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龟鹿二仙胶激活PINK1/Parkin介导线粒体自噬诱导成骨细胞分化
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作者 修禹 宋超 +6 位作者 张榕升 邓志博 戴晗豪 苏议斌 杨林海 罗骏 徐杰 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第2期169-174,共6页
目的探究龟鹿二仙胶对MC3T3-E1细胞成骨分化及机制的影响。方法制备含龟鹿二仙胶含药血清,运用CCK-8法确定最适宜干预浓度和时间。将细胞分为胎牛血清组(FBS组)、经典诱导组(JDYD组)、空白血清组(KB组)、龟鹿二仙胶组(GL组)。使用WB检测... 目的探究龟鹿二仙胶对MC3T3-E1细胞成骨分化及机制的影响。方法制备含龟鹿二仙胶含药血清,运用CCK-8法确定最适宜干预浓度和时间。将细胞分为胎牛血清组(FBS组)、经典诱导组(JDYD组)、空白血清组(KB组)、龟鹿二仙胶组(GL组)。使用WB检测Runx2等成骨分化相关蛋白、COMPLEXⅠ~Ⅴ等线粒体功能相关蛋白,PINK1、Parkin等线粒体自噬相关蛋白表达情况;通过IF染色检测COL1A1、OCN等成骨分化相关蛋白表达;利用ALP和ARS染色检测成骨分化和矿化程度;通过激光共聚焦显微镜检测PINK1、Parkin与Mitotracker共定位情况。结果最适浓度和干预时间分别为10%和72 h(P<0.0001);GL组COL1A1、Runx2、OCN、COMPLEXⅡ~Ⅴ、PINK1、Parkin、LC3BⅠ和LC3BⅡ蛋白表达显著高于FBS组和KB组(P<0.05),与JDYD组持平;GL组COL1A1、Runx2、OCN的荧光强度高于FBS组和KB组,与JDYD组相当;GL组ALP和ARS染色阳性区域比例显著高于FBS组和KB组,与JDYD组持平;GL组PINK1、Parkin与Mitotracker的共定位程度显著高于FBS组和KB组,与JDYD组相近。结论龟鹿二仙胶通过激活PINK1/Parkin通路介导线粒体自噬,进而起到促进成骨细胞分化的作用。 展开更多
关键词 成骨细胞 龟鹿二仙胶 线粒体自噬 PINK1 PARKIN
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