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题名猪Mx1基因的克隆表达及抗病毒活性研究
被引量：2
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作者
刘玉洁
赵协
张廷虹
曹广明
扬志昆
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机构
山东省日照市动物疫病预防控制中心
山东农业大学动物科技与动物医学院
山东省兽药质量检验所
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出处
《中国动物传染病学报》
CAS
2014年第4期35-39,共5页
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基金
山东省科技攻关项目(2009GG10009011)
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文摘
本文应用(RT-PCR)技术,从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7 h的PK15细胞的cDNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK(15)细胞系Mx1 cDNA序列中3'端11bp的缺失,成功获得Mx1完整基因的克隆。构建了重组表达质粒pRetroQ-sMx1,转染HEK293T细胞并表达Mx1蛋白,利用微量细胞病变抑制法测定其抗病毒活性。双酶切鉴定和核酸序列测定证实pRetroQ-sMx1真核表达质粒构建成功,转染HEK 293T细胞后,能够检测到绿色荧光,Western blot证实为目的蛋白。微量细胞病变抑制法测定重组蛋白具有一定的抗水疱性口炎病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。重组Mx1具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组Mx1蛋白的活性以及Mx1抗病毒药物奠定了基础。
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关键词
Mx1基因
克隆
真核表达
抗病毒活性
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Keywords
Mx1 gene
clone
eukaryotic expression
antiviral activity
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分类号
S852.651
[农业科学—基础兽医学]
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题名猪IP-10蛋白真核表达载体的构建
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作者
赵协
张廷虹
常维山
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机构
山东农业大学动物科技学院
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出处
《山东畜牧兽医》
2010年第2期5-6,共2页
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文摘
根据GenBank上发表的猪IP-10蛋白的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,采用RT-PCR方法扩增出目的片段,将扩增产物连接到表达载体pcDNA3.1上,进行序列测定和分析。结果表明,所克隆的目的基因的核苷酸长为312bp,共编码104个氨基酸。该基因片段与已发表的猪IP-10蛋白基因核苷酸序列同源性为100%,氨基酸同源性为100%。本试验为重组猪IP-10蛋白的生产及功能研究奠定了基础。
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关键词
猪IP-10蛋白
重组质粒
表达
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分类号
Q522.6
[生物学—生物化学]
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