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基于微纳米技术的免疫检测新方法
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作者 吴玉娟 李姝亭 +3 位作者 翟荣云 张玮莹 郭向东 贲亚琍 《兰州大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期231-237,245,共8页
通过构建一种基于微纳米技术的免疫检测新方法,对结直肠癌患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)的PIK3CA基因E542k甲基化的表达量进行高灵敏度、高特异性检测.制备线性阵列结构的微芯片,在其表面孵育功能化的肽核酸金纳米探针(PNA-AuNPs)复... 通过构建一种基于微纳米技术的免疫检测新方法,对结直肠癌患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)的PIK3CA基因E542k甲基化的表达量进行高灵敏度、高特异性检测.制备线性阵列结构的微芯片,在其表面孵育功能化的肽核酸金纳米探针(PNA-AuNPs)复合物、ctDNA及5'-甲基胞嘧啶单克隆抗体-羧基化多壁碳纳米管复合物制备出ctDNA纳米生物传感器,采用电化学工作站检测并通过回收实验验证其对临床血浆中ctDNA浓度检测的可行性.结果表明,该生物传感器能够特异性检测PIK3CA基因E542k甲基化水平,检测范围为50~10~4 fmol/L,最低检测限为10 fmol/L,回收率为89.11%~102.64%;分别对正常人与结直肠癌患者血浆构建的传感器进行电化学检测,发现电流峰值具有显著性差异(P<0.01),通过线性方程可以计算出患者血浆中的PIK3CA基因E542k甲基化水平;采用共聚焦显微镜验证,发现正常人与结直肠癌患者构建的传感器中ctDNA荧光染色表达量具有明显不同,证明其可以用于临床血样检测ctDNA浓度. 展开更多
关键词 生物传感器 羧基化多壁碳纳米管 循环肿瘤DNA 结直肠癌 液态活检
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凋亡体与细胞凋亡 被引量:2
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作者 张玮莹 彭建新 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期75-78,共4页
由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apopt... 由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apoptosome),在哺乳动物线粒体凋亡途径和胚胎发育中至关重要。描述了凋亡体上各因子的结构、功能及其相互关系,线粒体介导的凋亡通路中凋亡体的形成及其调控。 展开更多
关键词 细胞凋亡 凋亡体 凋亡酶激活因子-1 细胞色素C CASPASE-9
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黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达 被引量:2
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作者 李娜 袁利玲 +5 位作者 张玮莹 李书祥 袁永泽 杨江科 闫云君 刘德立 《化学与生物工程》 CAS 2010年第6期45-49,共5页
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设... 黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。 展开更多
关键词 黑曲霉 脂肪酶 全基因合成 毕赤酵母 表达
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《邪不压正》电影与文本的“侠”与“隐” 被引量:1
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作者 张玮莹 《电影文学》 北大核心 2018年第21期154-155,共2页
姜文执导的电影《邪不压正》改编自张北海的小说《侠隐》,电影与原著文本殊为不同,迥异其趣。《侠隐》之"侠"有着老派武侠的味道,"侠"之江湖游离于俗世之外,自成一体,而《邪不压正》由于叙事语言复杂晦涩,叙事主题... 姜文执导的电影《邪不压正》改编自张北海的小说《侠隐》,电影与原著文本殊为不同,迥异其趣。《侠隐》之"侠"有着老派武侠的味道,"侠"之江湖游离于俗世之外,自成一体,而《邪不压正》由于叙事语言复杂晦涩,叙事主题模糊不清,导致"侠"的意味淡化,几近于无。对于"侠"的舍弃与背离,使《邪不压正》偏离了传统文化中的侠义精神,十分令人遗憾。文章拟从"侠"与"隐"的角度,探讨电影《邪不压正》与小说《侠隐》不同的文化内涵。 展开更多
关键词 《邪不压正》 《侠隐》 江湖
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《妈妈咪呀2》:美国亲情片的审美心理
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作者 张玮莹 《电影文学》 北大核心 2018年第24期73-74,共2页
亲情片是美国电影中长期受到广泛欢迎,并且在世界上也具有一定影响力的亚类型片之一,如巴瑞·莱文森的《雨人》、菲利达·劳埃德的《妈妈咪呀》都是具有研究价值的经典之作。在这些亲情片中,电影人与受众共有的审美心理也得以... 亲情片是美国电影中长期受到广泛欢迎,并且在世界上也具有一定影响力的亚类型片之一,如巴瑞·莱文森的《雨人》、菲利达·劳埃德的《妈妈咪呀》都是具有研究价值的经典之作。在这些亲情片中,电影人与受众共有的审美心理也得以体现出来。欧·帕克执导的《妈妈咪呀2》在剧情上完成了对前作的扩充,也深化了前作的亲情主题。影片之所以得到人们的交口赞誉,很大程度上就在于它符合了观众追求非理性、娱乐性和日常性的审美心理。 展开更多
关键词 《妈妈咪呀2》 美国亲情电影 审美心理
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