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一种高通量筛选PAC_1受体激动剂的细胞模型的建立
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作者 张素行 蔡绍皙 许治良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期1644-1647,共4页
目的建立垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpeptideⅠreceptor,PAC1-R)激动剂的高通量筛选模型,筛选PAC1-R受体的激动剂,开发用于治疗神经系统疾病和能量代谢疾病的药物。方法将人的PAC1-RcDNA克隆... 目的建立垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpeptideⅠreceptor,PAC1-R)激动剂的高通量筛选模型,筛选PAC1-R受体的激动剂,开发用于治疗神经系统疾病和能量代谢疾病的药物。方法将人的PAC1-RcDNA克隆到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1构成质粒hPAC1R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(SRE/3×MRE/CRE/VIP/Luci)共转染到CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定细胞株,利用PAC1-R内源激动剂PACAP-27探索和优化了筛选条件。结果建立了稳定表达hPAC1-R的筛选细胞株和可靠的筛选方法,Z’因子大于0.7。结论该系统成功适合于PAC1-R激动剂的高通量筛选。 展开更多
关键词 PAC1-R 报告基因 激动剂 高通量药物筛选
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LC-MS/MS法同时测定比格犬血浆中氯维地平及其主要代谢物的浓度
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作者 陈涛 张素行 +4 位作者 叶沛珍 张飞鹏 林丽珊 张科之 王来友 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第3期306-312,共7页
目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定比格犬血浆中的氯维地平及其主要代谢产物去乙基非洛地平(H152/81)的方法,并将其应用于氯维地平脂肪乳注射液在比格犬的生物等效性研究中。方法:本实验采用尼莫地平作为内标,血浆... 目的:建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定比格犬血浆中的氯维地平及其主要代谢产物去乙基非洛地平(H152/81)的方法,并将其应用于氯维地平脂肪乳注射液在比格犬的生物等效性研究中。方法:本实验采用尼莫地平作为内标,血浆样品采用蛋白沉淀处理,分析柱为Synergi Polar-RP C18色谱柱(80,4μm,50 mm×2.0 mm),流动相为0.1%甲酸乙腈和10 mmol/L醋酸铵水溶液,采用梯度洗脱,使用电喷雾电离源(ESI),采用MRM扫描方式进行分析。结果:氯维地平在1~200 ng/m L、去乙基非洛地平在5~1 000 ng/m L范围内线性良好(r〉0.995)。待测物的日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的相关要求。血浆样品经历3次冷冻-解冻循环和-80℃放置27 d都是稳定的。结论:本方法适合用于氯维地平脂肪乳注射液的生物等效性研究。 展开更多
关键词 氯维地平 去乙基非洛地平 LC-MS/MS 生物等效性
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