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基于网络药理学及体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘的分子机制
1
作者
张莎苒
周玲羚
+5 位作者
李一帆
李晓丹
徐元雯
王虹景
王禹霏
刘伟
《中国医药导报》
2025年第7期31-38,共8页
目的 通过网络药理学技术和体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘(以下简称“哮喘”)的作用机制。方法通过TCMSP、Pub Chem、Swiss Target Prediction和Uni Prot数据库筛选补肺颗粒的有效成分及作用靶点;利用Gene Card、OMIM数据库检索...
目的 通过网络药理学技术和体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘(以下简称“哮喘”)的作用机制。方法通过TCMSP、Pub Chem、Swiss Target Prediction和Uni Prot数据库筛选补肺颗粒的有效成分及作用靶点;利用Gene Card、OMIM数据库检索哮喘的疾病靶点,选取成分与疾病的交集靶点作为蛋白靶点库,采用STRING获取交集靶点蛋白相互作用的网络,通过Cytoscape软件筛选核心靶点基因;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析及京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析,微生信平台对结果进行可视化,并构建药物-成分-靶点网络图;利用Auto Dock Tools、Vina及Pymol对药物有效成分与核心靶点进行分子对接。利用CCK-8评价药物对细胞活性的影响,并将人类支气管平滑肌细胞分为空白组和给药组(100μg/ml),采用Western blot法、RT-q PCR、酶联免疫吸附试验法检测PDK1、Akt、PDE4D、c AMP表达水平。结果 补肺颗粒靶点897个,哮喘靶点1 321个,两者的交集靶点238个。GO富集分析得到生物过程729项、细胞组成76项、分子功能169项。KEGG通路主要包括PI3K-Akt信号通路、c AMP信号通路、MAPK信号通路等。关键靶点包括Akt1、TNF、PTGS2等,关键成分包括槲皮素、山柰酚、木犀草素等。分子对接显示,Akt1和PDE4D与槲皮素、山柰酚、木犀草素均具有较好的结合活性。细胞实验显示,补肺颗粒浓度为100μg/ml时,细胞存活率较0μg/ml时降低(P<0.01),给药组PDK1和PDE4D的m RNA表达量低于空白组,Akt的m RNA表达量高于空白组(P<0.05);给药组p-PDK1和p-PDE4D蛋白表达水平低于空白组,p-Akt的m RNA表达量高于空白组(P<0.05);给药组c AMP表达高于空白组(P<0.01)。结论 补肺颗粒可能通过槲皮素、山柰酚、木犀草素等成分,作用于Akt、PDE4D等靶点,调节PI3K-Akt、c AMP等信号通路,从而发挥治疗哮喘的作用。
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关键词
PDK1/Akt/PDE4D信号通路
补肺颗粒
支气管哮喘
网络药理学
分子对接
实验验证
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职称材料
题名
基于网络药理学及体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘的分子机制
1
作者
张莎苒
周玲羚
李一帆
李晓丹
徐元雯
王虹景
王禹霏
刘伟
机构
天津中医药大学研究生院
出处
《中国医药导报》
2025年第7期31-38,共8页
基金
天津市教委科研计划项目(2021ZD018)
天津市卫生健康委员会中医药重点领域项目(2022010)。
文摘
目的 通过网络药理学技术和体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘(以下简称“哮喘”)的作用机制。方法通过TCMSP、Pub Chem、Swiss Target Prediction和Uni Prot数据库筛选补肺颗粒的有效成分及作用靶点;利用Gene Card、OMIM数据库检索哮喘的疾病靶点,选取成分与疾病的交集靶点作为蛋白靶点库,采用STRING获取交集靶点蛋白相互作用的网络,通过Cytoscape软件筛选核心靶点基因;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)功能富集分析及京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析,微生信平台对结果进行可视化,并构建药物-成分-靶点网络图;利用Auto Dock Tools、Vina及Pymol对药物有效成分与核心靶点进行分子对接。利用CCK-8评价药物对细胞活性的影响,并将人类支气管平滑肌细胞分为空白组和给药组(100μg/ml),采用Western blot法、RT-q PCR、酶联免疫吸附试验法检测PDK1、Akt、PDE4D、c AMP表达水平。结果 补肺颗粒靶点897个,哮喘靶点1 321个,两者的交集靶点238个。GO富集分析得到生物过程729项、细胞组成76项、分子功能169项。KEGG通路主要包括PI3K-Akt信号通路、c AMP信号通路、MAPK信号通路等。关键靶点包括Akt1、TNF、PTGS2等,关键成分包括槲皮素、山柰酚、木犀草素等。分子对接显示,Akt1和PDE4D与槲皮素、山柰酚、木犀草素均具有较好的结合活性。细胞实验显示,补肺颗粒浓度为100μg/ml时,细胞存活率较0μg/ml时降低(P<0.01),给药组PDK1和PDE4D的m RNA表达量低于空白组,Akt的m RNA表达量高于空白组(P<0.05);给药组p-PDK1和p-PDE4D蛋白表达水平低于空白组,p-Akt的m RNA表达量高于空白组(P<0.05);给药组c AMP表达高于空白组(P<0.01)。结论 补肺颗粒可能通过槲皮素、山柰酚、木犀草素等成分,作用于Akt、PDE4D等靶点,调节PI3K-Akt、c AMP等信号通路,从而发挥治疗哮喘的作用。
关键词
PDK1/Akt/PDE4D信号通路
补肺颗粒
支气管哮喘
网络药理学
分子对接
实验验证
Keywords
PDK1/Akt/PDE4D signaling pathway
Bufei Granules
Bronchial asthma
Network pharmacology
Molecular docking
Experimental verification
分类号
R285.5 [医药卫生]
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作者
出处
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1
基于网络药理学及体外实验探讨补肺颗粒治疗支气管哮喘的分子机制
张莎苒
周玲羚
李一帆
李晓丹
徐元雯
王虹景
王禹霏
刘伟
《中国医药导报》
2025
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