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PEDV S1-NTD和S1-CTD不同组合假病毒的构建及鉴定
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作者 张永晨 齐珊珊 +3 位作者 李春秋 朱庆贺 邢晓旭 孙东波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第2期46-52,共7页
猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种具有高度传染性的冠状病毒,可引起仔猪严重腹泻和高死亡率。PEDV刺突糖蛋白(spike,S)中S1亚基N末端结构域(S1 subunit N-terminal domain,S1-NTD)和C末端结构域(S1subunit... 猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种具有高度传染性的冠状病毒,可引起仔猪严重腹泻和高死亡率。PEDV刺突糖蛋白(spike,S)中S1亚基N末端结构域(S1 subunit N-terminal domain,S1-NTD)和C末端结构域(S1subunit C-tjerminal domain,S1-CTD)在病毒入侵过程中发挥重要作用,但其机制尚未完全阐明。为进一步探索PEDV S1-NTD和S1-CTD在病毒入侵宿主细胞过程中的协同作用,研究利用水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)假病毒系统,构建了PEDV经典毒株CV777和PEDV GIIa型变异毒株HM2017的S1-NTD和S1-CTD不同组合S蛋白假病毒,分别命名为rvCV777-S1-NTD+CV777-S1-CTD、rvCV777-S1-NTD+HM2017-S1-CTD、rvHM2017-S1-NTD+CV777-S1-CTD和rvHM2017-S1-NTD+HM2017-S1-CTD,并对构建的重组病毒进行鉴定。结果显示:透射电镜(TEM)观察到不同组合的S蛋白假病毒均呈直径约180 mn的典型子弹状粒子;Western blot检测显示,表达不同的S1-NTD和S1-CTD组合S蛋白的假病毒与PEDV S蛋白单克隆抗体均发生特异性反应,条带大小为180 kDa;间接免疫荧光试验表明,实验组均呈现清晰的绿色荧光。上述结果证明,研究成功构建了不同S1-NTD和S1-CTD组合的S蛋白假病毒,为PEDV入侵机制研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 水疱性口炎病毒 S1-NTD S1-CTD 假病毒
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香蕉皮中总多烯类物质研究 被引量:1
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作者 沈德凤 何少敏 张永晨 《安徽农业科学》 CAS 2013年第3期1265-1266,共2页
[目的]研究香蕉皮中总多烯的提取及鉴别方法。[方法]采用浸提法从香蕉皮中提取多烯类物质,以两性霉素B为对照品,通过化学鉴别方法、薄层色谱法、红外光谱法、高效液相法对所提取的多烯类物质进行验证。[结果]乙醇浸提法是提取香蕉皮多... [目的]研究香蕉皮中总多烯的提取及鉴别方法。[方法]采用浸提法从香蕉皮中提取多烯类物质,以两性霉素B为对照品,通过化学鉴别方法、薄层色谱法、红外光谱法、高效液相法对所提取的多烯类物质进行验证。[结果]乙醇浸提法是提取香蕉皮多烯类物质的合适方法,鉴别方法效果良好。[结论]所建立的方法简便、准确、可靠、重现性好,可为香蕉皮总多烯的提取及鉴别提供参考。 展开更多
关键词 香蕉皮 薄层色谱 红外光谱 高效液相色谱 多烯
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血管软化丸调控miRNA-467b抗动脉粥样硬化的作用与初步机制研究 被引量:10
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作者 张永晨 秦合伟 赵平丽 《安徽中医药大学学报》 2020年第5期66-71,共6页
目的探讨中药复方血管软化丸通过miRNA-467b靶向脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)调控巨噬细胞,减少白细胞介素(interleukin,IL)-6,IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemo... 目的探讨中药复方血管软化丸通过miRNA-467b靶向脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)调控巨噬细胞,减少白细胞介素(interleukin,IL)-6,IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用与初步机制。方法将RAW264.7巨噬细胞随机分为5组,即对照组、模型组、miR-467b mimic组、中药高剂量含药血清组、中药低剂量含药血清组;经干预后,采用RT-PCR检测巨噬细胞中pri-miR-467b和LPL mRNA表达;采用高效液相色谱法检测巨噬细胞内胆固醇水平。连续4周高脂饲料(含脂肪21%、胆固醇0.15%)饲养ApoE-/-小鼠复制动脉粥样硬化模型,模型复制成功后,中药高、低剂量组每日分别灌胃血管软化丸86.4、21.6 g/kg,连续给药12周;对照组、模型组每日灌胃0.9%生理盐水86.4 g/kg。采用免疫组织化学法检测主动脉LPL蛋白表达水平,RT-PCR检测主动脉pri-miR-467b和LPL mRNA表达水平;采用ELISA法检测血清IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1水平。结果与对照组比较,模型组巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内游离胆固醇(free cholesterol,FC)水平均明显降低(P<0.05),巨噬细胞内LPL mRNA及其蛋白表达水平以及总胆固醇(total cholesterol,TC)、胆固醇酯(cholesterol ester,CE)水平均明显升高(P<0.05)。血管软化丸能够无剂量依赖性地升高巨噬细胞pri-miR-467b mRNA表达水平和巨噬细胞内FC水平(P<0.05),降低巨噬细胞中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及TC、CE水平(P<0.05)。血管软化丸能够升高主动脉pri-miR-467b mRNA表达水平(P<0.05),降低主动脉中LPL mRNA及其蛋白表达水平以及血清中IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1水平(P<0.05)。结论血管软化丸抑制动脉粥样硬化斑块形成的作用机制可能与调控miRNA-467b靶向LPL调控巨噬细胞,减少IL-6、IL-1β、TNF-α、MCP-1等炎症因子分泌和巨噬细胞脂质蓄积相关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 血管软化丸 miRNA-467b 巨噬细胞
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益智增寿胶囊治疗血管性痴呆随机平行对照研究 被引量:3
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作者 张永晨 魏霞 《实用中医内科杂志》 2014年第9期27-29,共3页
[目的]观察益智增寿胶囊治疗血管性痴呆疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将68例住院及门诊患者按就诊顺序编号简单随机分为两组。对照组34例吡拉西坦片0.8g/次,3次/d。治疗组34例益智增寿胶囊(熟地、何首乌、褚实子、益智仁、枸杞子... [目的]观察益智增寿胶囊治疗血管性痴呆疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将68例住院及门诊患者按就诊顺序编号简单随机分为两组。对照组34例吡拉西坦片0.8g/次,3次/d。治疗组34例益智增寿胶囊(熟地、何首乌、褚实子、益智仁、枸杞子、丹参、龟板、山萸肉各15g,桃仁、红花、川芎、石菖蒲、郁金、赤芍各10g,黄精20g),5粒/次,3次/d。连续治疗3个月为1疗程。观测临床症状、简易精神状态量表、中医症候、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]简易精神状态治疗组显效8例,有效16例,无效10例,总有效率70.59%;对照组显效2例,有效8例,无效24例,总有效率29.41%。中医症候治疗组显效12例,有效8例,无效14例,总有效率58.82%;对照组显效1例,有效5例,无效28例,总有效率17.65%。中医症候疗效治疗组优于对照组(P<0.01)。[结论]益智增寿胶囊治疗血管性痴呆疗效显著,值得进一步研究。 展开更多
关键词 血管性痴呆 益智增寿胶囊 吡拉西坦片 中医药治疗 随机平行对照研究
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自拟五虫通络汤联合现代康复治疗急性缺血性脑卒中随机平行对照研究 被引量:1
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作者 魏霞 张永晨 《实用中医内科杂志》 2013年第2期102-104,共3页
[目的]观察自拟五虫通络汤联合现代康复治疗急性缺血性脑卒中疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院及门诊患者按随机数字表法随机分为两组。对照组30例西医常规治疗方法,控制脑水肿、抗血小板聚集、控制血压血糖血脂、预防感染... [目的]观察自拟五虫通络汤联合现代康复治疗急性缺血性脑卒中疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院及门诊患者按随机数字表法随机分为两组。对照组30例西医常规治疗方法,控制脑水肿、抗血小板聚集、控制血压血糖血脂、预防感染等基础治疗措施。治疗组30例自拟五虫通络汤(黄芪30g,当归12g,川芎15g,丹参30g,赤芍15g,桃仁12g,红花12g,全虫10g,水蛭12g,土元12g,白僵蚕12g,地龙15g,络石藤30g,伸筋草30g,鸡血藤30g,钩藤30g,建曲15g,甘草6g),1剂/d,每剂浓缩为两袋,每袋150mL,2次/d,早晚服用。同时在生命体征稳定后早期加现代康复Bobath疗法。西医治疗同对照组。连续治疗30d为1疗程。观测临床症状、NIHSS评分、不良反应。连续治疗2疗程,判定疗效。[结果]治疗组基本痊愈3例,显著进步15例,进步7例,无变化5例,恶化0例,总有效率83.33%。对照组基本痊愈1例,显著进步11例,进步5例,无变化13例,恶化0例,总有效率56.67%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。两组NIHSS评分有改善(P<0.05,P<0.01),治疗组优于对照组(P<0.01)。[结论]自拟五虫通络汤联合现代康复治疗急性缺血性脑卒中可以较好的提高患者的生活自理能力,减轻后遗症,且安全,有效,经济,值得进一步研究。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 中风 医林改错 自拟五虫通络汤 现代康复 西医治疗 随机平行对照研究
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