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猪瘟病毒E2基因部分表位区重组猪伪狂犬病病毒的构建及生物学特性研究
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作者 王林青 张刘辉 +3 位作者 陈曦艋 马世杰 宋月 陈红英 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1815-1824,共10页
【目的】猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是当前影响生猪产业发展的两种重要病原,目前无高效的药物治疗方法,主要依靠疫苗接种进行预防。本试验旨在构建含有CSFV E2基因部分表... 【目的】猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是当前影响生猪产业发展的两种重要病原,目前无高效的药物治疗方法,主要依靠疫苗接种进行预防。本试验旨在构建含有CSFV E2基因部分表位区的重组PRV毒株,并探究其生物学特性,为开发同时预防CSFV和PRV的二联疫苗提供参考。【方法】首先使用基因工程技术将包含CSFV E2蛋白B/C/D/A 4个表位区的一段基因插入pG-EGFP重组质粒的BamHⅠ位点,构建重组质粒pG-E2AD-EGFP;然后将质粒转染已接种PRV三基因缺失毒株rPRV NY-gE^(-)/gI^(-)/TK^(-)的ST细胞,在ST细胞内发生同源重组,利用蚀斑纯化法拯救出带绿色荧光蛋白的重组病毒rPRV-E2AD-EGFP。使用CRISPR/Cas9敲除载体敲除EGFP基因,经蚀斑纯化得到无荧光的重组病毒rPRV-E2AD。利用PCR扩增和Western blotting检测重组病毒rPRV-E2AD的E2基因A-D表位区表达情况。通过半数组织培养感染剂量(TCID50)法检测不同理化性质处理后病毒增殖情况,对重组病毒培养特性、理化特性进行评价。【结果】通过细胞内同源重组和病毒蚀斑纯化,得到了同时表达CSFV E2AD抗原和EGFP的重组病毒rPRV-E2AD-EGFP。通过CRISPR/Cas9技术敲除EGFP基因,得到了无EGFP基因表达的重组病毒rPRV-E2AD。Western blotting检测结果显示,该毒株表达蛋白大小约27 ku,与预期CSFV E2AD抗原大小一致。rPRV-E2AD毒株与亲本株在ST、IPEC-J2、PK-15、Vero细胞中生长特性基本一致,均在感染后12 h引起细胞融合,36 h出现细胞脱落。理化特性检测结果显示,重组毒株与亲本株在相同理化条件处理下,培养特性相似。【结论】本研究成功获得重组病毒rPRV-E2AD,且外源基因不影响亲本株的增殖特性,试验结果为研发重组CSFV E2基因活载体疫苗提供了候选毒株,也为PRV活载体疫苗的开发提供了研究基础。 展开更多
关键词 猪瘟病毒(CSFV) 伪狂犬病病毒(PRV) 重组病毒 E2基因
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屏蔽室脉冲波屏蔽效能模型估计方法 被引量:3
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作者 石立华 司卿 +2 位作者 张琦 张刘辉 郭东义 《电波科学学报》 EI CSCD 北大核心 2013年第1期124-129,共6页
根据连续波条件下测得的屏蔽室屏蔽效能,采用相位重建、最佳逼近元法参数估计以及迭代修正算法,建立了屏蔽室脉冲波屏蔽效能的时域估计模型.该模型采用系统离散传递函数形式,可通过数字滤波估计出屏蔽室内脉冲波的响应波形和脉冲波峰值... 根据连续波条件下测得的屏蔽室屏蔽效能,采用相位重建、最佳逼近元法参数估计以及迭代修正算法,建立了屏蔽室脉冲波屏蔽效能的时域估计模型.该模型采用系统离散传递函数形式,可通过数字滤波估计出屏蔽室内脉冲波的响应波形和脉冲波峰值屏蔽效能.通过滤波器建模实验和脉冲磁场屏蔽实验,验证了该方法的有效性,为由屏蔽室连续波测量结果评估脉冲波响应提供了可行途径. 展开更多
关键词 屏蔽效能 频响函数 最佳逼近元法 相位估计
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DeweyTP:一种面向概率XML数据的编码方案 被引量:2
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作者 陈子阳 刘佳 +1 位作者 张刘辉 周军锋 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2013年第11期26-32,共7页
与普通XML文档相比,概率XML数据中节点的类型不唯一且节点的出现具有相应的概率。提出一种高效的编码策略DeweyTP,该编码策略为每个XML数据节点分配唯一的能够体现节点类型和路径概率的编码,来支持节点类型检测和路径概率提取,因而提升... 与普通XML文档相比,概率XML数据中节点的类型不唯一且节点的出现具有相应的概率。提出一种高效的编码策略DeweyTP,该编码策略为每个XML数据节点分配唯一的能够体现节点类型和路径概率的编码,来支持节点类型检测和路径概率提取,因而提升系统性能。最后通过实验从时间和空间两方面验证了DeweyTP编码的高效性。 展开更多
关键词 概率XML文档 DeweyTP编码 编码方案 DEWEY编码
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大电流作用下电缆转移阻抗非线性特性研究 被引量:1
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作者 石立华 张刘辉 +1 位作者 张祥 周颖慧 《电波科学学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第3期515-520,共6页
为了研究屏蔽电缆受外界电磁脉冲作用可能产生的非线性效应,提出了屏蔽电缆表面转移阻抗的大电流注入测试方法.建立了大电流注入测试系统,通过注入测试方法获得了不同电流等级下电缆转移阻抗曲线,对比了两类屏蔽多芯电缆的芯线电磁脉冲... 为了研究屏蔽电缆受外界电磁脉冲作用可能产生的非线性效应,提出了屏蔽电缆表面转移阻抗的大电流注入测试方法.建立了大电流注入测试系统,通过注入测试方法获得了不同电流等级下电缆转移阻抗曲线,对比了两类屏蔽多芯电缆的芯线电磁脉冲耦合情况.实验表明:加入一层铁磁性屏蔽层的多芯电缆在注入电流峰值超过2kA时,芯线耦合电压会呈现非线性效应.并分析了该现象产生的原因. 展开更多
关键词 电磁脉冲 屏蔽电缆 非线性效应 转移阻抗
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