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巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化被引量：1: 1; 作者张榕珍王黎霞 +4 位作者郭许情张健张天宇张建军安健《北京农学院学报》 2021年第3期67-71,共5页; [目的]为了获得纯净的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)裂殖子。[方法]对25日龄白羽肉鸡口服接种3×105巨型艾美耳球虫卵囊,在其感染后48~124 h取十二指肠末端到卵黄蒂后5 cm处肠段,收集裂殖子并计数,确定分离裂殖子的最佳时间;将所... 展开更多; 关键词巨型艾美耳球虫裂殖子分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

柔嫩艾美耳球虫分泌性蛋白生物信息学分析被引量：2: 2; 作者许中衎王黎霞 +7 位作者王静李畅乔尚怡张榕珍张一弛芳卉张建军安健《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期42-46,I0004,共6页; 为了分析柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)外分泌性蛋白的功能与结构以及预测其作为疫苗候选抗原的可能性,本试验将E.tenella第二代裂殖子与马-达氏牛肾细胞(MDBK细胞)通过Transwell小室进行无血清间接共培养12 h,收集培养液上清,利用液相色谱... 展开更多; 关键词柔嫩艾美耳球虫分泌性蛋白生物信息学分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP的构建及高效转染细胞的筛选被引量：1: 3; 作者郭许情王黎霞 +7 位作者张榕珍张健张天宇石梦云王诗琪赵小涵张建军安健《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期45-48,55,共5页; 为了构建真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP,并筛选出Lipofectamine 2000介导的高效转染细胞,本试验将柔嫩艾美尔球虫假定蛋白(Et HP)基因扩增后插入真核荧光表达载体pEGFP-N1,构建真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP;测序成功后,用Lipofecta... 展开更多; 关键词柔嫩艾美尔球虫假定蛋白真核重组荧光质粒 DF-1细胞转染效率; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡柔嫩艾美耳球虫HP基因的真核表达及其对鸡巨噬细胞凋亡的影响被引量：1: 4; 作者许中衎王黎霞 +5 位作者张榕珍张一弛芳卉潘晨帆张建军安健《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期34-38,42,共6页; HP基因编码蛋白是本实验室近期发现的一种鸡柔嫩艾美耳球虫的外分泌蛋白。本试验旨在构建重组荧光真核表达质粒pEGFP-HP,将其转染至细胞内,以此来分析HP基因对宿主细胞凋亡的影响。以柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子cDNA为模板进行PCR扩增,... 展开更多; 关键词柔嫩艾美耳球虫 HP基因重组荧光真核表达质粒细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡饲料中添加红景天预防柔嫩艾美尔球虫的效果被引量：5: 5; 作者张健乔尚怡 +5 位作者潘晨帆张榕珍郭许情周爽安健张建军《北京农学院学报》 2021年第4期59-63,共5页; 【目的】为了探明红景天对柔嫩艾美尔球虫预防效果,对于发展养鸡业提供一定的指导意义。【方法】选12日龄100只商品代雏鸡随机分为5组,阴性对照组、阳性对照组、1.5%红景天组、1.0%红景天组及0.5%红景天组。14日龄时,除阴性对照组不攻虫... 展开更多; 关键词红景天柔嫩艾美尔球虫预防; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化被引量：1: 1; 作者张榕珍王黎霞郭许情张健张天宇张建军安健; 机构北京农学院动物科学技术学院北京农业职业学院牧医系; 出处《北京农学院学报》 2021年第3期67-71,共5页; 基金北京市特色高水平骨干专业群项目-动物医学专业群项目-技术平台与社会服务建设项目(PXM2020-157102-000060-15) 北京农业职业学院院级科研项目(XY-JT-03)。; 文摘 [目的]为了获得纯净的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)裂殖子。[方法]对25日龄白羽肉鸡口服接种3×105巨型艾美耳球虫卵囊,在其感染后48~124 h取十二指肠末端到卵黄蒂后5 cm处肠段,收集裂殖子并计数,确定分离裂殖子的最佳时间;将所取肠段均分为5段,分别对裂殖子进行计数,筛选分离裂殖子的最佳肠段;通过DEAE-52纤维素柱层析对裂殖子进行纯化并分管收集,确定收集较高纯度裂殖子的最佳时间。[结果]在感染后84 h所收集的裂殖子最多;此外,从空肠中后段及空肠末端肠段中分离出较多数量的裂殖子,占总数的62%以上;通过DEAE-52纤维素柱层析获得44 mL纯度较高的裂殖子。[结论]分离巨型艾美耳球虫裂殖子的最佳时间为感染后84 h,最佳肠段为空肠后段,收集1~44 mL洗脱液能够获得纯度较高的裂殖子。; 关键词巨型艾美耳球虫裂殖子分离纯化; Keywords Eimeria maxima merozoites isolation purification; 分类号 S853.723 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名柔嫩艾美耳球虫分泌性蛋白生物信息学分析被引量：2: 2; 作者许中衎王黎霞王静李畅乔尚怡张榕珍张一弛芳卉张建军安健; 机构北京农学院动物科学技术学院国家级动物类实验教学示范中心北京农业职业学院畜牧兽医系; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期42-46,I0004,共6页; 文摘为了分析柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)外分泌性蛋白的功能与结构以及预测其作为疫苗候选抗原的可能性,本试验将E.tenella第二代裂殖子与马-达氏牛肾细胞(MDBK细胞)通过Transwell小室进行无血清间接共培养12 h,收集培养液上清,利用液相色谱-串联质谱仪(LC-MS/MS)进行系列定性检测。将检测到的数据连接Mascot检索软件鉴定蛋白液中蛋白质的组成。运用生物信息学软件预测这些蛋白质的二级结构、跨膜结构域、亲/疏水性、信号肽、抗原表位和三维结构等。生物信息学分析得到的4种蛋白均无跨膜区,具有高疏水性,具有多个抗原表位,Hsp90和Histone 4存在信号肽,而HP和Ribosomal protein不存在信号肽。表明这些蛋白有潜在的免疫原性,可能成为柔嫩艾美耳球虫最为重要的潜在药物靶点或疫苗候选抗原。; 关键词柔嫩艾美耳球虫分泌性蛋白生物信息学分析; Keywords E.tenella Secretory protein Bioinformatic analysis; 分类号 S884.23 [农业科学—特种经济动物饲养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP的构建及高效转染细胞的筛选被引量：1: 3; 作者郭许情王黎霞张榕珍张健张天宇石梦云王诗琪赵小涵张建军安健; 机构北京农学院动物科学技术学院北京农业职业学院畜牧兽医系; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期45-48,55,共5页; 基金北京市特色高水平骨干专业群项目-技术平台与社会服务建设项目(PXM2020-157102-000060-15) 北京农业职业学院院级科研项目(XY-JT-03)。; 文摘为了构建真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP,并筛选出Lipofectamine 2000介导的高效转染细胞,本试验将柔嫩艾美尔球虫假定蛋白(Et HP)基因扩增后插入真核荧光表达载体pEGFP-N1,构建真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP;测序成功后,用Lipofectamine 2000介导pEGFP-N1-Et HP转染4种细胞即Vero、DF-1、BHK、HD-11;用Western blot检测确定Et HP蛋白在4种细胞内的表达,并观察转染48 h后荧光表达情况,计算5个视野内带有绿色荧光的细胞数占细胞总数的比例,从而比较质粒与Lipofectamine 2000比例不同时4种细胞的转染效率[转染效率/%=(带有绿色荧光的细胞数/细胞总数)×100%]。测序结果显示,pEGFP-N1-Et HP构建成功。Western blot检测显示,Et HP蛋白在4种细胞中均成功表达;荧光显微镜观察到4种细胞转染后48 h均出现绿色荧光,表明重组质粒pEGFP-N1-Et HP成功表达。通过转染效率的比较,发现DF-1细胞转染效率均显著高于其他细胞(P<0.05);当质粒与Lipofectamine 2000比例为1∶2时,DF-1细胞转染效率最高。因此,重组质粒pEGFP-N1-Et HP可高效转染DF-1细胞。本试验结果为进一步探索Et HP蛋白在柔嫩艾美尔球虫入侵寄生过程中的生物学功能提供有效的试验工具。; 关键词柔嫩艾美尔球虫假定蛋白真核重组荧光质粒 DF-1细胞转染效率; Keywords Eimeria tenella hypothetical protein eukaryotic recombinant fluorescent plasmid DF-1 cells transfection efficiency; 分类号 S855.9 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡柔嫩艾美耳球虫HP基因的真核表达及其对鸡巨噬细胞凋亡的影响被引量：1: 4; 作者许中衎王黎霞张榕珍张一弛芳卉潘晨帆张建军安健; 机构北京农学院动物科学技术学院国家级动物类实验教学示范中心北京农业职业学院畜牧兽医系; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期34-38,42,共6页; 基金北京市特色高水平骨干专业群项目-动物医学专业群项目-技术平台与社会服务建设项目(PMX2020-157102-00060-15) 北京农业职业学院院级科研项目(XY-JT-03)。; 文摘 HP基因编码蛋白是本实验室近期发现的一种鸡柔嫩艾美耳球虫的外分泌蛋白。本试验旨在构建重组荧光真核表达质粒pEGFP-HP,将其转染至细胞内,以此来分析HP基因对宿主细胞凋亡的影响。以柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子cDNA为模板进行PCR扩增,然后克隆至荧光真核表达质粒pEGFP,构建重组荧光真核表达质粒pEGFP-HP,将其转染至鸡巨噬细胞(HD11),42 h后采用流式细胞术检测宿主细胞凋亡情况。菌液PCR鉴定和测序鉴定结果显示,重组荧光真核表达载体pEGFP-HP构建成功。流式细胞术检测发现,pEGFP-HP重组质粒组的早期凋亡率显著高于pEGFP空质粒组和空白对照组(P<0.01)。结果表明柔嫩艾美耳球虫HP基因会促进HD11的细胞凋亡,尤其是早期细胞凋亡。本试验为进一步研究HP基因的生物学功能及其作用机制提供了依据,且将HP基因从此命名为柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导基因(IA)。; 关键词柔嫩艾美耳球虫 HP基因重组荧光真核表达质粒细胞凋亡; Keywords E.tenella HP gene recombinant fluorescent eukaryotic expression plasmid cell apoptosis; 分类号 R382.32 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡饲料中添加红景天预防柔嫩艾美尔球虫的效果被引量：5: 5; 作者张健乔尚怡潘晨帆张榕珍郭许情周爽安健张建军; 机构北京农学院动物科学技术学院; 出处《北京农学院学报》 2021年第4期59-63,共5页; 基金北京邦士富生物科技有限公司资助项目。; 文摘【目的】为了探明红景天对柔嫩艾美尔球虫预防效果,对于发展养鸡业提供一定的指导意义。【方法】选12日龄100只商品代雏鸡随机分为5组,阴性对照组、阳性对照组、1.5%红景天组、1.0%红景天组及0.5%红景天组。14日龄时,除阴性对照组不攻虫外,其余4组分别口服接种4000个柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊。21日龄剖杀,同时测定所有鸡只的增重、存活率、盲肠病变分值、卵囊产量以及抗球虫指数(ACI)。取各试验组鸡只的盲肠进行病理组织学观察,采集血清并测定相关的细胞因子。【结果】饲喂红景天的鸡在增重、存活率、盲肠病变分值、卵囊排出量以及ACI等指标上均优于阳性对照组,且低剂量组效果最好;在饲料中添加红景天可以显著降低感染鸡球虫后雏鸡血清中的白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和提高血清IgG的含量。【结论】红景天对感染柔嫩艾美尔球虫的雏鸡有一定的预防作用。; 关键词红景天柔嫩艾美尔球虫预防; Keywords Rhodiola Eimeria tenella prevention; 分类号 S852.7 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化	张榕珍王黎霞郭许情张健张天宇张建军安健	《北京农学院学报》	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	柔嫩艾美耳球虫分泌性蛋白生物信息学分析	许中衎王黎霞王静李畅乔尚怡张榕珍张一弛芳卉张建军安健	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2019	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP的构建及高效转染细胞的筛选	郭许情王黎霞张榕珍张健张天宇石梦云王诗琪赵小涵张建军安健	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2022	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鸡柔嫩艾美耳球虫HP基因的真核表达及其对鸡巨噬细胞凋亡的影响	许中衎王黎霞张榕珍张一弛芳卉潘晨帆张建军安健	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	鸡饲料中添加红景天预防柔嫩艾美尔球虫的效果	张健乔尚怡潘晨帆张榕珍郭许情周爽安健张建军	《北京农学院学报》	2021	5	在线阅读下载PDF 职称材料