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心传导束相关特异性抗体制备及其在心脏疾病检测中的初步应用
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作者 任帆 陆辉 +4 位作者 李耀 张昕霞 潘红阳 毛峥嵘 周韧 《解剖学杂志》 CAS 2022年第1期11-16,F0003,共7页
目的:研发和制备心钠肽(ANP)的兔单克隆抗体,检测其在心窦房结、传导束的免疫特性表达及其在心脏疾病中的检测应用。方法:采用固相多肽合成法合成ANP特异性多肽,对新西兰大耳白兔进行免疫,取出兔脾细胞与兔的骨髓瘤细胞240E-W3进行融合... 目的:研发和制备心钠肽(ANP)的兔单克隆抗体,检测其在心窦房结、传导束的免疫特性表达及其在心脏疾病中的检测应用。方法:采用固相多肽合成法合成ANP特异性多肽,对新西兰大耳白兔进行免疫,取出兔脾细胞与兔的骨髓瘤细胞240E-W3进行融合,采用兔单克隆抗体技术制备兔单抗,运用免疫印迹、免疫组织化学法鉴定其特异性和敏感性。收集24例人心组织,其中呼吸系统疾病、心血管系统疾病、其他疾病导致死亡的比例分别占33%、54%、13%,对24例人心组织进行免疫组织化学检测ANP表达。结果:制备抗ANP的兔单克隆抗体(ab225873),经免疫印迹检测显示,ANP在人心组织中可以特异性识别大小为16 kD的条带。免疫组织化学结果显示,ANP特异性表达在成人心组织的窦房结和左心室的传导束,但心室肌以及成人的其他组织中不表达。24例人心组织中心房肌阳性率为100%,窦房结阳性率为100%,传导束阳性率为50%,心室肌阳性率为0。结论:本研究制备的抗ANP兔单克隆抗体(ab225873)在免疫印迹和免疫组织化学上均表现有良好的特异性与敏感性,能特异识别心窦房结、传导束,为研究窦房结、传导束相关疾病提供分子检测工具。 展开更多
关键词 心钠肽 窦房结 心传导束 兔单克隆抗体 免疫印迹 免疫组织化学
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