文摘目的:探讨五味子合剂(SM)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏的保护作用,及其对自噬及Akt/mTOR通路的影响。方法:SPF级SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、达格列净(Dapagliflozin,0.9 g·kg^(-1)·d^(-1),DA)组、SM高剂量(6 g·kg^(-1)·d^(-1),SM-H)组、SM中剂量(3 g·kg^(-1)·d^(-1),SM-M)组及SM低剂量(1.5 g·kg^(-1)·d^(-1),SM-L)组,每组10只。除对照组外,其余各组均采用高糖高脂饮食联合STZ单次腹腔注射构建DN模型。造模成功后,干预12周。连续观测大鼠血糖(Glu)及24 h尿蛋白定量(24 h UTP)变化。干预结束后,检测肾功能,肾脏指数(KI),与肾组织病理变化。Western Blotting检测肾组织中自噬泡标记蛋白(LC3)、自噬底物(P62)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)的蛋白表达量;免疫荧光染色检测肾组织中LC3、P62的表达情况。结果:与对照组相比,模型组Glu、24 h UTP、Scr、BUN及KI均显著升高(P<0.05或P<0.01),肾组织病理损伤明显加重;LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达量比值降低,P62蛋白表达量以及p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达量比值(P<0.05或P<0.01)升高。与模型组相比,SM各剂量组及DA组Glu、24 h UTP、Scr、BUN及KI均显著降低(P<0.05或P<0.01),肾组织病理损伤明显改善,SM-H组上述变化最为明显;并且SM-H组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达量比值升高,P62蛋白表达量以及p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达量比值(P<0.05或P<0.01)降低。结论:SM可激活DN大鼠肾脏自噬,促进自噬降解,从而发挥肾保护作用,其机制可能与抑制Akt/mTOR通路有关。
