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漆酶Lcc9在灰盖鬼伞菌中的同源过表达
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作者 张晶娜 周刚 +2 位作者 刘娟娟 方泽民 肖亚中 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期47-51,共5页
为了高效制备漆酶Lcc9,克隆了Lcc9编码基因,利用酿酒酵母同源重组技术构建lcc9过表达载体并在Corprinopsis cinerea Okayama 7#130(OK7)和FA2222中进行同源过表达。经原生质体共转化、再生培养基初筛、最简培养基复筛,分别获得46株OK7... 为了高效制备漆酶Lcc9,克隆了Lcc9编码基因,利用酿酒酵母同源重组技术构建lcc9过表达载体并在Corprinopsis cinerea Okayama 7#130(OK7)和FA2222中进行同源过表达。经原生质体共转化、再生培养基初筛、最简培养基复筛,分别获得46株OK7和29株FA2222阳性转化子。摇瓶发酵结果显示,在Kjalke培养基中接种5%(体积分数),经37℃培养6~7 d后,OK7阳性菌株漆酶活力达到5.1~21.1 U/mL,FA2222阳性菌株漆酶活力达到3.7~12.3 U/mL,分别为野生型表达量的19.2和241.2倍。在3 L发酵罐中对FA2222阳性菌株进行漆酶的发酵制备,结果显示,经37℃、50 r/min培养108 h后菌株漆酶活力达59 U/mL,相比普通摇瓶发酵,漆酶活力进一步提高了4.8倍。 展开更多
关键词 漆酶 Lcc9 灰盖鬼伞 同源过表达 高密度发酵
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酸橙精油GC-MS分析及其生物活性 被引量:5
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作者 余万鑫 王彬 +5 位作者 张晶娜 段淑英 夏琳娟 刘衡 何苗 李婷 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期3046-3051,共6页
目的GC⁃MS法研究酸橙精油成分及其生物活性。方法通过GC⁃MS法对酸橙精油进行成分分析,测定各个化合物的相对含有量;采用牛津杯法测定抑菌圈的大小,评价酸橙精油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及白色念珠菌的抑菌活性;建立脂多糖诱导RAW26... 目的GC⁃MS法研究酸橙精油成分及其生物活性。方法通过GC⁃MS法对酸橙精油进行成分分析,测定各个化合物的相对含有量;采用牛津杯法测定抑菌圈的大小,评价酸橙精油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及白色念珠菌的抑菌活性;建立脂多糖诱导RAW264􀆰7细胞炎症模型,给予地塞米松及酸橙精油低、中、高剂量油液,通过酶联免疫吸附法检测细胞上清液中IL⁃1β及TNF⁃α的表达量。结果从中共鉴定36个化合物,已鉴定的成分占总峰面积的61.21%,其中(1S)⁃(-)⁃α⁃蒎烯占总量的13.76%;金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌对酸橙精油高度敏感,白色念珠菌对其中度敏感;酸橙精油呈剂量依赖性降低炎症细胞IL⁃1β及TNF⁃α的表达量(P<0.01),其中高剂量组IL⁃1β及TNF⁃α表达量与地塞米松组相近;酸橙精油高剂量药物对L1210、AGS及K562的细胞增殖抑制率可达55%,对NCI⁃N87的抑制作用不明显。结论该方法简便、快捷,可用于酸橙精油的质量控制,且其具有较强的抑菌、抗炎抗肿瘤活性,抗炎作用可能与其阻止巨噬细胞向M1型分化有关。 展开更多
关键词 酸橙精油 抑菌 抗炎 抗肿瘤 GC⁃MS
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美洲大蠊提取物Ento-A对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用 被引量:2
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作者 罗荣耀 张晶娜 +4 位作者 偰栖 马旋垒 刘胜帅 李玥 何苗 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期112-116,I0008,共6页
为了探究美洲大蠊提取物Ento-A对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。使用康复新液、西咪替丁、美洲大蠊提取物Ento-A高、低剂量灌胃大鼠,每天1次,连续8 d;末次给药后1 h,灌胃80%乙醇与20 mg/mL水杨酸钠溶液的等体积混合液建立急性胃黏膜损... 为了探究美洲大蠊提取物Ento-A对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用。使用康复新液、西咪替丁、美洲大蠊提取物Ento-A高、低剂量灌胃大鼠,每天1次,连续8 d;末次给药后1 h,灌胃80%乙醇与20 mg/mL水杨酸钠溶液的等体积混合液建立急性胃黏膜损伤模型,90 min后观察胃黏膜损伤情况。酶联免疫法检测血清中PGE 2、COX-2、CRP的水平及胃组织匀浆中TGF-β1的水平。结果显示,与模型对照组比较,康复新液、西咪替丁及美洲大蠊提取物Ento-A能显著降低急性胃炎大鼠血清中COX-2、PGE 2、CRP的表达(P<0.01),并能显著提升胃组织匀浆中TGF-β1的水平(P<0.01)。表明美洲大蠊提取物Ento-A可明显减轻大鼠急性胃炎的损伤程度,可能与降低血清PGE 2、COX-2、CRP的水平及升高胃组织匀浆中TGF-β1的水平有关。 展开更多
关键词 美洲大蠊提取物Ento-A 急性胃炎 胃黏膜损伤
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