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自制开放式荧光光谱仪的搭建、性能测试与实际应用 被引量:1
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作者 孙春霖 姜姚乐 +5 位作者 陈雨 郭荣婧 沈永雯 惠新平 张保新 潘效波 《大学化学》 CAS 2024年第5期287-295,共9页
荧光检测在化学分析、生物检测等多个领域得到广泛应用,因此对本科生进行相关实验教学具有重要意义。本实验成功创制了一套价格低廉、体积小巧的开放式荧光光谱仪,对其性能进行全面评估,并成功应用于实际样品的检测。这有助于培养学生... 荧光检测在化学分析、生物检测等多个领域得到广泛应用,因此对本科生进行相关实验教学具有重要意义。本实验成功创制了一套价格低廉、体积小巧的开放式荧光光谱仪,对其性能进行全面评估,并成功应用于实际样品的检测。这有助于培养学生的仪器设计和创制意识,增强他们对自主创制仪器的信心。 展开更多
关键词 荧光检测 自制荧光光谱仪 本科实验教学 四方酸素染料 国产仪器设备
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RT-PCR方法检测犬瘟热的流行情况 被引量:2
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作者 裘云云 施朋飞 +3 位作者 夏飞琴 张保新 赵凡凡 王晓杜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期76-78,共3页
犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬科烈性传染病,给患病动物带来重大危害。本研究基于犬瘟热病毒的NP蛋白基因设计特异性引物,利用RT-PCR获得287bp目的片段,经TA克隆并测序。结果表明,该片段与NCBI上公布的犬瘟热病毒NP序列(登录号:EU716322... 犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬科烈性传染病,给患病动物带来重大危害。本研究基于犬瘟热病毒的NP蛋白基因设计特异性引物,利用RT-PCR获得287bp目的片段,经TA克隆并测序。结果表明,该片段与NCBI上公布的犬瘟热病毒NP序列(登录号:EU716322)同源性达到98%。利用该特异性的RT-PCR方法,检测杭州市及周边部分地区犬瘟热的流行情况,结果表明,整个杭州及周边地区犬瘟热病毒总阳性检出率为6.7%,杭州城区阳性个体数最多,阳性率最高达到18.8%,其他地方(临安、台州、舟山)阳性率较低。该研究为犬瘟热的综合防制提供基础数据。 展开更多
关键词 犬瘟热 RT-PCR 杭州 流行
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猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备 被引量:1
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作者 沈红霞 韩秀杰 +3 位作者 赵凡凡 张保新 余风艳 王晓杜 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期396-400,共5页
猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,... 猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia co1i BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白。为了提高表达量,JEV-NS1基因的958~1 245 bp被截短。聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明:JEV-NS1表达量明显提高,纯化后含量达到总蛋白的85%以上。纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus,制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体,western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性。 展开更多
关键词 动物学 日本乙型脑炎病毒 NS1 原核表达 纯化 抗体
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猪日本脑炎病毒NS3蛋白的基因克隆、原核表达及纯化
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作者 韩秀杰 张保新 +3 位作者 赵凡凡 余风艳 沈红霞 王晓杜 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第2期5-8,共4页
提取猪日本脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增JEV的NS3基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,酶切鉴定和PCR鉴定重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS3,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组His... 提取猪日本脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增JEV的NS3基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,酶切鉴定和PCR鉴定重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS3,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组His-JEV-NS3蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,his-band试剂盒纯化重组蛋白。获得了1.8kb NS3基因片段,成功构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS3。IPTG诱导获得分子质量为64ku的His-JEV-NS3蛋白,该蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占总菌体蛋白的30%以上,纯化后获得高纯度重组蛋白,其占总蛋白比例达70%以上。 展开更多
关键词 日本脑炎病毒 NS3 原核表达 纯化
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蛋白质中总巯基的测定及标记 被引量:1
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作者 张保新 范卓 +4 位作者 于晨昕 刘喆 沈永雯 惠新平 房建国 《大学化学》 CAS 2022年第5期44-52,共9页
生物硫醇的检测与蛋白质荧光标记是当今科学研究的热门领域。本实验使用传统的Ellman法及Naph-EA-Mal荧光探针标记法对牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的巯基进行检测,并利用该探针实现了细胞内巯基的原位标记,使学生对传统方... 生物硫醇的检测与蛋白质荧光标记是当今科学研究的热门领域。本实验使用传统的Ellman法及Naph-EA-Mal荧光探针标记法对牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的巯基进行检测,并利用该探针实现了细胞内巯基的原位标记,使学生对传统方法和前沿热点均有较好的掌握和了解。通过本实验的开展,学生不仅可以清楚了解蛋白三维结构对其所含基团的反应活性的影响,而且可以从化学层面理解硫醇类探针的工作原理及活细胞中生物硫醇的原位成像。实验内容涵盖蛋白质还原、变性、生物大分子与小分子的分离、生物大分子的化学修饰以及活细胞荧光成像等,综合性强且容易操作。教学内容可以实现模块化,便于不同学校根据条件选取相应的教学内容。教学实践不仅可以让学生复习巩固化学生物学知识,也帮助学生了解前沿交叉学科热点,同时在虚拟实验平台开设了补充实验,使得教学更加立体化。 展开更多
关键词 蛋白质巯基 Ellman法 荧光探针 活细胞成像 蛋白质的化学修饰
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常用传感器+Arduino平台在物联网领域的应用探索 被引量:4
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作者 张保新 张春霞 梁进龙 《现代信息科技》 2019年第17期137-139,共3页
典型的传感器数据输出接口类型,包括模拟型、数字状态型(0、1型)、1-Wire型、I2C型和SPI型。使用这些类型的传感器及相应特定编写的驱动程序,Arduino平台能获得被测环境多种状态的数字化表述数据。通过适当的数据融合处理、增加信息传输... 典型的传感器数据输出接口类型,包括模拟型、数字状态型(0、1型)、1-Wire型、I2C型和SPI型。使用这些类型的传感器及相应特定编写的驱动程序,Arduino平台能获得被测环境多种状态的数字化表述数据。通过适当的数据融合处理、增加信息传输(Wi-Fi+4G)及云端应用(OneNet平台)等功能,这种平台可用于物联网的感知层、传输层、应用层的教学活动之中,也适合实际网络的建设。 展开更多
关键词 传感器 ARDUINO 驱动程序
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试论监理行业现行管理模式的利弊
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作者 张保新 《建设监理》 1999年第6期33-34,共2页
关键词 工程建设 监理行业 管理模式
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教学拉曼光谱仪的模块化组装及实验教学应用
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作者 叶为春 杨海朋 +8 位作者 潘婷 范祥花 杨秀佳 王然 马萌萌 徐鑫鑫 张保新 沈永雯 曾智聪 《大学化学》 2025年第2期130-136,共7页
鉴于拉曼光谱在分析检测上的独特优势,本文研制一款体积小、成本低、适合拆卸组装的教学型拉曼光谱仪,以培养学生在化学测量学领域上的拔尖综合能力;利用自主开发的仪器部件进行模块化设计和组装,开展具有科学性和趣味性的拉曼光谱检测... 鉴于拉曼光谱在分析检测上的独特优势,本文研制一款体积小、成本低、适合拆卸组装的教学型拉曼光谱仪,以培养学生在化学测量学领域上的拔尖综合能力;利用自主开发的仪器部件进行模块化设计和组装,开展具有科学性和趣味性的拉曼光谱检测应用。在理解拉曼光谱技术原理的同时掌握拉曼测试技能,提升学生的知识综合应用能力、动手能力和创新意识,帮助学生深入理解科学仪器内在构造、仪器设计和性能优化,激发学生的仪器创制热情。 展开更多
关键词 教学拉曼光谱仪 模块化组装 仪器调试 拉曼检测 教学应用
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