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基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究
被引量:
4
1
作者
张如佳
王阳
+2 位作者
王美南
井金学
李振岐
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2007年第5期87-91,共5页
为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h...
为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h,可裂膜承载压力为1 100 Psi时进行轰击转化,所得的小麦条锈菌夏孢子在含有潮霉素的培养基上萌发率最高,为36.09%。进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁,在筛选品种上筛选,将筛选到的突变体在其上继代培养4代,获得了两个稳定的毒性突变菌株MM-2、MM-3。MM-2菌株对南大2419的毒性减弱,反应型由野生菌系的4型变为2型;MM-3菌株在南大2419的反应型由野生菌系的4型变为2、3型,毒性发生分化。采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变。进一步用Hyg基因特异PCR在两个突变菌系中均扩增到目的片段,表明MM-2、MM-3的突变是由Hyg基因插入引起的。
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关键词
小麦条锈菌
基因枪
毒性变异
插入突变
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职称材料
基因枪法转化基因在小麦条锈菌中的瞬时表达
被引量:
5
2
作者
王阳
王美南
+3 位作者
张如佳
徐长刚
冯强
李振岐
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期1115-1118,共4页
以小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)野生毒性菌株为转化受体,以含有gus报告基因的质粒(pGUS6L20)和潮霉素抗性基因的质粒(pKLHyg14)为载体,应用基因枪法研究了小麦条锈菌夏孢子遗传转化的瞬时表达特征。结果表明,在金粉...
以小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)野生毒性菌株为转化受体,以含有gus报告基因的质粒(pGUS6L20)和潮霉素抗性基因的质粒(pKLHyg14)为载体,应用基因枪法研究了小麦条锈菌夏孢子遗传转化的瞬时表达特征。结果表明,在金粉直径为0.6μm、射程6cm、载体DNA5μL、可裂膜压力为900Psi或1100Psi时,gus基因和潮霉素抗性基因的瞬时表达率相对较高。
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关键词
小麦条锈菌
基因枪转化
瞬时表达
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职称材料
题名
基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究
被引量:
4
1
作者
张如佳
王阳
王美南
井金学
李振岐
机构
西北农林科技大学植保学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2007年第5期87-91,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30370921)
西北农林科技大学青年基金项目(04ZM088)
教育部和西北农林科技大学创新团队支持项目
文摘
为了得到带有明确遗传标记的毒性突变菌株,应用基因枪转化技术,以小麦条锈菌野生白化菌系为转化受体,以含有潮霉素抗性基因(Hyg)的质粒为插入载体,对基因枪介导小麦条锈菌插入突变的条件进行了研究。结果表明,当小麦条锈菌夏孢子萌动2 h,可裂膜承载压力为1 100 Psi时进行轰击转化,所得的小麦条锈菌夏孢子在含有潮霉素的培养基上萌发率最高,为36.09%。进一步将转化的小麦条锈菌夏孢子进行扩繁,在筛选品种上筛选,将筛选到的突变体在其上继代培养4代,获得了两个稳定的毒性突变菌株MM-2、MM-3。MM-2菌株对南大2419的毒性减弱,反应型由野生菌系的4型变为2型;MM-3菌株在南大2419的反应型由野生菌系的4型变为2、3型,毒性发生分化。采用中国鉴别寄主对突变体的毒性研究表明,各突变菌株的毒性均较原始菌系发生了明显改变。进一步用Hyg基因特异PCR在两个突变菌系中均扩增到目的片段,表明MM-2、MM-3的突变是由Hyg基因插入引起的。
关键词
小麦条锈菌
基因枪
毒性变异
插入突变
Keywords
Puccinia striiform
biolistics
pathogenicity variation
insertion mutation
分类号
S435.121 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
基因枪法转化基因在小麦条锈菌中的瞬时表达
被引量:
5
2
作者
王阳
王美南
张如佳
徐长刚
冯强
李振岐
机构
西北农林科技大学植保学院
出处
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期1115-1118,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30370921)
西北农林科技大学青年基金项目(04ZM088)
西北农林科技大学创新团队项目
文摘
以小麦条锈菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)野生毒性菌株为转化受体,以含有gus报告基因的质粒(pGUS6L20)和潮霉素抗性基因的质粒(pKLHyg14)为载体,应用基因枪法研究了小麦条锈菌夏孢子遗传转化的瞬时表达特征。结果表明,在金粉直径为0.6μm、射程6cm、载体DNA5μL、可裂膜压力为900Psi或1100Psi时,gus基因和潮霉素抗性基因的瞬时表达率相对较高。
关键词
小麦条锈菌
基因枪转化
瞬时表达
Keywords
Puccinia striiformis f. sp. Tritici
transformation by particle bombardment
transient expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
S512.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基因枪介导小麦条锈菌毒性突变的研究
张如佳
王阳
王美南
井金学
李振岐
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2007
4
在线阅读
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职称材料
2
基因枪法转化基因在小麦条锈菌中的瞬时表达
王阳
王美南
张如佳
徐长刚
冯强
李振岐
《西北植物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
在线阅读
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职称材料
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