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乌塌菜ISSR-PCR反应体系的建立及优化
被引量:
9
1
作者
宋江华
赵颖
+2 位作者
汪承刚
张灵凤
张慧
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期238-242,共5页
为获得乌塌菜ISSR-PCR的最佳反应体系,采用单因素浓度梯度试验和正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量对PCR反应的影响。并在此基础上对退火温度和循环数进一步优化,最终确立了适合乌塌菜IS...
为获得乌塌菜ISSR-PCR的最佳反应体系,采用单因素浓度梯度试验和正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量对PCR反应的影响。并在此基础上对退火温度和循环数进一步优化,最终确立了适合乌塌菜ISSR-PCR反应的最佳体系和程序。即20μL PCR反应体系含:30 ng模板DNA,0.50μmol.L-1引物,0.25 mmol.L-1 dNTP,1 mmol.L-1 Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶。PCR扩增程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,50℃退火1 min,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术对乌塌菜进行种质资源的分类鉴定奠定了基础。
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关键词
乌塌菜
ISSR-PCR
反应体系
正交设计
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职称材料
PM2.5对支气管上皮细胞色素上皮衍生因子表达的影响
被引量:
1
2
作者
朱成华
施丽君
+2 位作者
张灵凤
计晓兰
杜强
《中国康复理论与实践》
CSCD
北大核心
2016年第10期1151-1153,共3页
目的探索不同浓度PM2.5对支气管上皮细胞(BEAS-2B)色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白表达的影响。方法 BEAS-2B细胞传代培养,加入低、中、高浓度PM2.5悬液(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)刺激24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养...
目的探索不同浓度PM2.5对支气管上皮细胞(BEAS-2B)色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白表达的影响。方法 BEAS-2B细胞传代培养,加入低、中、高浓度PM2.5悬液(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)刺激24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中PEDF水平;Western blotting检测BEAS-2B细胞中PEDF蛋白表达水平。结果与对照组相比,PM2.5浓度为25μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白水平均有增加趋势,但无统计学意义(t=-0.730,t=-1.840,P>0.05);PM2.5浓度为50μg/ml和100μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白表达水平明显增高(t>5.798,P<0.01)。结论中、高浓度PM2.5能够增加支气管上皮细胞中PEDF蛋白水平,并呈浓度依赖性。
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关键词
细颗粒物
支气管上皮细胞
色素上皮衍生因子
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职称材料
“原始的力”与“愤懑”的社会想象——再论曹禺的创作心理与情感
3
作者
张灵凤
《江汉论坛》
CSSCI
北大核心
2022年第12期83-88,共6页
从《雷雨》开始,曹禺在阐释其创作时都会提到一个特殊的角色:在场而不露面的人物。可以说,“不露面的主角”贯穿了曹禺的创作,它具有“原始的力”,是冲破一切的可能和理想,但它始终不能直接露面,而被各种力量压抑、隐藏甚至删改。本文...
从《雷雨》开始,曹禺在阐释其创作时都会提到一个特殊的角色:在场而不露面的人物。可以说,“不露面的主角”贯穿了曹禺的创作,它具有“原始的力”,是冲破一切的可能和理想,但它始终不能直接露面,而被各种力量压抑、隐藏甚至删改。本文以此为切入点,重新理解曹禺创作中“社会问题”和“心理情感”这两个学界常见阐释线索之间的关联,揭示其中隐藏的复杂斗争和“愤懑”的情感风格,以及其创作的症候性意义。
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关键词
曹禺
原始的力
《雷雨》
《原野》
现实
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职称材料
题名
乌塌菜ISSR-PCR反应体系的建立及优化
被引量:
9
1
作者
宋江华
赵颖
汪承刚
张灵凤
张慧
机构
安徽农业大学园艺学院
出处
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期238-242,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31272170)
安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2012A109)
安徽省年度重点科研项目(11070303026)
文摘
为获得乌塌菜ISSR-PCR的最佳反应体系,采用单因素浓度梯度试验和正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量对PCR反应的影响。并在此基础上对退火温度和循环数进一步优化,最终确立了适合乌塌菜ISSR-PCR反应的最佳体系和程序。即20μL PCR反应体系含:30 ng模板DNA,0.50μmol.L-1引物,0.25 mmol.L-1 dNTP,1 mmol.L-1 Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶。PCR扩增程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,50℃退火1 min,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术对乌塌菜进行种质资源的分类鉴定奠定了基础。
关键词
乌塌菜
ISSR-PCR
反应体系
正交设计
Keywords
Brassica campestris L. var. rosularis
ISSR-PCR
reaction system
orthogonal design
分类号
S634.4 [农业科学—蔬菜学]
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职称材料
题名
PM2.5对支气管上皮细胞色素上皮衍生因子表达的影响
被引量:
1
2
作者
朱成华
施丽君
张灵凤
计晓兰
杜强
机构
南京医科大学第二附属医院呼吸科
南京医科大学第二临床医学院
出处
《中国康复理论与实践》
CSCD
北大核心
2016年第10期1151-1153,共3页
基金
江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目(No.201410312015Z)
江苏省六大人才高峰项目(No.WSN-015)
文摘
目的探索不同浓度PM2.5对支气管上皮细胞(BEAS-2B)色素上皮衍生因子(PEDF)蛋白表达的影响。方法 BEAS-2B细胞传代培养,加入低、中、高浓度PM2.5悬液(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)刺激24 h。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中PEDF水平;Western blotting检测BEAS-2B细胞中PEDF蛋白表达水平。结果与对照组相比,PM2.5浓度为25μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白水平均有增加趋势,但无统计学意义(t=-0.730,t=-1.840,P>0.05);PM2.5浓度为50μg/ml和100μg/ml时,细胞内和上清液中PEDF蛋白表达水平明显增高(t>5.798,P<0.01)。结论中、高浓度PM2.5能够增加支气管上皮细胞中PEDF蛋白水平,并呈浓度依赖性。
关键词
细颗粒物
支气管上皮细胞
色素上皮衍生因子
Keywords
particulate matter
bronchial epithelial cells
pigment epithelium-derived factor
分类号
R562.2 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
“原始的力”与“愤懑”的社会想象——再论曹禺的创作心理与情感
3
作者
张灵凤
机构
北京大学中文系
出处
《江汉论坛》
CSSCI
北大核心
2022年第12期83-88,共6页
文摘
从《雷雨》开始,曹禺在阐释其创作时都会提到一个特殊的角色:在场而不露面的人物。可以说,“不露面的主角”贯穿了曹禺的创作,它具有“原始的力”,是冲破一切的可能和理想,但它始终不能直接露面,而被各种力量压抑、隐藏甚至删改。本文以此为切入点,重新理解曹禺创作中“社会问题”和“心理情感”这两个学界常见阐释线索之间的关联,揭示其中隐藏的复杂斗争和“愤懑”的情感风格,以及其创作的症候性意义。
关键词
曹禺
原始的力
《雷雨》
《原野》
现实
分类号
I234 [文学—中国文学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乌塌菜ISSR-PCR反应体系的建立及优化
宋江华
赵颖
汪承刚
张灵凤
张慧
《植物研究》
CAS
CSCD
北大核心
2013
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
PM2.5对支气管上皮细胞色素上皮衍生因子表达的影响
朱成华
施丽君
张灵凤
计晓兰
杜强
《中国康复理论与实践》
CSCD
北大核心
2016
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
“原始的力”与“愤懑”的社会想象——再论曹禺的创作心理与情感
张灵凤
《江汉论坛》
CSSCI
北大核心
2022
0
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