南京地区203例性传播疾病流行病学分析 被引量：7

1

作者 张耀娟 章子豪 +5 位作者 吴宜琴 倪忠耘 叶炳辉 羊海涛 贾成梅 陶炳根 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第1期60-62,共3页

目的　调查南京地区性病流行情况。方法　淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、尖锐湿疣、生殖器疱疹、梅毒 6种主要性病用 PCR方法 ,梅毒结合快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)法 ,滴虫、霉菌染色后油镜观察 ,阴虱用低倍镜观察 ,艾滋病用 ... 目的　调查南京地区性病流行情况。方法　淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、尖锐湿疣、生殖器疱疹、梅毒 6种主要性病用 PCR方法 ,梅毒结合快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)法 ,滴虫、霉菌染色后油镜观察 ,阴虱用低倍镜观察 ,艾滋病用 EL ISA法检测抗体。结果　 2 0 3例患者中单纯感染 1种性病的 87例 ,占 42 .9% ,合并 2种和 3种感染的各为 95例(46 .8% )和 2 1例 (10 .3% )。性病主要发生在 2 0～ 39岁年龄段 ,为 181例 (89.2 % )。中学文化层次的人发病率高 ,为 137例(6 7.5 % )。职业以个体户及营销人员为高 ,共 133例 (6 5 .5 % )。结论　南京地区性病患者感染性病病原体以 1种和 2种最为常见。性病感染与年龄、所受教育程度和职业有关 :以 2 0～ 39岁、受教育水平低和私营工商业者人群发病率较高。 展开更多

关键词 发病率 流行病 性病 病例分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

履带推土机推土转向工况负重轮仿真研究 被引量：3

2

作者 张耀娟 成凯 左鹏 《机械设计与制造》 北大核心 2016年第2期181-184,共4页

为了提高履带推土机负重轮的使用寿命,采用多体动力学仿真软件RecurDyn,针对履带推土机推土转向作业工况进行运动学与动力学仿真分析,研究履带推土机行走系统在推土转向作业工况负重轮的受力状况,得出制动侧与驱动侧行走系统中各负重轮... 为了提高履带推土机负重轮的使用寿命,采用多体动力学仿真软件RecurDyn,针对履带推土机推土转向作业工况进行运动学与动力学仿真分析,研究履带推土机行走系统在推土转向作业工况负重轮的受力状况,得出制动侧与驱动侧行走系统中各负重轮所受载荷分布规律,转向中心的位置以及在此工况下容易发生啃轨、漏油的负重轮位置,主要采用对调负重轮位置的方法解决。所采用的虚拟样机技术,可作为履带式工程机械仿真研究的方法,仿真结果可作为履带推土机设计与优化的参考依据。 展开更多

关键词 履带推土机 推土转向 负重轮 受力状况 RECURDYN 仿真

在线阅读 下载PDF 职称材料

异盘并殖吸虫某些生物学特性的研究 被引量：3

3

作者 张耀娟 章子豪 沈一平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第1期40-41,共2页

异盘并殖吸虫某些生物学特性的研究张耀娟，章子豪，沈一平ＷｉｌｌｙＦ．Ｐｉｅｓｓｅｎｓ２我国报告的并殖吸虫近３０种之多，其中对人体危害的虫主要有卫氏并殖吸虫、斯氏狸殖吸虫和异盘并殖吸虫（Ｐａｒｇｏｎｉｍｕｓｈｅｔｅｒｏ... 异盘并殖吸虫某些生物学特性的研究张耀娟，章子豪，沈一平ＷｉｌｌｙＦ．Ｐｉｅｓｓｅｎｓ２我国报告的并殖吸虫近３０种之多，其中对人体危害的虫主要有卫氏并殖吸虫、斯氏狸殖吸虫和异盘并殖吸虫（ＰａｒｇｏｎｉｍｕｓｈｅｔｅｒｏｔｒｅｍｕｓＣｈｅｎ＆Ｈｓｉａ，１... 展开更多

关键词 并殖吸虫 异盘并殖吸虫 生物学特征

在线阅读 下载PDF 职称材料

五轴联动数控工具磨床加工精度影响因素仿真分析 被引量：3

4

作者 张耀娟 杨克 刘维维 《机床与液压》 北大核心 2017年第11期152-155,共4页

自主研发的五轴联动数控工具磨床能够实现对球头立铣刀等多种硬度高、刃形复杂刀具的磨削加工,且一次装夹完成所有的精加工。利用多体动力学理论分别建立磨床的多刚体动力学模型和刚柔耦合动力学模型。利用所建立的动力学模型,分析在其... 自主研发的五轴联动数控工具磨床能够实现对球头立铣刀等多种硬度高、刃形复杂刀具的磨削加工,且一次装夹完成所有的精加工。利用多体动力学理论分别建立磨床的多刚体动力学模型和刚柔耦合动力学模型。利用所建立的动力学模型,分析在其它因素相同,X、Y、Z三轴在不同进给加速度、动静质量比、主轴结合部不同相对刚度下的加工误差。得到了3种影响因素对磨床加工精度的影响,研究结果对磨床的设计与结构优化具有一定的参考意义。 展开更多

关键词 五轴数控工具磨床 刚柔耦合动力学模型 进给加速度 动静质量比 刚度 加工精度

在线阅读 下载PDF 职称材料

五轴联动数控磨床直线进给机构静力学分析 被引量：3

5

作者 张耀娟 杨克 郭兴杰 《机床与液压》 北大核心 2017年第1期142-145,共4页

针对普通工具磨床和传统生产工艺方法很难加工出特型刀具的品种和刃形的问题,研发了一种五轴联动数控工具磨床,其中五轴联动数控工具磨床直线进给机构的受力和位移情况将直接影响磨床的工作性能。利用Solid Works中的simulation模块对... 针对普通工具磨床和传统生产工艺方法很难加工出特型刀具的品种和刃形的问题,研发了一种五轴联动数控工具磨床,其中五轴联动数控工具磨床直线进给机构的受力和位移情况将直接影响磨床的工作性能。利用Solid Works中的simulation模块对五轴联动数控磨床的直线进给机构进行静力学分析,研究直线进给机构各处的位移和应力情况。结果表明:X轴工作台的最大应力为2 MPa,出现在X轴工作台的滑块和立柱的下部,X轴工作台的最大位移为0.000 015 88 mm,出现在立柱的中部;Y轴工作台的最大应力为2 MPa,出现在Y轴工作台中部,Y轴工作台的最大位移为0.000 003 584mm,出现在Y轴工作台的中部;Z轴工作台应力的最大值为10.3 MPa,位于Z轴工作台右侧,Z轴工作台位移最大值为0.000 030 88 mm,出现在Z轴工作台中部。 展开更多

关键词 五轴联动数控工具磨床 直线进给机构 静力学分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于ADAMS的五轴数控工具磨床磨削力仿真分析 被引量：2

6

作者 张耀娟 杨克 刘维维 《机床与液压》 北大核心 2017年第7期131-134,共4页

利用计算机三维建模与虚拟样机仿真技术建立自主研发的五轴数控工具磨床虚拟样机模型,对五轴数控工具磨床加工过程中砂轮磨削力的受力大小和变化趋势进行仿真,利用磨削力的理论计算公式验证了所建立的虚拟样机模型的有效性。研究了砂轮... 利用计算机三维建模与虚拟样机仿真技术建立自主研发的五轴数控工具磨床虚拟样机模型,对五轴数控工具磨床加工过程中砂轮磨削力的受力大小和变化趋势进行仿真,利用磨削力的理论计算公式验证了所建立的虚拟样机模型的有效性。研究了砂轮线速度、磨削深度、进给量对磨削力的影响,为五轴数控工具磨床的设计提供参考。 展开更多

关键词 五轴数控工具磨床 磨削力 虚拟样机模型 影响因素

在线阅读 下载PDF 职称材料

五轴联动数控磨床旋转进给机构静力学分析 被引量：2

7

作者 张耀娟 杨克 王江 《机床与液压》 北大核心 2016年第19期138-141,共4页

随着现代制造技术的发展,对特型刀具的品种和刃形的要求越来越高,而普通工具磨床和传统生产工艺方法很难加工这些刃形复杂的刀具。针对这一现状自主开发一种五轴联动数控工具磨床,其中五轴联动数控工具磨床旋转进给机构的受力和位移情... 随着现代制造技术的发展,对特型刀具的品种和刃形的要求越来越高,而普通工具磨床和传统生产工艺方法很难加工这些刃形复杂的刀具。针对这一现状自主开发一种五轴联动数控工具磨床,其中五轴联动数控工具磨床旋转进给机构的受力和位移情况将直接影响磨床的工作性能。利用SolidWorks中的Simulation模块对五轴联动数控磨床的旋转进给机构进行静力学分析,研究旋转进给机构各处的位移和应力情况。分析结果表明:B轴旋转工作台和C轴旋转工作台最大应力均小于材料的屈服应力,说明B轴和C轴工作台结构是安全可靠的。 展开更多

关键词 五轴联动数控工具磨床 旋转进给机构 静力学分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

自动式圆形弯管内表面精密抛光装置设计 被引量：1

8

作者 张耀娟 罗剑伟 +2 位作者 王金昭 刘薇娜 杨立峰 《机床与液压》 北大核心 2016年第17期84-86,104,共4页

为了解决弯管内表面精密抛光困难的问题,设计了一种弯管内表面自动抛光装置。该抛光装置总体结构由抛光头、绕线机构、传动机构、夹紧机构以及连接机构等部分组成。整个装置与圆截面弯管零件连成一容腔,可向零件内腔充入用于对零件内表... 为了解决弯管内表面精密抛光困难的问题,设计了一种弯管内表面自动抛光装置。该抛光装置总体结构由抛光头、绕线机构、传动机构、夹紧机构以及连接机构等部分组成。整个装置与圆截面弯管零件连成一容腔,可向零件内腔充入用于对零件内表面进行抛光加工的抛光液,控制器控制步进电机带动两端的绕线装置工作,从而实现对弯管内表面的精密抛光加工。利用软件Fluent进行流体仿真,仿真结果表明:流体出口的流速很高,使旋转喷射抛光作用发挥得较好,能够很好地对圆形截面弯管内表面进行抛光加工。 展开更多

关键词 精密抛光装置 圆形弯管 内表面 自动式

在线阅读 下载PDF 职称材料

异盘并殖吸虫成虫的扫描电镜观察 被引量：2

9

作者 张耀娟 沈一平 《南京医学院学报》 CSCD 1989年第2期97-98,共2页

本观察用广西西部镜头华石蟹中的异盘并殖吸虫囊蚴感染家犬150天后获成虫。扫描电镜观察异盘并殖吸虫表面结构,发现口吸盘明显大于腹吸盘,生殖孔有4～7瓣,似花朵状,排泄孔椭圆形。全身皮棘除口吸盘上为单生棘及腹吸盘上无棘外,其他部位... 本观察用广西西部镜头华石蟹中的异盘并殖吸虫囊蚴感染家犬150天后获成虫。扫描电镜观察异盘并殖吸虫表面结构,发现口吸盘明显大于腹吸盘,生殖孔有4～7瓣,似花朵状,排泄孔椭圆形。全身皮棘除口吸盘上为单生棘及腹吸盘上无棘外,其他部位均为由6～8个尖刀形棘紧密排列而成簇生棘。 展开更多

关键词 并殖吸虫 皮棘 扫描电镜

在线阅读 下载PDF 职称材料

以创新能力培养为目标的设计图学课程改革的研究与实践 被引量：26

10

作者 李冬梅 张持重 +1 位作者 张耀娟 张云峰 《工程图学学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期161-164,共4页

设计图学是工业设计专业一门重要的技术基础课,该文结合设计图学课程的教学改革,提出了"以设计表达为主线,培养创新能力为最终目标"的设计图学课程的改革思路,探索了新的课程体系、教学模式及考核方式,为学生创新能力的提高,... 设计图学是工业设计专业一门重要的技术基础课,该文结合设计图学课程的教学改革,提出了"以设计表达为主线,培养创新能力为最终目标"的设计图学课程的改革思路,探索了新的课程体系、教学模式及考核方式,为学生创新能力的提高,新世纪创新型设计人才的培养提供了有效的途径。 展开更多

关键词 工业设计 创新能力培养 教学改革 创新型设计人才

在线阅读 下载PDF 职称材料

卫氏肺吸虫重组抗原的制备及初步应用研究 被引量：8

11

作者 侯敏 刘剑南 +3 位作者 姚永伟 褚宏亮 张耀娟 章子豪 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期467-469,514,共4页

目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液... 目的纯化重组细菌Pw鄄1/pRSETB/BL21的表达产物肺吸虫重组抗原,复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清,评价其敏感性、特异性和应用前景。方法通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化,进一步做快速液相层析纯化,比较前后两法的纯化效果。初步纯化产物经氧化/还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原)。用该重组抗原,以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体,并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较。结果经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高,快速液相层析进一步纯化效果不明显。以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清,敏感性为91.07%,与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应;粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100%,但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为血吸虫病11.43%,肝吸虫病4.84%,囊虫病3.22%,包虫病5.88%,正常人为2.5%。结论研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高。 展开更多

关键词 卫氏肺吸虫 重组抗原 纯化 ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

卫氏肺吸虫成虫cDNA文库的多抗筛选 被引量：7

12

作者 凌家俭 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期473-475,F002,共4页

目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选... 目的 :从卫氏肺吸虫成虫 c DNA文库中筛选并鉴定可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法 :采用预吸收成虫抗原免疫兔血清 ( IRS,多抗 )筛选阳性克隆 ,经 PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。选取插入片段不同的两个克隆测定其 DNA序列 ,用 BL AST软件对所得 DNA序列进行同源性比较。结果 :得到 P.w- 2 ,P.w- 4两个阳性克隆 ,长度分别为 80 1bp和 10 5 3 bp,分别与卫氏肺吸虫原组织蛋白酶 L和卫氏肺吸虫半胱氨酸蛋白酶基因同源 ,同源程度分别为 99%、86%。结论 :用卫氏肺吸虫成虫多抗筛选成虫 c DNA文库 ,所获 P.w- 2和 P.w- 展开更多

关键词 卫氏肺吸虫 CDNA文库 免疫学筛选 并殖吸虫 肺吸虫病 诊断 预防

在线阅读 下载PDF 职称材料

bFGF、IGF-Ⅰ对兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响 被引量：5

13

作者 苏新 戴心怡 +1 位作者 张耀娟 章宏伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期326-328,342,共4页

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(insuline-likegrowthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)单独及联合应用对体外培养多次传代的兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响,探讨传代多次的软骨细胞作为... 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(insuline-likegrowthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)单独及联合应用对体外培养多次传代的兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响,探讨传代多次的软骨细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。方法:第3、5、7代体外培养的兔关节软骨细胞,以常规培养组作为对照组,bFGF(5ng/ml)或和IGF-Ⅰ(100ng/ml)单独刺激及联合刺激作为实验组,免疫组化法测定Ⅱ型胶原的定性表达,并通过图像分析作半定量分析。结果:对照组细胞第5代以后无阳性表达。第3、5、7代细胞在bFGF或IGF-Ⅰ刺激下,Ⅱ型胶原表达强度显著高于对照组(P<0.01);bFGF和IGF-Ⅰ联合作用下,Ⅱ型胶原表达强度均显著高于单独以bFGF或IGF-Ⅰ刺激组(P<0.05)。结论:bFGF、IGF-Ⅰ能促进多次传代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达,且联合应用时促进作用更为明显。多次传代软骨细胞在生长因子刺激下,仍有再分化的能力,而有成为软骨组织工程种子细胞的可能。 展开更多

关键词 软骨细胞 组织工程 碱性成纤维细胞生长因子 胰岛素样生长因子-Ⅰ Ⅱ型胶原

在线阅读 下载PDF 职称材料

卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究 被引量：3

14

作者 凌家俭 侯敏 +2 位作者 刘剑南 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期357-359,共3页

目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-P... 目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Westernblotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中。其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫兔血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。 展开更多

关键词 卫氏并殖吸虫 重组抗原 亚克隆 CDNA文库

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用尿素溶性抗原制备抗猪囊虫单抗的研究 被引量：3

15

作者 殷竹君 刘静 +3 位作者 张耀娟 章子豪 史志明 侯敏 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第4期255-257,共3页

目的　为提高抗猪囊虫单抗的特异性。方法　使用猪囊虫尿素溶性抗原 ( Ag- u)并用水溶性抗原 ( Ag- w)作对照分别免疫 BABL / c小鼠 ,取其脾细胞分别与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,EL ISA法进行筛选。同时筛选出的阳性克隆扩大培养 ,取上... 目的　为提高抗猪囊虫单抗的特异性。方法　使用猪囊虫尿素溶性抗原 ( Ag- u)并用水溶性抗原 ( Ag- w)作对照分别免疫 BABL / c小鼠 ,取其脾细胞分别与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,EL ISA法进行筛选。同时筛选出的阳性克隆扩大培养 ,取上清单抗分别与包虫、血吸虫、肝吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定。结果　 Ag- u和 Ag- w的阳性克隆率分别为 13.5 % ( 13/ 96 )和 12 .5 % ( 12 / 96 ) ,特异性阳性克隆率分别为 30 .8% ( 4/ 13)和 8.3% ( 1/ 12 )。 SDS- PAGE分析 Ag- u和Ag- w的条带数分别为 9和 17,分子质量 >97.4ku的条带比率分别为 6 6 .7% ( 6 / 9)和 2 9.4% ( 5 / 17)。免疫组化显示来自 Ag-u的 2株单抗定位于囊虫的头节 ,而来自 Ag- w的 1株单抗定位于囊虫的囊壁。结论　 Ag- u用于制备单抗的阳性克隆得率与Ag- w没有明显的差异 ,而特异性阳性克隆的得率是 Ag- w的 4倍 ,亦即 Ag- u不仅有良好的免疫原性 。 展开更多

关键词 猪囊虫 尿素溶性抗原 水溶性抗原 单克抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库的单抗筛选 被引量：5

16

作者 凌家俭 章子豪 张耀娟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期48-50,53,共4页

目的　从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法　采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素... 目的　从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法　采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。其中 3个克隆测定其DNA序列 ,用BLAST软件对所得DNA序列进行同源性比较。结果　得到 1,2 ,4三个不同阳性克隆 ,其长度分别为 1783bp、397bp和 1132bp ,分别与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白 (P wyolkferritin)基因、鞘脂激活蛋白A(DictyosterliumdiscoideumsaposinA)基因和曼氏血吸虫主要卵抗原 (Smmajoreggantigen -P4 0 )基因同源。 结论　本研究首次报道用抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库 ,所获克隆1、2。 展开更多

关键词 卫氏肺吸虫 CDNA文库 免疫学筛选 单克隆抗体 卫氏并殖吸虫病

在线阅读 下载PDF 职称材料

刚地弓形虫P30两个不同片段的克隆、表达及鉴定 被引量：2

17

作者 褚宏亮 姚永伟 +5 位作者 芦王英 刘剑南 陈玲 侯敏 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期275-279,共5页

目的:构建刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因的2个不同片段的克隆并进行表达、鉴定。方法:根据已发表的弓形虫P30基因序列,参考有关文献设计合成两对引物,用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段,分别构建T-... 目的:构建刚地弓形虫(简称弓形虫)主要表面抗原P30基因的2个不同片段的克隆并进行表达、鉴定。方法:根据已发表的弓形虫P30基因序列,参考有关文献设计合成两对引物,用PCR从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出P30基因的两个不同片段,分别构建T-A克隆,经PCR扩增及酶切鉴定后,进行测序,再亚克隆入pMAL-p2质粒并转化DH5α感受态细胞,于氨苄青霉素LB平板上初步筛选阳性克隆,再经酶切及PCR扩增鉴定重组子。将重组子转入表达菌BL21,用IPTG进行诱导表达,并对所表达的蛋白以western blot鉴定。结果:成功构建相应的T-A克隆及pMAL-p2亚克隆,经诱导、表达和鉴定,证实2个表达产物均为目的蛋白,其分子量分别为70和73Ku。结论:成功获得弓形虫主要表面抗原P30的2个表达产物,为其进一步的纯化及应用奠定了基础。 展开更多

关键词 刚地弓形虫 P30 克隆 表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

弓形虫病基因诊断的动物实验研究 被引量：2

18

作者 陈玲 侯敏 +4 位作者 褚宏亮 姚永伟 刘剑南 章子豪 张耀娟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期437-439,共3页

目的:建立敏感、特异、稳定的PCR法,用于弓形虫病诊断。方法:选择与合成引物并确立最佳扩增条件,用PCR法检测实验感染鼠血液中弓形虫DNA,并与ELISA法检测循环抗原(CAg)作比较。结果:该PCR检测弓形虫DNA法特异性强,对其他7种寄生虫DNA均... 目的:建立敏感、特异、稳定的PCR法,用于弓形虫病诊断。方法:选择与合成引物并确立最佳扩增条件,用PCR法检测实验感染鼠血液中弓形虫DNA,并与ELISA法检测循环抗原(CAg)作比较。结果:该PCR检测弓形虫DNA法特异性强,对其他7种寄生虫DNA均不扩增;敏感性高,可检测到0.2pg DNA;检测急性感染弓形虫小鼠血液最早于感染后第2天出现阳性,与ELISA法查CAg比较,PCR检测弓形虫DNA法阳性出现时间早、检出率高。结论:该PCR法可应用于弓形虫感染的早期诊断。 展开更多

关键词 弓形虫病 聚合酶链反应 循环抗原 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

用混合单抗双抗体夹心-ELISA法诊断罕见混合型肺吸虫病一例 被引量：2

19

作者 刘云霞 宋晓福 +3 位作者 张雯 侯敏 张耀娟 章子豪 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1996年第3期318-318,共1页

本院最近收治1例拟诊为"肝脓疡"、"胸腹型结核"的危重患者,经检测肺吸虫循环抗原和抗体阳性,确诊为肺吸虫病,用吡喹酮治疗痊愈出院。本例肺吸虫病碍混合型,甚为罕见,报道如下。患者,男,19岁。因不规则发热。

关键词 吸虫病 肺吸虫病 循环抗原 抗体 吡喹酮

在线阅读 下载PDF 职称材料

金标免疫渗滤法检测卫氏并殖吸虫循环抗原的研究 被引量：2

20

作者 虞蔚岩 侯敏 +1 位作者 张耀娟 章子豪 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期483-485,共3页

目的:建立一种快速、简便、检测卫氏并殖吸虫病患者血清循环抗原(CAg)的新方法。方法:双抗体夹心金标免疫渗滤法(DAS-DIGFA)以抗卫氏并殖吸虫成虫多克隆抗体为包被抗体,加待检血清后再加免疫金标记的抗卫氏并殖吸虫成虫单克隆抗体,阳性... 目的:建立一种快速、简便、检测卫氏并殖吸虫病患者血清循环抗原(CAg)的新方法。方法:双抗体夹心金标免疫渗滤法(DAS-DIGFA)以抗卫氏并殖吸虫成虫多克隆抗体为包被抗体,加待检血清后再加免疫金标记的抗卫氏并殖吸虫成虫单克隆抗体,阳性者出现红色斑点。结果:用DAS-DIGFA检测59例卫氏并殖吸虫病患者血清,其阳性率为96.6%(57/59);检测正常人血清20例、肺结核病患者血清20例、丝虫病患者血清27例、囊虫病患者血清20例和血吸虫病患者血清26例,除1例血吸虫病患者血清阳性外,余均为阴性,特异性为99.1%(112/113)。结论:DAS-DIGFA是一种快速、简便、敏感和特异的检测卫氏并殖吸虫病患者血清中循环抗原的新方法。 展开更多

关键词 金标免疫渗滤法 检测 卫氏并殖吸虫 循环抗原 研究

在线阅读 下载PDF 职称材料