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抗猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIV毒素单克隆抗体的制备及初步应用 被引量:2
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作者 张志妮 张伟娟 +5 位作者 林燕清 顾万军 黄良宗 朱军 姚丰华 朱国强 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第4期36-42,共7页
据猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)apxⅣ毒素基因5′端的保守区域设计一对特异性引物,应用PCR方法扩增出致病性App1~12血清型菌株的保守5′端序列片段,构建的重组质粒pETapxⅣN经IPTG诱导表达出分子量大小为... 据猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,App)apxⅣ毒素基因5′端的保守区域设计一对特异性引物,应用PCR方法扩增出致病性App1~12血清型菌株的保守5′端序列片段,构建的重组质粒pETapxⅣN经IPTG诱导表达出分子量大小为35.3kDa的可溶性重组蛋白。以亲和层析试剂盒纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗ApxⅣ毒素单克隆抗体(McAb)。以间接ELISA法筛选到两株分泌稳定、抗体亚类均为IgGl的杂交瘤细胞5B7和5C11,其培养上清和小鼠腹水抗体效价分别为1∶64、1∶128和1∶64 000、1∶128 000.两株单抗与临床猪瘟病毒、猪圆环病毒、猪呼吸道繁殖障碍综合征病毒、猪黄、白痢产肠毒素大肠杆菌和猪肺疫多杀性巴氏杆菌感染阳性血清均不发生交叉反应,显示出良好的特异性.竞争性结合试验表明两株单抗识别不同的抗原结合表位.以(NH4)2SO4盐析法纯化的5C11小鼠腹水单抗包被酶标板,生物素标记纯化的5B7单抗建立了检测ApxⅣ毒素的双抗体夹心ELISA法,其包被单抗最佳工作浓度为4μg/ml,生物素标记单抗最佳工作浓度为0.8μg/mL,对重组表达ApxⅣ毒素(rApxⅣ)的最低检出量为60pg/mL。从10份临床病猪血清样本中检出6份ApxⅣ毒素阳性,与细菌分离鉴定和PCR结果相符合,结果表明此法可用于App感染的临床诊断。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ毒素 表达 单克隆抗体
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小鼠肝炎病毒抗体ELISA和IFA检测试剂盒真实性评价 被引量:3
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作者 张志妮 郭中敏 严楚 《中国动物检疫》 CAS 2018年第3期94-97,共4页
为评价小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA和IFA检测试剂盒的真实性,选择两种进口MHV抗体ELISA和IFA试剂盒检测26份小鼠血清,并对检测结果进行对比评价。检测结果显示,26份血清中,13份两种试剂盒检测的结果全为阳性,11份全为阴性,剩余2份分别为... 为评价小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA和IFA检测试剂盒的真实性,选择两种进口MHV抗体ELISA和IFA试剂盒检测26份小鼠血清,并对检测结果进行对比评价。检测结果显示,26份血清中,13份两种试剂盒检测的结果全为阳性,11份全为阴性,剩余2份分别为ELISA阳性、IFA阴性。评价结果显示,参比IFA,ELISA试剂盒灵敏度为100%,特异度为84.61%,误诊率为15.38%,漏诊率为0,准确度为92.30%,正确指数为0.846,阳性似然比为650%,阴性似然比为0。结果初步证实,ELISA试剂盒配合IFA试剂盒适用于MHV抗体的日常监测。 展开更多
关键词 小鼠肝炎病毒抗体 ELISA IFA 真实性 初步评估
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高校实验动物中心动物质量控制研究与创新实践 被引量:2
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作者 张志妮 杨力衡 +1 位作者 严楚 蔡卫斌 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期77-81,共5页
目的实验动物质量直接关系着研究和评价数据的准确性和可重复性,亦是公共卫生安全的主要部分。方法针对高校动物中心来源复杂、人员流动性大、需求多样等特点,从管理体系建立和病原检测角度提升实验动物质量。结果建立并执行了实验动物... 目的实验动物质量直接关系着研究和评价数据的准确性和可重复性,亦是公共卫生安全的主要部分。方法针对高校动物中心来源复杂、人员流动性大、需求多样等特点,从管理体系建立和病原检测角度提升实验动物质量。结果建立并执行了实验动物准入制度、哨兵动物监测制度、动物用品监测制度等系列管理体系,自2018年以来,检测了1481批次非活体动物样本,106批次病原阳性,检测了395例活体动物样本,38例病原阳性,检测了363份动物相关用品。结论禁止了数批烈性传染病病原阳性动物的进入、严密监视了条件致病菌阳性动物的来源单位、及时调整和更新了大小鼠监测病原谱,从而提升了实验动物质量。 展开更多
关键词 实验动物 质量控制 病原 高校
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布鲁氏杆菌病的危害及防控技术概述 被引量:7
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作者 严楚 彭凯 张志妮 《广东畜牧兽医科技》 2022年第1期61-64,共4页
布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引发的人畜共患性传染病,全国每年因布鲁氏杆菌病造成的经济损失超过100亿元。布鲁氏杆菌属于革兰氏阴性菌,具有抗逆性强、易变异、潜伏周期长、传染性强、传染源广、危害性大、致死率高的特点。布鲁氏杆菌... 布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引发的人畜共患性传染病,全国每年因布鲁氏杆菌病造成的经济损失超过100亿元。布鲁氏杆菌属于革兰氏阴性菌,具有抗逆性强、易变异、潜伏周期长、传染性强、传染源广、危害性大、致死率高的特点。布鲁氏杆菌病影响机体生长和繁殖性能,危害动物和人类健康,是畜牧业及公共卫生亟待解决的共性问题。布鲁氏杆菌病的防控重点在于“防”,实际生产中应当采取全面消毒、疫苗接种、药物预防等措施,提高防范意识。本文综述了布鲁氏杆菌病的流行病学特征、对动物和人类的危害以及主要防疫措施,旨为布鲁氏杆菌病的预防和治疗提供参考。 展开更多
关键词 动物 布鲁氏杆菌 疫病 防疫措施
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罗非鱼链球菌综合防控技术研究进展 被引量:5
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作者 严楚 彭凯 张志妮 《广东畜牧兽医科技》 2021年第6期13-16,共4页
2019年,罗非鱼全国产量突破164万吨,在促进我国渔业增效和出口创汇方面起重要支撑作用。罗非鱼链球菌病发病快、死亡率高、危害性极强,是制约罗非鱼养殖产业可持续发展亟待解决的问题。罗非鱼链球菌的防控受养殖水质、营养状况、防疫水... 2019年,罗非鱼全国产量突破164万吨,在促进我国渔业增效和出口创汇方面起重要支撑作用。罗非鱼链球菌病发病快、死亡率高、危害性极强,是制约罗非鱼养殖产业可持续发展亟待解决的问题。罗非鱼链球菌的防控受养殖水质、营养状况、防疫水平、动物品种等多个因素的影响。本文综述了水质调控、免疫增强剂、疫苗及抗病育种在罗非鱼链球菌病防治上的应用和最新研究进展,旨在为罗非鱼链球菌病的有效防控提供参考。 展开更多
关键词 罗非鱼 链球菌 防疫 存活率
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