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马疱疹病毒1型分离毒株对叙利亚金黄地鼠的致病性: 1; 作者刘建华撒瑞雪 +8 位作者张嗣玉李银涛邓智超贾晗铎赵敏付玉杨一明冉多良加尔肯《畜牧兽医学报》北大核心 2025年第1期327-334,共8页; 为了解从伊犁地区分离的EHV-1/China/YL2023的生物学特性及其对叙利亚金黄地鼠的致病性,采用蚀斑试验、病毒培养与增殖、饱和硫酸铵浓缩及蔗糖密度梯度离心等方法,对分离株进行纯化。使用不同剂量的EHV-1/China/YL2023病毒,以鼻内接种... 展开更多; 关键词马疱疹病毒1型蚀斑纯化病毒增殖致病性; 在线阅读下载PDF 职称材料

马疱疹病毒1型的RPA-CRISPR/Cas12a快速检测方法的建立: 2; 作者李银涛撒瑞雪 +4 位作者宋毅张嗣玉刘建华冉多良邓海峰《动物医学进展》北大核心 2025年第7期11-17,共7页; 马疱疹病毒1型(EHV-1)可引起马属动物的马鼻肺炎,临床特征主要表现为孕马流产,还会引起新生马驹呼吸道感染甚至死亡,对马产业造成很大危害。以重组酶聚合酶扩增(RPA)、CRISPR/Cas12a反式酶切反应为基础,旨在建立EHV-1的RPA-CRISPR/Cas12... 展开更多; 关键词马疱疹病毒1型重组酶聚合酶扩增 CRISPR/Cas12a系统快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

马疱疹病毒1型UL56蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备: 3; 作者张玉鉴撒瑞雪 +7 位作者吴桂灵杨凯舒张嗣玉李银涛齐晋卫杨贤斌邓智超刘建华《现代畜牧科技》 2024年第4期1-6,共6页; 为制备马疱疹病毒1型(EHV-1)UL56蛋白(pUL56)的多克隆抗体。该研究根据GenBank中EHV-1 YM2019株全基因组序列,采用Ni-NTA亲和层析纯化蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫BALB/c小鼠并制备pUL56多克隆抗体,经Western blot与间接ELISA试验测定多... 展开更多; 关键词马疱疹病毒1型 UL56蛋白原核表达多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表达的HepG2,LO2稳定细胞系: 4; 作者杨丽丽黄常新 +4 位作者李永强王聪洁沈靖陈艺丹张嗣玉《浙江临床医学》 2022年第12期1742-1744,共3页; 目的利用CRISPR/Cas9在肝癌细胞HepG2及正常肝组织细胞(LO2)中敲低RBBP4 eGFP报告基因,构建RBBP4低表达的HepG2及LO2稳定细胞系.方法基于CRISPR/Cas9系统原理,设计靶向细胞RBBP4基因第1个外显子的小向导RNA(sgRNA),构建具有左右同源臂和... 展开更多; 关键词视网膜母细胞瘤结合蛋白4 CRISPR/Cas9 系统HepG2细胞 LO2细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒1型分离毒株对叙利亚金黄地鼠的致病性: 1; 作者刘建华撒瑞雪张嗣玉李银涛邓智超贾晗铎赵敏付玉杨一明冉多良加尔肯; 机构新疆农业大学动物医学学院动物传染病实验室新疆农业大学动物医学学院; 出处《畜牧兽医学报》北大核心 2025年第1期327-334,共8页; 基金中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2023C03) 新疆农业大学大学生创新训练计划项目(S202210758063)。; 文摘为了解从伊犁地区分离的EHV-1/China/YL2023的生物学特性及其对叙利亚金黄地鼠的致病性,采用蚀斑试验、病毒培养与增殖、饱和硫酸铵浓缩及蔗糖密度梯度离心等方法,对分离株进行纯化。使用不同剂量的EHV-1/China/YL2023病毒,以鼻内接种的方式感染叙利亚金黄地鼠,探究该分离株的致病效果。结果表明,纯化后的EHV-1/China/YL2023分离株病毒滴度达10^(6.64) TCID_(50)·mL^(-1)。EHV-1/China/YL2023分离株感染4~5周龄叙利亚鼠后,14 d内的出现精神沉郁、食量减退、口部流涎、蜷缩、弓背、皮毛凌乱掉落及不同程度的神经症状。耐过地鼠的平均体重下降25.9%,10^(7)-10^(5) TCID_(50)·0.1 mL^(-1)剂量组的存活率均为50%。病理结果显示,不同剂量组的病毒对叙利亚鼠的肺部脑部造成不同程度的损伤,即肺泡壁增厚,脑部神经元肿胀、大量中性粒细胞、淋巴细胞浸润,出血充血等。不同组织病毒载量测定结果显示,叙利亚鼠的肺、脑及淋巴结中均含有病毒DNA,且在肺和脑中的含量较高。综上所述,EHV-1/China/YL2023分离株对4~5周龄叙利亚金黄地鼠具有较高的致病性。本研究为EHV-1生物学特性研究及其致病机理提供依据,为后期解决EHV-1的流传及疫苗的研发问题提供支持。; 关键词马疱疹病毒1型蚀斑纯化病毒增殖致病性; Keywords EHV-1 purification of plaque multiplication of virus pathogenicity; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒1型的RPA-CRISPR/Cas12a快速检测方法的建立: 2; 作者李银涛撒瑞雪宋毅张嗣玉刘建华冉多良邓海峰; 机构新疆农业大学动物医学学院伊犁哈萨克自治州昭苏马场; 出处《动物医学进展》北大核心 2025年第7期11-17,共7页; 基金新疆维吾尔自治区天山英才“三农”骨干人才培养项目(2022SNGGGCC021) 新疆维吾尔自治区重大科技专项子课题(2022A02013-2-5)。; 文摘马疱疹病毒1型(EHV-1)可引起马属动物的马鼻肺炎,临床特征主要表现为孕马流产,还会引起新生马驹呼吸道感染甚至死亡,对马产业造成很大危害。以重组酶聚合酶扩增(RPA)、CRISPR/Cas12a反式酶切反应为基础,旨在建立EHV-1的RPA-CRISPR/Cas12a快速检测方法。试验过程中通过对EHV-1-ORF68基因进行相似性与遗传进化分析,并根据其保守序列设计RPA引物与crRNA,建立EHV-1的RPA-CRISPR/Cas12a检测方法并进行特异性试验、敏感性试验以及临床样本检测。结果表明,建立的EHV-1的RPA-CRISPR/Cas12a方法可以特异性地检出EHV-1,对其他马相关病原进行检测均为阴性;最低检测限度为1.92×10^(2) copies/μL,为传统PCR方法灵敏度(1.92×10^(4) copies/μL)的100倍;检测时间短,总时长约为35 min;应用建立的方法对24份临床阳性样本进行检测,结果阳性检出率为66.7%,高于传统PCR方法的29.2%。所建立的EHV-1 RPA-CRISPR/Cas12a检测方法具有良好的特异性与敏感性,结果准确,可以作为快速检测EHV-1的有效方法。; 关键词马疱疹病毒1型重组酶聚合酶扩增 CRISPR/Cas12a系统快速检测; Keywords Equine herpesvirus type 1 Recombinase polymerase amplification CRISPR/Cas12a system Rapid detection; 分类号 S852.659.1 [农业科学—基础兽医学] S858.21 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马疱疹病毒1型UL56蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备: 3; 作者张玉鉴撒瑞雪吴桂灵杨凯舒张嗣玉李银涛齐晋卫杨贤斌邓智超刘建华; 机构新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室; 出处《现代畜牧科技》 2024年第4期1-6,共6页; 基金中央引导地方科技发展专项资金项目(ZYYD2023C03) 新疆农业大学大学生创新训练计划项目(S202210758063)。; 文摘为制备马疱疹病毒1型(EHV-1)UL56蛋白(pUL56)的多克隆抗体。该研究根据GenBank中EHV-1 YM2019株全基因组序列,采用Ni-NTA亲和层析纯化蛋白,与弗氏佐剂乳化后免疫BALB/c小鼠并制备pUL56多克隆抗体,经Western blot与间接ELISA试验测定多克隆抗体反应性。结果显示,纯化后的pUL56可以与EHV-1阳性血清发生反应;pUL56多克隆抗体的效价为1∶128 000,并能与pUL56特异性结合。本研究成功制备具有良好反应性的pUL56多克隆抗体,为pUL56功能特性及EHV-1致病机制的研究奠定理论基础。; 关键词马疱疹病毒1型 UL56蛋白原核表达多克隆抗体; Keywords Equidalphaherpesvirus1 UL56 protein prokaryotic expression polyclonal antibody; 分类号 S858.21 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表达的HepG2,LO2稳定细胞系: 4; 作者杨丽丽黄常新李永强王聪洁沈靖陈艺丹张嗣玉; 机构杭州师范大学附属医院临安市人民医院杭州市余杭区二院杭州市肿瘤医院; 出处《浙江临床医学》 2022年第12期1742-1744,共3页; 基金浙江省重大科技项目(2017C03053)。; 文摘目的利用CRISPR/Cas9在肝癌细胞HepG2及正常肝组织细胞(LO2)中敲低RBBP4 eGFP报告基因,构建RBBP4低表达的HepG2及LO2稳定细胞系.方法基于CRISPR/Cas9系统原理,设计靶向细胞RBBP4基因第1个外显子的小向导RNA(sgRNA),构建具有左右同源臂和P2A-eGFP供体质粒的干扰质粒;将测序鉴定正确的重组质粒分别转染至HepG2及LO2细胞中,通过嘌呤霉素筛选细胞系,提取RNA和蛋白,分别通过QPCR和蛋白质印迹分析检测RBBP4敲低对细胞系的影响.结果QPCR及和蛋白质印迹分析结果提示筛选的HepG2及LO2细胞系中RBBP4基因及蛋白表达减低(P<0.05).结论通过CRISPR/Cas9系统成功构建了RBBP4稳定敲低的HepG2及LO2细胞系.; 关键词视网膜母细胞瘤结合蛋白4 CRISPR/Cas9 系统HepG2细胞 LO2细胞; Keywords Retinoblastoma binding protein 4 CRISPR/Cas9 system HepG2 cell LO2 cell; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	操作
1	马疱疹病毒1型分离毒株对叙利亚金黄地鼠的致病性	刘建华撒瑞雪张嗣玉李银涛邓智超贾晗铎赵敏付玉杨一明冉多良加尔肯	《畜牧兽医学报》北大核心	2025	在线阅读下载PDF 职称材料
2	马疱疹病毒1型的RPA-CRISPR/Cas12a快速检测方法的建立	李银涛撒瑞雪宋毅张嗣玉刘建华冉多良邓海峰	《动物医学进展》北大核心	2025	在线阅读下载PDF 职称材料
3	马疱疹病毒1型UL56蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备	张玉鉴撒瑞雪吴桂灵杨凯舒张嗣玉李银涛齐晋卫杨贤斌邓智超刘建华	《现代畜牧科技》	2024	在线阅读下载PDF 职称材料
4	利用CRISPR/Cas9建立RBBP4低表达的HepG2,LO2稳定细胞系	杨丽丽黄常新李永强王聪洁沈靖陈艺丹张嗣玉	《浙江临床医学》	2022	在线阅读下载PDF 职称材料