋白多克隆抗体,效价为1∶128000。Western blotting结果显示,该抗体可与纯化的CPIV病毒粒子及外源性表达的CPIV N蛋白结合,分子质量约为59 ku。间接免疫荧光试验结果显示,制备的多克隆抗体可特异性识别并结合具有空间构象的CPIV N蛋白,但该多克隆抗体不具有病毒中和活性。【结论】本试验成功构建了真核表达质粒pCAGGS-N,并通过DNA免疫方法成功制备了小鼠抗CPIV N蛋白的多克隆抗体,该抗体具有良好的反应性和特异性,但未显示出中和病毒的活性,为进一步研究CPIV N基因的功能及其他细胞免疫学试验提供了研究基础。 展开更多
关键词 犬副流感病毒(CPIV) 核衣壳蛋白 真核表达 DNA免疫 多克隆抗体
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猪德尔塔冠状病毒感染与抗感染研究进展
2
作者 毛福超 翟崇凯 +4 位作者 田文静 王聪慧 宋敏杰 王迎鲜 张贺伟 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1281-1291,共11页
猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型肠道冠状病毒,主要感染哺乳仔猪,临床表现为腹泻、呕吐、脱水等症状,发病率可达100%。PDCoV严重危害新生仔猪健康,现已成为引起猪群腹泻的主要病原体之一。PDCoV通过膜融合... 猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型肠道冠状病毒,主要感染哺乳仔猪,临床表现为腹泻、呕吐、脱水等症状,发病率可达100%。PDCoV严重危害新生仔猪健康,现已成为引起猪群腹泻的主要病原体之一。PDCoV通过膜融合及受体介导的内吞作用侵入宿主细胞,S蛋白是病毒侵入细胞的主要结构,表面氨基肽酶N、小窝蛋白是病毒侵入细胞的关键位点。此外,表面氨基肽酶N目前被认为是PDCoV跨物种传播的重要位点。细胞通过干扰素(IFN)基因表达、胆固醇代谢及N蛋白泛素化等途径引发抗感染。PDCoV通过自身结构蛋白、辅助蛋白及非结构蛋白等通过干扰IFN的表达及诱导侵染细胞凋亡等途径产生免疫逃避,进而持续侵染宿主细胞。目前用于预防和控制PDCoV感染的商业疫苗或抗病毒药物多在试验研发阶段或初上市阶段,其对PDCoV的预防和控制的临床效果亟需市场验证。尤其是针对病毒复制、免疫逃逸、抗PDCoV宿主因子等靶点开发的抗病毒药物或疫苗,为未来开发新型疫苗或抗病毒药物研发提供了新的研究方向和坚实的基础。笔者通过阐述PDCoV与宿主之间的感染和抗感染机制,探究多种抗病毒药物抑制PDCoV感染的潜在作用机制,为研究PDCoV致病机制、抗PDCoV感染治疗以及新药物的开发提供参考。 展开更多
关键词 猪德尔塔冠状病毒(PDCoV) 致病性 免疫逃逸 抗病毒机制
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时变OFDM系统的研究及其在WLAN中的应用
3
作者 张贺伟 邵凯 郭志刚 《广东通信技术》 2015年第12期48-52,70,共6页
OFDM是一种多载波调制技术,因其较好的抗干扰与较高的频谱利用率,广泛应用于各领域当中。但OFDM系统存在较高的PAPR,现有降低PAPR的方法,都是针对信号本身的相位或者信号的幅值进行处理的,即调制系统的符号块长度和子载波数都是固定的... OFDM是一种多载波调制技术,因其较好的抗干扰与较高的频谱利用率,广泛应用于各领域当中。但OFDM系统存在较高的PAPR,现有降低PAPR的方法,都是针对信号本身的相位或者信号的幅值进行处理的,即调制系统的符号块长度和子载波数都是固定的。针对这种固定参数设置方法,从系统的载波数入手,提出一种新的以PAPR为参数来时变多载波系统的载波数目,通过这种时变载波数目的方法降低OFDM系统的PAPR。同时,还将这种时变OFDM系统应用到WLAN系统中,通过从信号幅值、PAPR、BER性能进行研究,并与传统的OFDM系统在WLAN中的应用进行比较。仿真结果表明,无论是PAPR性能,还是BER性能,这种时变载波数法性能要更优。 展开更多
关键词 正交频分复用 时变正交频分复用 峰均功率比
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缺血修饰白蛋白水平与冠心病冠状动脉狭窄严重程度的相关性 被引量：3
4
作者 曹辉彩 蔡会欣 +5 位作者 张志强 戴冬雪 冯亮 马蓓洁 张明 张贺伟 《临床荟萃》 CAS 2014年第10期1158-1161,共4页
目的探讨缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)水平与冠心病患者冠状动脉狭窄严重程度的相关性。方法接受冠状动脉造影的急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者97例,根据冠状动脉病变累及左前降支、回旋支和... 目的探讨缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)水平与冠心病患者冠状动脉狭窄严重程度的相关性。方法接受冠状动脉造影的急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者97例,根据冠状动脉病变累及左前降支、回旋支和右冠状动脉等情况将ACS患者分为单支病变组、双支病变组、3支病变组,根据冠状动脉狭窄部位进行Gensini记分,将ACS患者按冠状动脉病变程度Gensini积分分为轻度、中度、重度病变组3组,同期收集健康体检者150例为正常对照组,比较各组IMA水平。结果 ACS患者血清IMA水平显著高于正常对照组。3支病变组与正常对照组之间比较IMA水平水平显著升高;双支病变组和3支病变组IMA水平均高于单支病变组;3支病变组IMA水平高于双支病变组IMA水平。不同Gensini积分与正常对照组之间比较IMA水平显著升高;中度病变组和重度病变组IMA水平均高于轻度病变组;重度病变组IMA水平略高于中度病变组IMA水平。结论IMA水平升高与冠心病患者冠状动脉病变支数及其严重程度密切相关,监测血清中IMA水平对ACS严重程度的判定及风险程度的预警提供了重要参考价值。 展开更多
关键词 冠心病 冠状动脉狭窄 急性冠状动脉综合征 缺血修饰白蛋白
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高职食品专业群“1+X”证书制度背景下科教融汇现状与突破路径研究
5
作者 王梦雅 张小燕 +2 位作者 张贺伟 李靖 陈博 《现代食品》 2024年第7期54-58,共5页
本文分析了“1+X”证书制度背景下,当前高职食品专业群科教融汇面临的科研平台搭建、优化教学资源、教师团队培育与人才培养模式等问题,并提出通过构建科教融汇资源共享机制、优化职业教育课程教学资源、加强新“双师型”教师培育以及... 本文分析了“1+X”证书制度背景下,当前高职食品专业群科教融汇面临的科研平台搭建、优化教学资源、教师团队培育与人才培养模式等问题,并提出通过构建科教融汇资源共享机制、优化职业教育课程教学资源、加强新“双师型”教师培育以及建立教学科研协同育人机制四大手段,促进职业教育“1+X”证书制度与人才培养、科研创新与产业升级相互融通,增强职业教育适应性,实现培养创新型高水平技术技能人才的目标。 展开更多
关键词 科教融汇 “1+X”证书制度 人才培养 岗课赛证
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现代学徒制在校企合作中的作用 被引量：2
6
作者 张贺伟 程相朝 《职业技术》 2019年第11期15-18,共4页
伴随我国社会经济的发展,“现代学徒制”培养模式在高校教育培育人才的体制中发挥了中流砥柱的作用,尤其在农学、工学等专业,以及中职、高职等职业教育的人才培养过程中表现突出。但由于中、高职院校毕业生对工作性质、环境以及企业对... 伴随我国社会经济的发展,“现代学徒制”培养模式在高校教育培育人才的体制中发挥了中流砥柱的作用,尤其在农学、工学等专业,以及中职、高职等职业教育的人才培养过程中表现突出。但由于中、高职院校毕业生对工作性质、环境以及企业对学生的待遇等因素与学生期望值存在一定的差距,为此更多的学生倾向于提升自我学历,以期提高自己的专业能力与素养。但高学历并未与学生胜任工作的能力呈正比,学历只在一定程度上表明学生攻读学位期间的理论知识水平,单纯提高学生学历,并不能适应社会不同行业的发展。唯有提高学生实践应用操作能力,强化专业技能素质,培养高技能应用型人才,方能促进行业的发展。本文对不同专业类别的学生在高校与企业进行联合培养的实例进行了分析与阐述。得出结论,应用型人才更能满足企业发展需求,能使学生更快融入企业并实现自我价值。而培养“高技能应用型人才”的关键在于理论结合实践的教学模式:一方面,应积极建设实践生产教学基地以提高师生动手能力;另一方面,通过校企合作培养学生,联合培养高技能应用型人才,不但满足了学校对人才培养的初心,亦能满足行业对人才的需求,真正实现校企互利共赢。 展开更多
关键词 现代学徒制 校企合作 高等教育 人才培养
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猪沙门氏菌感染防控研究进展 被引量：6
7
作者 张淼丹 张贺伟 《中国饲料》 北大核心 2023年第4期5-8,共4页
沙门氏菌(Salmonella)的环境适应能力强、传播途径多样,猪群一旦感染较难控制,猪场应采取综合防控措施。猪场要严格引种检疫,使用无沙门氏菌污染的饲料和饮水,特别要构建完善的生物安全体系,落实落细生物安全措施。管理水平差的中小猪... 沙门氏菌(Salmonella)的环境适应能力强、传播途径多样,猪群一旦感染较难控制,猪场应采取综合防控措施。猪场要严格引种检疫,使用无沙门氏菌污染的饲料和饮水,特别要构建完善的生物安全体系,落实落细生物安全措施。管理水平差的中小猪场和沙门氏菌流行率高的猪场可以使用疫苗免疫预防,常规猪场可以使用中药提取物、微生态制剂等进行预防保健。提高机体抵抗力是降低沙门氏菌感染率的根本。猪群一旦发现沙门氏菌感染,可以采用对因治疗、对症治疗和支持疗法控制病情。 展开更多
关键词 沙门氏菌 保育猪 中药提取物 微生态制剂 综合防控
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鸡EED基因的原核表达与生物信息学分析
8
作者 郁川 宋敏杰 +5 位作者 石胜丽 朱文文 张贺伟 田文静 王聪慧 程相朝 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3545-3553,共9页
本研究旨在获得鸡胚胎外胚层发育(embryonic ectoderm development,EED)原核表达蛋白,并利用生物信息学方法探索其潜在生物学功能。以提取的3日龄雏鸡脾脏总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增鸡EED基因,将其克隆至pET-32a(+)载体,构建重组... 本研究旨在获得鸡胚胎外胚层发育(embryonic ectoderm development,EED)原核表达蛋白,并利用生物信息学方法探索其潜在生物学功能。以提取的3日龄雏鸡脾脏总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增鸡EED基因,将其克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达载体pET-32a-EED,转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中进行IPTG诱导表达;Western blotting检测经镍离子亲和层析法纯化的鸡EED蛋白,并利用在线软件对其进行生物信息学分析。结果显示,鸡EED基因序列全长1341 bp,与参考序列(GenBank登录号:NM_001031376.1)相似性为99.85%;当诱导温度为28℃,加入终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导剂诱导表达7 h时,可在重组菌裂解上清中纯化得到分子质量约70 ku的鸡EED融合蛋白。在线软件分析表明,鸡EED蛋白相对分子质量为50377.92,理论等电点(pI)为6.54,为亲水蛋白,无跨膜结构域和信号肽序列,该蛋白序列与人多疏蛋白EED三级结构模板序列(6c23.1)相似,同样具有肿瘤靶点WD40结构域。结果表明,本研究成功获得大肠杆菌表达的鸡EED可溶性蛋白,且该蛋白具有重要的功能元件,可为深入探索鸡EED蛋白的生物学功能与调控机理提供材料。 展开更多
关键词 鸡 EED基因 表达 纯化 生物信息学
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猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫保护机制及疫苗研究进展 被引量：3
9
作者 翟崇凯 毛福超 张贺伟 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期86-98,共13页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原变异以及毒株中和表位的免疫保护机制研究现状,系统分析了传统疫苗、反向遗传学构建的嵌合疫苗、基因工程疫苗、干扰素诱导激活疫苗以及纳米疫苗等的研究进展,提出了通过不断改良佐剂、改进接种方式等途径开发新型PRRSV疫苗,有望加快终结PRRS的全球流行,为研发安全高效的新型PRRSV疫苗提供了参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异毒株 中和表位 免疫保护机制 疫苗
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