猪流行性腹泻病毒COE蛋白在TP309水稻细胞中的表达及纯化

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作者 陈金炫 史倩倩 +6 位作者 潘世源 陈恒耀 寇少康 楚红燕 张磊 张二芹 张改平 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期1-5,共5页

为获得TP309水稻细胞表达的猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE蛋白,根据水稻密码子偏爱性优化并合成COE基因,构建植物重组质粒pCAMBIA1300-COE,通过根癌农杆菌EHA105介导法将pCAMBIA1300-COE转入水稻愈伤组织。经过暗培养和潮霉素B筛选新愈伤;... 为获得TP309水稻细胞表达的猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE蛋白,根据水稻密码子偏爱性优化并合成COE基因,构建植物重组质粒pCAMBIA1300-COE,通过根癌农杆菌EHA105介导法将pCAMBIA1300-COE转入水稻愈伤组织。经过暗培养和潮霉素B筛选新愈伤;PCR鉴定阳性愈伤;阳性愈伤研磨后制成细胞并进行培养,阳性细胞经无糖诱导培养10 d后,Western blot鉴定表达COE蛋白;并利用Q阴离子层析和MMC阳离子层析纯化COE蛋白。结果显示,经潮霉素筛选获得73个新愈伤,PCR检测有50个阳性愈伤,阳性率约为68.49%,Western blot检测有15个水稻细胞株表达COE蛋白,COE蛋白经Q和MMC纯化后,其纯度达到50%左右。这些研究结果对制备猪流行性腹泻亚单位疫苗具有重要意义。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻 COE蛋白 水稻愈伤 水稻植株 纯化

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禽脑脊髓炎病毒Van Roekel株衣壳蛋白基因原核表达及其ELISA检测研究 被引量：3

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作者 张二芹 赵心力 +3 位作者 赵振华 孙明 陈西钊 钱爱东 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期55-58,共4页

利用RT PCR方法扩增了禽脑脊髓炎病毒VP0、VP3和VP1基因 ,分别插入pGEX 4T 1原核表达载体 ,转化到E .coliER2 566表达菌内 ,经IPTG诱导表达后 ,SDS PAGE分析表达产物。结果表明 ,表达的VP0、VP3、VP1融合蛋白分子量分别为 53 ,53 ,56ku... 利用RT PCR方法扩增了禽脑脊髓炎病毒VP0、VP3和VP1基因 ,分别插入pGEX 4T 1原核表达载体 ,转化到E .coliER2 566表达菌内 ,经IPTG诱导表达后 ,SDS PAGE分析表达产物。结果表明 ,表达的VP0、VP3、VP1融合蛋白分子量分别为 53 ,53 ,56ku。以电洗脱法纯化VP0、VP3、VP1表达蛋白抗原并分别建立了间接ELISA方法 ,用阳性血清和阴性血清进行检测。结果显示 ,表达VP1蛋白反应活性相对高于VP0、VP3蛋白反应活性 ,最后再将自制VP1板用自配试剂检测其活性 ,同时用美国试剂盒检测VP1活性 ,美国ELISA试剂盒、琼脂扩散试验检测同样 1 0份血清作比较 ,三组ELISA检测结果 ,其中有 8份被检血清为阳性 ;2份被检血清为阴性。这一结果与琼脂扩散试验检测结果一致。说明VP1表达蛋白活性达到预期要求 。 展开更多

关键词 禽脑脊髓炎病毒 VP0、VP3、VP1基因 原核表达 ELISA

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轮状病毒转基因植物疫苗的研究进展 被引量：3

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作者 张二芹 李世访 +1 位作者 王春凤 钱爱东 《动物医学进展》 CSCD 2005年第8期37-40,共4页

轮状病毒病是引起人和动物肠胃炎的一种传染病,发病率和死亡率较高,至今没有特效药可以治疗,传统疫苗预防效果不佳。随着生物技术的不断发展,一种新型的转基因植物疫苗有望解决这个难题。人类和动物食用了这种转基因植物之后,就可以获... 轮状病毒病是引起人和动物肠胃炎的一种传染病,发病率和死亡率较高,至今没有特效药可以治疗,传统疫苗预防效果不佳。随着生物技术的不断发展,一种新型的转基因植物疫苗有望解决这个难题。人类和动物食用了这种转基因植物之后,就可以获得抗体,产生免疫力,以预防此病。 展开更多

关键词 轮状病毒 肠胃炎 转基因植物 疫苗

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不同品种紫花苜蓿愈伤组织及分化体系的建立 被引量：2

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作者 张二芹 马强 +2 位作者 王云 高宛莉 郭亚君 《安徽农业科学》 CAS 2012年第29期14172-14173,共2页

[目的]建立不同品种紫花苜蓿的愈伤组织及分化体系。[方法]以4个品种的无菌苗子叶为外植体,研究不同的激素浓度及基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导及分化的影响。[结果]4个品种诱导形成的愈伤组织差别不大;最佳胚性愈伤组织诱导培养基... [目的]建立不同品种紫花苜蓿的愈伤组织及分化体系。[方法]以4个品种的无菌苗子叶为外植体,研究不同的激素浓度及基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导及分化的影响。[结果]4个品种诱导形成的愈伤组织差别不大;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH+2,4-D 2 mg/L+KT 0.05 mg/L;苜蓿王的分化率和出苗率表现较佳;最佳分化培养基为改良SH+KT 0.4 mg/L。[结论]该试验为今后筛选易分化的苜蓿品种和研究"转基因苜蓿疫苗"奠定了基础。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 组织培养 愈伤组织 分化

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环境因子对盆栽刺槐苗木生理生长变化影响的通径分析 被引量：8

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作者 赵丽英 杨建伟 +1 位作者 张二芹 杜瑞卿 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第4期140-145,共6页

刺槐（Robinnia pseudoscacia）林是黄土高原半干旱半湿润地区植被恢复和重建的人工林主要类型之一,作为一种典型的中生树种,既喜湿润肥沃又耐干旱瘠薄,

关键词 通径分析法 环境因子 刺槐 相关性

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新城疫病毒F蛋白在水稻中的表达及检测 被引量：3

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作者 许倩茹 张二芹 +9 位作者 郭军庆 杨继飞 刘运超 王爱萍 王丽 万博 汪磊 蒋大伟 邓瑞广 张改平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1167-1172,共6页

旨在研究水稻表达新城疫病毒F蛋白,制备亚单位疫苗。根据GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏爱性密码子筛选、优化并合成F基因,通过两次载体构建,先使目的基因连在中间载体pMP3上,再连接到pCAMBIA1300植物载体上,通过农杆菌导入... 旨在研究水稻表达新城疫病毒F蛋白,制备亚单位疫苗。根据GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏爱性密码子筛选、优化并合成F基因,通过两次载体构建,先使目的基因连在中间载体pMP3上,再连接到pCAMBIA1300植物载体上,通过农杆菌导入水稻愈伤组织中,经过潮霉素抗性筛选,获得表达植株。通过QPCR的方法筛选获得高表达的纯合子株系5株。新城疫抗原试纸条检测和Western blot检测确定F蛋白具有良好的反应原性。本试验为家禽传染病的植物性水稻疫苗研究奠定了基础。 展开更多

关键词 新城疫病毒 F基因 植物表达载体 QPCR 纯合子

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J亚群白血病病理学观察及抗原定位 被引量：4

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作者 成子强 赵振华 +2 位作者 张利 张二芹 高娃 《动物医学进展》 CSCD 2005年第2期83-86,共4页

通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主... 通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主要 在骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、心肌等组织 中出现瘤细胞增生,并有炎性反应;免疫组在 3周龄时,肝脏、心脏、肺脏、小肠、肾脏、卵巢、 骨骼肌开始出现阳性反应,抗原主要在胞浆 中出现,呈深蓝色颗粒。在10周龄～14周龄 时,骨髓呈中度的阳性反应,而其它组织的阳 性信号出现的程度未见大的变化;在23周龄 时,肝内肿瘤呈较强阳性反应,信号主要集中 在细胞核;整个实验过程中,法氏囊、脑始终 呈阴性反应。研究发现,骨髓及肿瘤的抗原 性较强,并且肿瘤的抗原性要强于骨髓;另外 还发现,在阳性反应强的组织中,病变较明 显,肿瘤细胞增生明显,即阳性反应的组织器 官易形成肿瘤转移灶。 展开更多

关键词 禽白血病病毒J亚群 病理学观察 免疫组化 抗原定位

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聚合物改性水泥混凝土力学性能试验研究 被引量：2

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作者 黄志强 张二芹 吕晨曦 《低温建筑技术》 2015年第5期15-17,共3页

聚合物改性水泥基复合材料的应用逐渐广泛,文中主要是通过试验的方法对环氧树脂改性水泥混凝土的抗压强度、抗拉强度、抗折强度等力学性能进行了试验研究,试验通过聚合物掺量为0、3％、5％、8％、10％这五种混凝土试件测得的各种强度及... 聚合物改性水泥基复合材料的应用逐渐广泛,文中主要是通过试验的方法对环氧树脂改性水泥混凝土的抗压强度、抗拉强度、抗折强度等力学性能进行了试验研究,试验通过聚合物掺量为0、3％、5％、8％、10％这五种混凝土试件测得的各种强度及弹性模量,得到了聚合物掺量对聚合物改性水泥混凝土力学性能的影响,并提出了混凝土的强度评价指标,试验结论:当聚合物掺量在8％～10％范围内时对混凝土力学性能综合改性效果最好. 展开更多

关键词 聚合物改性水泥混凝土 力学性能 强度评价指标 影响因素

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植物雌激素对老年性大鼠股骨生物力学特性的影响

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作者 赵丽英 张二芹 +3 位作者 刘声 杜瑞卿 高允海 黄豪 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第11期234-237,共4页

目的:揭示植物雌激素对老年性骨生物力学的影响程度。方法:选取120只老龄性SD清洁级大鼠,分成4组,每组分别喂养3个月、6个月和10个月的不同批次处死,取股骨测量6项生物力学指标,并进行统计分析。结果:植物雌激素在10个月、6个月和3个月... 目的:揭示植物雌激素对老年性骨生物力学的影响程度。方法:选取120只老龄性SD清洁级大鼠,分成4组,每组分别喂养3个月、6个月和10个月的不同批次处死,取股骨测量6项生物力学指标,并进行统计分析。结果:植物雌激素在10个月、6个月和3个月不同时期都表现出能增强骨生物力学特性的作用,能改善骨质量;而单纯依靠增加钙剂量在6个月和3个月内作用却不明显,10个月内可以改善骨生物力学的特性,但不全面;在使用植物雌激素的同时,增加钙含量,对改善骨生物力学的特性更好。结论:单纯食钙对预防骨质疏松症和改善骨质量的作用有限,经常适量食用含植物雌激素丰富的大豆或大豆制品对预防骨质疏松症和较全面改善骨质量有积极意义。 展开更多

关键词 植物雌激素 骨生物力学特性 实验研究

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用ELISA对种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体调查

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作者 王海艳 张二芹 +1 位作者 王金玲 赵振华 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期110-111,共2页

为了调查种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体 ,从北京、山东、内蒙古地区共 4个种鸡场购买种蛋抽取蛋清共 55份 ,其中肉鸡种蛋清3 8份 ,蛋鸡种蛋清 1 7份 ,在 AL V-Jgp85抗原包被的 96孔板中进行微量滴定 ,两个肉鸡场种蛋中 AL V-J母源... 为了调查种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体 ,从北京、山东、内蒙古地区共 4个种鸡场购买种蛋抽取蛋清共 55份 ,其中肉鸡种蛋清3 8份 ,蛋鸡种蛋清 1 7份 ,在 AL V-Jgp85抗原包被的 96孔板中进行微量滴定 ,两个肉鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 .3 3 % (1 /3 0 ) ,2 5% (2 / 8) ,两个蛋鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 3 .3 % (3 / 9) ,3 7.5% (3 / 8)。 展开更多

关键词 ELISA 种蛋 禽骨髓细胞 瘤病毒 母源抗体 鸡

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动物医学制药专业中蛋白纯化教学改革探索 被引量：3

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作者 张二芹 潘佳佳 +1 位作者 陈红英 张同旭 《安徽农业科学》 CAS 2021年第21期277-279,282,共4页

生物制品的质量关系到人类和动物的健康,而蛋白纯化是生物制品的质量保证,因此通过课堂教学、实验操作和考核方式,学生掌握蛋白纯化的基本策略和方法,其目的让学生做到学以致用,为研发单位和企业培养一批应用型人才。

关键词 动物医学制药专业 生物制品 蛋白纯化 教学方法

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水泥基渗透结晶型防水材料的研究现状 被引量：4

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作者 张二芹 高剑秋 《广东建材》 2022年第7期23-26,共4页

水泥基渗透结晶型防水材料用于水泥混凝土结构,可以提高混凝土的密实度,降低混凝土的渗透性,从而提高混凝土的防水性能和耐久性能。该类材料使混凝土具有微裂缝自修复功能,可弥补混凝土材料自身的诸多不足,为混凝土结构提供长久保护。... 水泥基渗透结晶型防水材料用于水泥混凝土结构,可以提高混凝土的密实度,降低混凝土的渗透性,从而提高混凝土的防水性能和耐久性能。该类材料使混凝土具有微裂缝自修复功能,可弥补混凝土材料自身的诸多不足,为混凝土结构提供长久保护。本文综合叙述了水泥基渗透结晶型防水材料的作用机理,对混凝土力学性能、耐久性能和裂缝自修复功能影响的研究现状。 展开更多

关键词 水泥基渗透结晶 作用机理 力学性能 耐久性 自修复

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