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题名葡萄糖氧化酶基因在黑曲霉中的分泌表达
被引量：2
- 1
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作者
张谷楠
李硕然
汪天虹
钟耀华
韩建春
李杰
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机构
东北农业大学生命科学学院
山东大学生命科学学院
东北农业大学食品学院
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出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第18期209-213,共5页
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基金
山东大学微生物技术国家重点实验室开放项目资助(M2008-17)
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文摘
通过PCR扩增从一株葡萄糖氧化酶生产菌黑曲霉中克隆得到1818bp葡萄糖氧化酶基因GOD,将GOD基因与糖化酶基因的5’同源臂、3’同源臂进行重叠延伸,构建葡萄糖氧化酶基因的表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-GOD。将载体pSZH-GOD通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得8株重组菌株。对8株重组菌株的发酵液上清液进行酶活测定,结果表明葡萄糖氧化酶基因在高产糖化酶的黑曲霉中得到了分泌表达,静置培养6d后其分泌表达的葡萄糖氧化酶酶活最高可达1.166U/mL,而在出发菌株中检测不到葡萄糖氧化酶的分泌表达。同时,重组菌株胞内表达的葡萄糖氧化酶最高酶活可达11.45U/mL,是出发菌株的266倍。此研究结果为简化葡萄糖氧化酶发酵生产工艺、提高酶产量提供了新的途径。
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关键词
葡萄糖氧化酶
黑曲霉
转化
分泌表达
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Keywords
glucose oxidase
Aspergillus niger
transformation
secretory expression
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分类号
Q786
[生物学—分子生物学]
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题名农杆菌介导pepA基因对黑曲霉菌丝体的遗传转化
被引量：3
- 2
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作者
李杰
李硕然
张谷楠
汪天虹
钟耀华
赵宁
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机构
东北农业大学生命科学学院
山东大学生命科学学院
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出处
《东北农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第5期29-35,F0002,共8页
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基金
山东大学微生物技术国家重点实验室开放项目(M2008-17)
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文摘
通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1 347 bp的酸性蛋白酶基因pepA与黑曲霉糖化酶基因5'同源臂和3'同源臂进行拼接,构建pepA基因表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-pepA。将载体pSZH-pepA通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉菌丝体。以PDA作为共培养培养基,乙酰丁香酮(简称AS)浓度200μmol.mL-1的条件下,28℃恒温静置培养48 h,经潮霉素筛选和PCR鉴定获得3株重组菌株。以出发菌株作为对照,对3株重组菌株静置培养7 d后的发酵液上清进行酶活测定,结果发现酸性蛋白酶酶活最高达45.56 U.mL-1,而出发菌株的酸性蛋白酶酶活仅为3.72 U.mL-1,表明酸性蛋白酶基因pepA在高产糖化酶的黑曲霉中得到表达。研究建立了农杆菌介导的pepA基因导入黑曲霉菌丝体的转化体系,为实现酸性蛋白酶在黑曲霉菌丝体中高效表达奠定基础。
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关键词
酸性蛋白酶
黑曲霉
重叠延伸PCR
ATMT
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Keywords
Acidic protease
Aspergillus niger, Overlap extension PCR
ATMT
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分类号
S767.5
[农业科学—森林保护学]
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题名肉牛胃肠炎的病因、临床症状与防治措施
被引量：8
- 3
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作者
张谷楠
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机构
黑龙江省肇州县畜牧兽医局
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出处
《现代畜牧科技》
2018年第11期87-87,共1页
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文摘
肉牛胃肠炎是指胃肠黏膜下组织发生炎症,且炎症通常同时发生或者陆续发生,是春夏之季比较容易发生的一种肠道疾病,主要是由于饲养管理不当而引起。病牛症状严重时,临床上主要特征是胃肠消化功能异常,发热,腹泻,机体脱水,自体中毒以及酸中毒。现概述该病的防治措施,供参考。
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关键词
肉牛
胃肠炎
病因病机
临床症状
西药治疗
中药治疗
饲养管理
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分类号
S858.23
[农业科学—临床兽医学]
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题名母猪子宫内膜炎的病因分析、临床表现及中西医疗法
被引量：3
- 4
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作者
张谷楠
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机构
黑龙江省肇州县畜牧兽医局
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出处
《现代畜牧科技》
2018年第12期54-54,共1页
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文摘
母猪子宫内膜炎是母猪常见的一种产科疾病,主要是由于在分娩过程中或者产后通过产道侵入病原微生物而导致发病,会对机体受胎产生影响,甚至引起不孕。目前,该病在规模化猪场养猪中呈现逐渐蔓延的趋势,发病率大约为20%,有时能够高达40%～50%。现概述该病的中西医治疗措施,供大家参考。
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关键词
母猪
子宫内膜炎
病因分析
临床症状
西药治疗
中药治疗
饲养管理
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分类号
S858.28
[农业科学—临床兽医学]
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题名猪应激综合征的不良影响、临床症状和防治方法
被引量：1
- 5
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作者
张谷楠
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机构
黑龙江省肇州县畜牧兽医局
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出处
《现代畜牧科技》
2019年第1期74-75,共2页
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文摘
猪应激综合征是一类综合性疾病,是指猪在长距离运输、气温骤变或者饲养环境变化等因素的刺激下,造成其体温升高、采食减少、喘气明显、发生下痢或者便秘等,症状严重时后期可见皮肤红紫,特别是在引种时更容易发生。猪应激综合征在养猪业中比较常见,会阻碍生长发育,引起繁殖障碍,导致发病率、死亡率有所增高,造成生产水平降低,使养猪业的经济效益降低。现概述该病的不良影响、临床症状以及防治方法,供养猪户参考。
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关键词
猪
应激综合征
不良影响
临床症状
引种运输
饲养管理
药物治疗
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分类号
S858.28
[农业科学—临床兽医学]
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