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基于微纳米技术的免疫检测新方法
1
作者
吴玉娟
李姝亭
+3 位作者
翟荣云
张玮莹
郭向东
贲亚琍
《兰州大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第2期231-237,245,共8页
通过构建一种基于微纳米技术的免疫检测新方法,对结直肠癌患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)的PIK3CA基因E542k甲基化的表达量进行高灵敏度、高特异性检测.制备线性阵列结构的微芯片,在其表面孵育功能化的肽核酸金纳米探针(PNA-AuNPs)复...
通过构建一种基于微纳米技术的免疫检测新方法,对结直肠癌患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)的PIK3CA基因E542k甲基化的表达量进行高灵敏度、高特异性检测.制备线性阵列结构的微芯片,在其表面孵育功能化的肽核酸金纳米探针(PNA-AuNPs)复合物、ctDNA及5'-甲基胞嘧啶单克隆抗体-羧基化多壁碳纳米管复合物制备出ctDNA纳米生物传感器,采用电化学工作站检测并通过回收实验验证其对临床血浆中ctDNA浓度检测的可行性.结果表明,该生物传感器能够特异性检测PIK3CA基因E542k甲基化水平,检测范围为50~10~4 fmol/L,最低检测限为10 fmol/L,回收率为89.11%~102.64%;分别对正常人与结直肠癌患者血浆构建的传感器进行电化学检测,发现电流峰值具有显著性差异(P<0.01),通过线性方程可以计算出患者血浆中的PIK3CA基因E542k甲基化水平;采用共聚焦显微镜验证,发现正常人与结直肠癌患者构建的传感器中ctDNA荧光染色表达量具有明显不同,证明其可以用于临床血样检测ctDNA浓度.
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关键词
生物传感器
羧基化多壁碳纳米管
循环肿瘤DNA
结直肠癌
液态活检
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职称材料
凋亡体与细胞凋亡
被引量:
2
2
作者
张玮莹
彭建新
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第3期75-78,共4页
由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apopt...
由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apoptosome),在哺乳动物线粒体凋亡途径和胚胎发育中至关重要。描述了凋亡体上各因子的结构、功能及其相互关系,线粒体介导的凋亡通路中凋亡体的形成及其调控。
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关键词
细胞凋亡
凋亡体
凋亡酶激活因子-1
细胞色素C
CASPASE-9
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职称材料
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
被引量:
2
3
作者
李娜
袁利玲
+5 位作者
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期45-49,共5页
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设...
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。
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关键词
黑曲霉
脂肪酶
全基因合成
毕赤酵母
表达
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职称材料
《邪不压正》电影与文本的“侠”与“隐”
被引量:
1
4
作者
张玮莹
《电影文学》
北大核心
2018年第21期154-155,共2页
姜文执导的电影《邪不压正》改编自张北海的小说《侠隐》,电影与原著文本殊为不同,迥异其趣。《侠隐》之"侠"有着老派武侠的味道,"侠"之江湖游离于俗世之外,自成一体,而《邪不压正》由于叙事语言复杂晦涩,叙事主题...
姜文执导的电影《邪不压正》改编自张北海的小说《侠隐》,电影与原著文本殊为不同,迥异其趣。《侠隐》之"侠"有着老派武侠的味道,"侠"之江湖游离于俗世之外,自成一体,而《邪不压正》由于叙事语言复杂晦涩,叙事主题模糊不清,导致"侠"的意味淡化,几近于无。对于"侠"的舍弃与背离,使《邪不压正》偏离了传统文化中的侠义精神,十分令人遗憾。文章拟从"侠"与"隐"的角度,探讨电影《邪不压正》与小说《侠隐》不同的文化内涵。
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关键词
《邪不压正》
《侠隐》
侠
江湖
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职称材料
《妈妈咪呀2》:美国亲情片的审美心理
5
作者
张玮莹
《电影文学》
北大核心
2018年第24期73-74,共2页
亲情片是美国电影中长期受到广泛欢迎,并且在世界上也具有一定影响力的亚类型片之一,如巴瑞·莱文森的《雨人》、菲利达·劳埃德的《妈妈咪呀》都是具有研究价值的经典之作。在这些亲情片中,电影人与受众共有的审美心理也得以...
亲情片是美国电影中长期受到广泛欢迎,并且在世界上也具有一定影响力的亚类型片之一,如巴瑞·莱文森的《雨人》、菲利达·劳埃德的《妈妈咪呀》都是具有研究价值的经典之作。在这些亲情片中,电影人与受众共有的审美心理也得以体现出来。欧·帕克执导的《妈妈咪呀2》在剧情上完成了对前作的扩充,也深化了前作的亲情主题。影片之所以得到人们的交口赞誉,很大程度上就在于它符合了观众追求非理性、娱乐性和日常性的审美心理。
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关键词
《妈妈咪呀2》
美国亲情电影
审美心理
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职称材料
题名
基于微纳米技术的免疫检测新方法
1
作者
吴玉娟
李姝亭
翟荣云
张玮莹
郭向东
贲亚琍
机构
江汉大学医学部
江汉大学生命科学学院
出处
《兰州大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025年第2期231-237,245,共8页
基金
国家自然科学基金项目(11804121)
中央引领地方科技发展专项资金项目(2016ZYYD049)。
文摘
通过构建一种基于微纳米技术的免疫检测新方法,对结直肠癌患者外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA)的PIK3CA基因E542k甲基化的表达量进行高灵敏度、高特异性检测.制备线性阵列结构的微芯片,在其表面孵育功能化的肽核酸金纳米探针(PNA-AuNPs)复合物、ctDNA及5'-甲基胞嘧啶单克隆抗体-羧基化多壁碳纳米管复合物制备出ctDNA纳米生物传感器,采用电化学工作站检测并通过回收实验验证其对临床血浆中ctDNA浓度检测的可行性.结果表明,该生物传感器能够特异性检测PIK3CA基因E542k甲基化水平,检测范围为50~10~4 fmol/L,最低检测限为10 fmol/L,回收率为89.11%~102.64%;分别对正常人与结直肠癌患者血浆构建的传感器进行电化学检测,发现电流峰值具有显著性差异(P<0.01),通过线性方程可以计算出患者血浆中的PIK3CA基因E542k甲基化水平;采用共聚焦显微镜验证,发现正常人与结直肠癌患者构建的传感器中ctDNA荧光染色表达量具有明显不同,证明其可以用于临床血样检测ctDNA浓度.
关键词
生物传感器
羧基化多壁碳纳米管
循环肿瘤DNA
结直肠癌
液态活检
Keywords
biosensor
multi-walled carbon nanotubes-COOH
circulating tumor DNA
colorectal cancer
clinical biopsy
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
凋亡体与细胞凋亡
被引量:
2
2
作者
张玮莹
彭建新
机构
华中师范大学生命科学学院农药与化学生物学教育部重点实验室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010年第3期75-78,共4页
文摘
由细胞色素C(Cytochrome c,Cyt c)、ATP/dATP、凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)以及procaspase-9(caspase-9的前体)构成的约700 kDa、具有很强的caspase酶激活活性的大分子蛋白复合物——凋亡体(apoptosome),在哺乳动物线粒体凋亡途径和胚胎发育中至关重要。描述了凋亡体上各因子的结构、功能及其相互关系,线粒体介导的凋亡通路中凋亡体的形成及其调控。
关键词
细胞凋亡
凋亡体
凋亡酶激活因子-1
细胞色素C
CASPASE-9
Keywords
apoptosis
apoptosome
apaf-1
Cyt c
caspase-9
分类号
Q255 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
被引量:
2
3
作者
李娜
袁利玲
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
机构
华中师范大学生命科学学院遗传调控与整合生物学湖北省重点实验室
华中科技大学生命科学与技术学院
出处
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30771429)
科技部"863"资助项目(2007AA05Z417)
+2 种基金
教育部博士点基金资助项目(20060511002)
湖北省科技攻关项目(2007AA201C50
2007AA301C26)
文摘
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药、前体化合物的合成和手性化合物的拆分等方面有广泛的用途。获得高效表达黑曲霉脂肪酶的基因工程菌是该酶工业化生产的前提。根据黑曲霉脂肪酶LIP的氨基酸序列及毕赤酵母密码子的偏爱性,设计合成26条相互重叠20 bp的引物,通过组装PCR分别合成lip基因的4个片段lipA1(300bp)l、ipA2(237 bp)l、ipA3(234 bp)和lipA4(210 bp)。再以基因头lip1和基因尾lip26为引物,以lipA1l、ipA2l、ipA3和lipA4混合物为模板进行第二轮PCR扩增,得到的产物经加A处理后,连接到载体pMD18-T上,挑取重组子测序。通过PCR扩增对人工合成的基因进行校正,得到完全正确的lip基因。将优化后的基因克隆到表达载体pPIC9K上,获得的重组质粒pPIC9K-lip经线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,构建分泌型表达LIP的酵母工程菌,G418梯度筛选,得到高拷贝稳定整合菌株。为重组黑曲霉脂肪酶的规模化制备奠定了基础。
关键词
黑曲霉
脂肪酶
全基因合成
毕赤酵母
表达
Keywords
Aspergillus niger
lipase
total gene synthesis
Pichia pastoris
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
《邪不压正》电影与文本的“侠”与“隐”
被引量:
1
4
作者
张玮莹
机构
华东交通大学艺术学院
出处
《电影文学》
北大核心
2018年第21期154-155,共2页
基金
2017年江西省高校人文社科课题"艺术人类学视域下‘九江山歌三声腔’的传承与发展研究"(项目编号:YS160221)
江西省"十三五"社科规划项目"江西古代文人音乐及其传承研究"(项目编号:17YS13)
文摘
姜文执导的电影《邪不压正》改编自张北海的小说《侠隐》,电影与原著文本殊为不同,迥异其趣。《侠隐》之"侠"有着老派武侠的味道,"侠"之江湖游离于俗世之外,自成一体,而《邪不压正》由于叙事语言复杂晦涩,叙事主题模糊不清,导致"侠"的意味淡化,几近于无。对于"侠"的舍弃与背离,使《邪不压正》偏离了传统文化中的侠义精神,十分令人遗憾。文章拟从"侠"与"隐"的角度,探讨电影《邪不压正》与小说《侠隐》不同的文化内涵。
关键词
《邪不压正》
《侠隐》
侠
江湖
分类号
J905 [艺术—电影电视艺术]
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职称材料
题名
《妈妈咪呀2》:美国亲情片的审美心理
5
作者
张玮莹
机构
华东交通大学艺术学院
出处
《电影文学》
北大核心
2018年第24期73-74,共2页
基金
2017年江西省高校人文社科课题"艺术人类学视域下九江山歌‘三声腔’的传承与发展研究"(项目编号:YS160221)
江西省"十三五"社科规划项目"江西古代文人音乐及其传承研究"(项目编号:17YS13)
文摘
亲情片是美国电影中长期受到广泛欢迎,并且在世界上也具有一定影响力的亚类型片之一,如巴瑞·莱文森的《雨人》、菲利达·劳埃德的《妈妈咪呀》都是具有研究价值的经典之作。在这些亲情片中,电影人与受众共有的审美心理也得以体现出来。欧·帕克执导的《妈妈咪呀2》在剧情上完成了对前作的扩充,也深化了前作的亲情主题。影片之所以得到人们的交口赞誉,很大程度上就在于它符合了观众追求非理性、娱乐性和日常性的审美心理。
关键词
《妈妈咪呀2》
美国亲情电影
审美心理
分类号
J905 [艺术—电影电视艺术]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于微纳米技术的免疫检测新方法
吴玉娟
李姝亭
翟荣云
张玮莹
郭向东
贲亚琍
《兰州大学学报(自然科学版)》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
凋亡体与细胞凋亡
张玮莹
彭建新
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2010
2
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职称材料
3
黑曲霉脂肪酶全基因合成及其在毕赤酵母中的表达
李娜
袁利玲
张玮莹
李书祥
袁永泽
杨江科
闫云君
刘德立
《化学与生物工程》
CAS
2010
2
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职称材料
4
《邪不压正》电影与文本的“侠”与“隐”
张玮莹
《电影文学》
北大核心
2018
1
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职称材料
5
《妈妈咪呀2》:美国亲情片的审美心理
张玮莹
《电影文学》
北大核心
2018
0
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