猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

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作者 曾苗苗 杨小曼 +9 位作者 张鑫 刘大凯 时洪艳 张记宇 张燎原 陈建飞 冯廷帅 李修文 石达 冯力 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期319-326,共8页

为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用... 为建立一种猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)血清抗体的快速检测方法,本研究首先经PCR扩增SADS-CoV N基因,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-N。重组N蛋白诱导表达并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,采用纯化的重组N蛋白作为包被抗原,以兔抗猪HRP-IgG作为二抗,利用方阵滴定法优化各反应条件,建立了一种以SADS-CoV N蛋白为靶标的检测SADS-CoV血清抗体的间接ELISA方法,并对此方法的敏感性、特异性、重复性及临床应用价值进行鉴定。SDS-PAGE及Western blot结果显示,重组表达的N蛋白约为70 ku,且具有良好的反应原性。采用该方法检测SADS-CoV阳性血清抗体效价可达1∶3 200,并且与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪圆环病毒(PCV)阳性血清均无交叉反应,具有良好的敏感性和特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%,具有较好的重复性。利用该方法和间接免疫荧光方法(IFA)分别对50份猪临床血清样品进行检测,结果显示二者的总符合率为98%。综上,本研究建立了一种基于SADS-CoV N蛋白的间接ELISA抗体检测方法,可用于临床SADS-CoV血清抗体检测以及流行病学的监测,对防控SADS-CoV的流行具有重要意义。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV) N蛋白 原核表达 间接ELISA

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BIM技术在大型综合管网项目中的创新应用

2

作者 刘丹瑶 张燎原 +1 位作者 张学红 蔡全福 《中国建设信息化》 2025年第10期26-31,共6页

传统BIM技术已在民建、市政类管网项目中广泛应用,然而传统设计软件无法适用于冶金管网体量大、交互要求高等需求,结合冶金项目特点,针对管网各专业软件分别进行BIM技术开发及创新应用,探索适用于冶金管网类项目全流程的BIM技术方案。

关键词 综合管网 BIM 云上交互 定向开发 参数化

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高温产2,3-丁二醇甲基芽孢杆菌的筛选及其发酵优化

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作者 林燕环 陈飞雪 +3 位作者 魏宸鑫 李润志 张燎原 林辉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期98-106,共9页

2,3-丁二醇是一种典型的大宗化学品,广泛应用于化工、食品、医药、燃料等领域。生物法发酵制备2,3-丁二醇是当下的主要方法,然而,大多数报道的菌株为条件致病菌且发酵条件严格,限制了生物法制备2,3-丁二醇的发展。该研究以温泉底土壤为... 2,3-丁二醇是一种典型的大宗化学品,广泛应用于化工、食品、医药、燃料等领域。生物法发酵制备2,3-丁二醇是当下的主要方法,然而,大多数报道的菌株为条件致病菌且发酵条件严格,限制了生物法制备2,3-丁二醇的发展。该研究以温泉底土壤为试验材料,经过分离、筛选与鉴定获得了1株高温条件下产2,3-丁二醇的甲基芽孢杆菌。通过摇瓶实验优化发酵工艺,确定最适发酵条件与最优培养基组成,利用优化后的发酵工艺甲基芽孢杆菌发酵24 h产物产量达到32.57 g/L。进一步进行上罐试验,基于不同发酵罐转速条件下甲基芽孢杆菌的产量积累情况,理性设计两阶段发酵策略,并以最优策略分批补料发酵制备2,3-丁二醇,2,3-丁二醇的产量在甲基芽孢杆菌发酵45 h时达到73.19 g/L,转化率达到90.25%。 展开更多

关键词 2 3-丁二醇 甲基芽孢杆菌 高温发酵 发酵优化 分批补料发酵

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体积压裂页岩油储层渗流规律及产能模型 被引量：17

4

作者 高英 朱维耀 +3 位作者 岳明 李爱山 张燎原 宋洪庆 《东北石油大学学报》 CAS 北大核心 2015年第1期80-86,6,共7页

利用岩心实验,研究页岩油储层纳微米孔喉渗流规律.基于分形理论,采用双重分维(缝宽分维和迂曲分维),对体积压裂裂缝面密度、等效渗透率等参数进行表征.页岩油储层体积压裂开发过程中,流体的流动分为椭圆缝网内渗流区和主干缝内线性渗流... 利用岩心实验,研究页岩油储层纳微米孔喉渗流规律.基于分形理论,采用双重分维(缝宽分维和迂曲分维),对体积压裂裂缝面密度、等效渗透率等参数进行表征.页岩油储层体积压裂开发过程中,流体的流动分为椭圆缝网内渗流区和主干缝内线性渗流区2个区域,建立二区耦合稳态渗流数学模型,推导页岩油体积压裂改造储层直井产能方程,模拟计算压裂井产能及分析压裂裂缝参数对产能的影响.结果表明:缝宽分形维数越大,裂缝面密度越大,基质—裂缝等效渗透率越大;当裂缝面密度较大时,增加储层改造宽度对产能提升有较大影响;次生缝导流能力越高,提高主干缝导流能力对产能影响越大,次生缝导流能力越小,影响越小. 展开更多

关键词 页岩油 非线性渗流 体积压裂 分形 椭圆渗流 产能模型

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轴向间距变化对轴流压气机全流量特性的影响 被引量：17

5

作者 李传鹏 胡骏 +1 位作者 张燎原 王英锋 《推进技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期508-511,共4页

针对动静叶排轴向间距变化对压气机特性的影响,实验研究了6个轴向间距下压气机的压升特性。并采取在静子叶片表面埋入微型压力传感器的方法,对叶尖、叶中和叶根三个截面上的动态压力进行了测量。结果表明,对于同一轴向间距,不同转速下... 针对动静叶排轴向间距变化对压气机特性的影响,实验研究了6个轴向间距下压气机的压升特性。并采取在静子叶片表面埋入微型压力传感器的方法,对叶尖、叶中和叶根三个截面上的动态压力进行了测量。结果表明,对于同一轴向间距,不同转速下包括左支特性在内的全流量范围的压升特性具有重合性;轴向间距对压气机的失速流量和失速模态有很大的影响,轴向间距减小时,压气机的失速流量减小,稳定性得到加强;而且压气机工作于多团失速时的流量范围减小,失速模态由多团失速过渡到单团失速提前。 展开更多

关键词 压气机 轴向间距^+ 流量

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茯苓菌固态发酵小麦基质的成分变化 被引量：6

6

作者 李佳欢 林辉 +2 位作者 金文松 张燎原 胡开辉 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期103-109,共7页

以小麦基质为培养基,对茯苓固态发酵过程中的酶活力及营养成分进行测定。结果表明:发酵过程中,淀粉酶在20 d时达最高值,约为494.2 U/mL,随后基本保持稳定;木聚糖酶在20 d达1073.2 U/mL,随后略有下降;纤维素酶随培养时间延长不断提升,40 ... 以小麦基质为培养基,对茯苓固态发酵过程中的酶活力及营养成分进行测定。结果表明:发酵过程中,淀粉酶在20 d时达最高值,约为494.2 U/mL,随后基本保持稳定;木聚糖酶在20 d达1073.2 U/mL,随后略有下降;纤维素酶随培养时间延长不断提升,40 d时达1280.5 U/mL。与未发酵小麦相比,经发酵后的小麦中总糖质量分数明显下降,但还原糖、多糖、三萜的质量分数显著提升。茯苓菌可以通过酶的作用,利用小麦的营养成分,进而提升小麦的营养价值。 展开更多

关键词 茯苓 小麦 固态发酵 酶学性质 营养成分

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电缆桥架铝盖板的碱蚀处理 被引量：1

7

作者 张燎原 马德文 《材料保护》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期60-60,共1页

关键词 电缆桥架 铝盖板 碱蚀处理 表面处理

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铝型材砂面剂研究

8

作者 张燎原 张宏 《材料保护》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期35-36,共2页

介绍了一种已工业化应用的磨砂铝型材生产工艺。在前人研究的基础上 ,从碱液浓度、温度、络合、整平等方面进行试验 。

关键词 铝型材 砂面剂 研究 组分 性能

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静压法预应力管桩压桩力估算方法对比分析 被引量：2

9

作者 金建敏 陈飞 +3 位作者 戴道永 徐凯鹏 张燎原 叶观宝 《低温建筑技术》 2024年第4期35-38,44,共5页

为对比分析静压法预应力管桩的不同压桩力估算方法,文中以瑞苍高速公路(龙丽温至甬台温复线联络线工程)为例,选择4个典型压桩力经验公式,利用实测数据和计算结果进行对比分析。研究确定出最符合工程实际的估算公式,并结合规范规定的承... 为对比分析静压法预应力管桩的不同压桩力估算方法,文中以瑞苍高速公路(龙丽温至甬台温复线联络线工程)为例,选择4个典型压桩力经验公式,利用实测数据和计算结果进行对比分析。研究确定出最符合工程实际的估算公式,并结合规范规定的承载力计算公式,得到承载力与设计压桩力的经验关系,最终确定各标段不同设计桩长的设计压桩力。研究为同类工程设计施工提供了借鉴。 展开更多

关键词 预应力管桩 设计压桩力 压桩力估算

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卫星通信网中数据通信的实时性分析

10

作者 张燎原 丁军 《微波与卫星通信》 1998年第4期15-17,24,共4页

本文着手对卫星通信网中数据通信的实时性进行研究，就系统响应时间和网络时延进行了定量分析，同时介绍了目前卫星通信中解决长时延在链路控制上所采用的技术措施。

关键词 卫星通信 数据通信网 系统响应 时延

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17种中草药细菌群体感应抑制剂的筛选 被引量：7

11

作者 石倩 谢林香 +2 位作者 陈立志 胡开辉 张燎原 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期77-80,F0002,共5页

微生物致病性在很大程度上受到群体感应系统的调控,筛选群体感应系统抑制剂被认为是解决微生物致病性的有效方法之一。对17种中草药进行了群体感应抑制剂的筛选,结果表明,其中8种中草药能抑制Chromobacterium violaceum CV026产紫色色... 微生物致病性在很大程度上受到群体感应系统的调控,筛选群体感应系统抑制剂被认为是解决微生物致病性的有效方法之一。对17种中草药进行了群体感应抑制剂的筛选,结果表明,其中8种中草药能抑制Chromobacterium violaceum CV026产紫色色素的能力。试管梯度试验表明,这8种中草药有明显的群体感应抑制效果。浮游抑制试验结果表明,17种中草药中的13种可抑制铜绿假单胞菌的浮游。进一步对中草药中群体感应抑制剂的分离鉴定,将为揭示细菌群体感应抑制剂的机制研究和应用奠定基础。 展开更多

关键词 中草药 群体感应 群体感应抑制剂 浮游迁移

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不同干燥温度对鹿茸菇品质及其抗氧化活性的比较分析 被引量：10

12

作者 黄健航 郑峻 +5 位作者 杨斌 任佳媛 李佳欢 金文松 张燎原 胡开辉 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2022年第2期194-200,共7页

为探究不同热风干燥温度对鹿茸菇品质及抗氧化活性的影响,以新鲜的鹿茸菇为原料,对不同热风干燥温度获得的鹿茸菇的外观、复水率、总酚和黄酮含量进行检测,并考察了样品对DPPH、ABTS、羟自由基的清除能力。结果表明:随着干燥温度提高,... 为探究不同热风干燥温度对鹿茸菇品质及抗氧化活性的影响,以新鲜的鹿茸菇为原料,对不同热风干燥温度获得的鹿茸菇的外观、复水率、总酚和黄酮含量进行检测,并考察了样品对DPPH、ABTS、羟自由基的清除能力。结果表明:随着干燥温度提高,鹿茸菇复水率呈现下降趋势,55~65℃干燥温度下,鹿茸菇子实体外观较好;总酚和黄酮含量分别在55℃、75℃达到最高值11.7mg/g、0.23mg/g;鹿茸菇干品中的ABTS和羟自由基清除率在60℃最高,其EC_(50)分别为0.86mg/mL及2.20mg/mL。综合各项指标,热风干燥温度为60℃时,可以较好的保持鹿茸菇的色泽和抗氧化活性。 展开更多

关键词 鹿茸菇 抗氧化活性 热风干燥 活性成分 干燥温度

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基于文献计量的公路工程低碳施工管理对策研究

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作者 金建敏 翁辉 +3 位作者 张燎原 田苗苗 王新军 高硕晗 《交通节能与环保》 2024年第4期35-39,共5页

为降低公路工程施工碳排放,提高低碳施工的精细化管理水平,本文通过文献调研、工地走访的方式,在分析目前我国公路工程低碳施工的研究现状及低碳施工管理存在问题的基础上,从建立工程项目碳预算、实施低碳招标及控碳奖惩机制、推行低碳... 为降低公路工程施工碳排放,提高低碳施工的精细化管理水平,本文通过文献调研、工地走访的方式,在分析目前我国公路工程低碳施工的研究现状及低碳施工管理存在问题的基础上,从建立工程项目碳预算、实施低碳招标及控碳奖惩机制、推行低碳施工技术、实行施工碳排放跟踪监管制度、提高施工人员低碳意识等方面提出了公路工程低碳施工的管理对策,以促进我国低碳建设的有序开展。 展开更多

关键词 公路工程 低碳施工 研究现状 存在问题 管理对策

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榆黄蘑母种培养基及栽培配方的优化研究 被引量：4

14

作者 林铃 张琪辉 +3 位作者 金珊珊 俞穗珍 张燎原 郑明锋 《食药用菌》 2020年第1期32-36,共5页

设计考察不同培养基配方对榆黄蘑母种菌丝走菌及栽培出菇的影响,结果以土豆100 g,蔗糖10 g,琼脂9 g,pH自然,水500 mL的配方6可快速培养母种;以紫薯100 g,葡萄糖10 g,琼脂9 g,pH自然,水500mL的配方2可保持母种菌丝长势良好、活力强。以... 设计考察不同培养基配方对榆黄蘑母种菌丝走菌及栽培出菇的影响,结果以土豆100 g,蔗糖10 g,琼脂9 g,pH自然,水500 mL的配方6可快速培养母种;以紫薯100 g,葡萄糖10 g,琼脂9 g,pH自然,水500mL的配方2可保持母种菌丝长势良好、活力强。以玉米芯、麸皮为主的生产配方试验比较结果,采用玉米芯66%,麸皮30%,石灰2%,石膏1%,蔗糖1%的配方d,菌丝生长速度、菌丝长势、产量表现较好。以木屑、麸皮为主的生产配方比较试验结果,采用木屑58%,棉籽壳20%,麸皮20%,石灰1%,石膏1%,含水量60%~65%,pH 5.5~7.0的配方F,菌丝生长速度、菌丝长势及产量表现较好。 展开更多

关键词 榆黄蘑 栽培料 配方 优化

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灵芝UDP-GlcDH基因的cDNA克隆及生物信息学分析 被引量：2

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作者 章鸿宇 张燎原 《福建农业科技》 CAS 2022年第5期12-17,共6页

尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDP glucose dehydrogenase,UDP-GlcDH)可将UDP葡萄糖催化生成多糖形成必需的前体物质UDP葡萄糖醛酸。以黄曲霉的UDP-GlcDH基因序列为模板,采用电子克隆的方法,搜索灵芝EST文库,拼接获得灵芝UDP-GlcDH基因的cDN... 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDP glucose dehydrogenase,UDP-GlcDH)可将UDP葡萄糖催化生成多糖形成必需的前体物质UDP葡萄糖醛酸。以黄曲霉的UDP-GlcDH基因序列为模板,采用电子克隆的方法,搜索灵芝EST文库,拼接获得灵芝UDP-GlcDH基因的cDNA序列,并通过RT-PCR试验进行验证。采用生物信息学方法对UDP-GlcDH基因进行分析,表明该cDNA序列长度为1 591bp,其中包含能编码471个氨基酸的序列,分子量为51.8kD,PI为6.29,存在于内质网膜中,与污叉丝孔菌和云芝等真菌中的UDP-GlcDH基因编码的氨基酸序列高度同源。 展开更多

关键词 灵芝 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶 电子克隆 生物信息学分析

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宽温快速铝合金阳极氧化添加剂 被引量：4

16

作者 张永光 张燎原 《安徽工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第2期112-114,共3页

开发了用于宽温快速铝合金阳极氧化的复合添加剂WL-99。它由起导电、络合及去极化作用的三类物质组成。这三类物质对铝阳极氧化膜生长速度、耐蚀性的影响分别进行了试验并分析了他们的作用原理。工业试用表明WL-99能扩宽槽液温度到38℃... 开发了用于宽温快速铝合金阳极氧化的复合添加剂WL-99。它由起导电、络合及去极化作用的三类物质组成。这三类物质对铝阳极氧化膜生长速度、耐蚀性的影响分别进行了试验并分析了他们的作用原理。工业试用表明WL-99能扩宽槽液温度到38℃;成膜速度大于0.5μm/min。 展开更多

关键词 阳极氧化 铝合金 复合添加剂

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宽温快速铝材阳极氧化工艺及应用 被引量：6

17

作者 张燎原 张宏 孙建民 《材料保护》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期37-39,共3页

研究了宽温快速阳极氧化工艺 ,对宽温快速阳极氧化添加剂的作用机理作了分析。通过试验 ,确定了生产工艺和添加剂的配方。应用该工艺可以加快成膜速度 ,拓宽氧化槽液的温度范围 ,增加铝容许含量 ,降低能耗 。

关键词 宽温快速阳极氧化 铝型材 机理 工艺 铝合金

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猪急性腹泻综合征冠状病毒SYBR Green荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：8

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作者 张记宇 韩郁茹 +9 位作者 时洪艳 陈建飞 张鑫 刘建波 张燎原 冯书风 冯廷帅 季朝阳 石达 冯力 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2887-2894,共8页

为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品... 为建立快速、灵敏且特异的检测猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)检测方法,本试验扩增SADS-CoV N基因保守区域将其克隆至pMD18-T载体。所构建的重组质粒pMD18-T-SADS-qN作为阳性质粒标准品,以其为模板建立一种SYBR Green荧光定量PCR检测方法。结果显示,所建立方法在3.31×10^(1)~3.31×10^(7)拷贝·μL^(-1)模板量时,呈良好的线性关系,相关系数(R2)为0.997,斜率为-3.318。该方法特异性检测SADS-CoV;而猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测结果均为阴性。所构建的标准品检测灵敏度下限可以达到3.31×10^(1)拷贝·μL^(-1),组内和组间变异系数均小于1%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。用该方法检测SADS-CoV感染IPI-2I和IPEC-J2细胞后不同时间点和不同接毒剂量的复制情况,结果显示,SADS-CoV感染细胞后2 h病毒含量较低,在12~36 h病毒含量迅速增长,36 h后增长速度减缓且病毒含量维持在较高水平。分别用0、0.1、1 MOI SADS-CoV感染细胞结果显示病毒的mRAN转录水平呈现剂量依赖性增加,当MOI为1时,IPI-2I和IPEC-J2细胞病毒含量分别为10^(6.7)、10^(5.3)拷贝·mL^(-1)。进一步利用所建立的方法对经口服攻毒SADS-CoV仔猪的临床样本进行检测,结果发现病毒在空肠回肠含量较高,表明病毒主要定殖于空肠和回肠。综上表明,本研究建立SYBR Green荧光定量PCR检测方法能灵敏特异地检测SADS-CoV,为SADS-CoV的诊断和病毒相关基础研究提供可靠的检测手段。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征病毒 N基因 荧光定量PCR 检测

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卫星通信在水电站的应用

19

作者 张燎原 张玉功 《无线电工程》 1998年第6期51-53,56,共4页

本文介绍了由话音VSAT组成的卫星通道在牡丹江梯调对莲花水电站调度通信及计算机远方监控中的应用。着重阐述了如何通过话音VSAT系统中的网状网去实现梯级调度电话通信和计算机局域网互联的问题。

关键词 梯调中心 话音VSAT 卫星通信 水电站

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基于差值法的系杆拱桥更换吊杆方案优化研究 被引量：2

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作者 李浩师 黄平明 +2 位作者 王涛 蔡昌伟 张燎原 《铁道建筑》 北大核心 2018年第7期49-52,共4页

采用临时吊杆法更换中承式钢筋混凝土系杆拱桥吊杆,通过临时吊杆梯度转移吊杆力,完成吊杆更换。在现有等步长更换的基础上,为减小更换吊杆对相邻吊杆索力和桥面线形的影响,对吊杆张拉方案进行研究,提出采用差值法进行梯度张拉和卸载。... 采用临时吊杆法更换中承式钢筋混凝土系杆拱桥吊杆,通过临时吊杆梯度转移吊杆力,完成吊杆更换。在现有等步长更换的基础上,为减小更换吊杆对相邻吊杆索力和桥面线形的影响,对吊杆张拉方案进行研究,提出采用差值法进行梯度张拉和卸载。研究表明,采用差值法更换吊杆,可以明显减小桥面线形的变化量,减小对相邻吊杆索力的影响,并且至张拉完毕索力和线形均在限值范围之内,无需二次调索。 展开更多

关键词 城市桥梁 张拉方案 现场试验 系杆拱桥 更换吊杆 梯度张拉 差值法

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